【保存条件】 -20℃避光保存，有效期1年。 【进口原料】 ROCHE REF10236276001, LOT53197821（不同批次产品原料批次会有更新） 【概述】 DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)是一种能够与DNA中大部分A、T碱基相互结合的荧光染料，常用于荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当DAPI与双链DNA结合时，最大吸收波长为358nm，最大发射波长为461nm。DAPI的发射光为蓝色，且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠，可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。本产品母液为DMF溶解，后以PBS稀释为DAPI-PBS溶液，浓度为10μg/ml。经过滤处理，为即用型工作液，可直接用于固定细胞或组织样品的细胞核染色。 【使用方法（仅供参考）】 1. 对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的DAPI染色。 2. 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量DAPI染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的染色液，混匀。 3. 室温放置5-10分钟。 4. 吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。 5. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。 【注意事项】 1. DAPI被普遍认为具有致癌性，操作时应戴手套，并避免交叉污染。 2. 本产品需避光，并尽量避免反复冻融。 3. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 TBST缓冲液是生物学中常使用的等渗缓冲盐溶液，主要用于Western Blot实验中洗去膜上非特异性结合的抗体等试剂。由Tris-HCl构成稳定的pH缓冲体系，NaCl提供等渗条件，Tween-20作为去污剂可增加缓冲液的洗脱能力。 本产品为20×浓缩液，需要稀释成1×工作液后使用，用后请及时拧紧瓶盖，以防挥发。4℃保存可延长产品保质期，长期不用建议低温保存。 【使用建议】 请将20×TBST缓冲液稀释成1×使用，如50ml 20×TBST缓冲液加入950ml ddH2O稀释。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 若低温储存时产品出现结晶析出，请置于37℃水浴至完全溶解。 3. 用后请及时拧紧瓶盖，以防挥发。

【保存条件】 -20℃避光保存，有效期1年；4℃避光储存，有效期3个月。 【概述】 固定液可使细胞或组织的蛋白质凝固，终止内源性或外源性酶反应，防止组织自溶或异溶，以保持原有结构和形态。对免疫组化而言更有原位保存抗原的作用，避免抗原失活或弥散。固定液种类很多，常见的有多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、丙酮等。 多聚甲醛固定液是一种广泛用于免疫组化(IHC)、免疫荧光( IF)、免疫细胞化学(IC)、流式分析(FACS)等检测时组织、组织切片、细胞等生物样品固定的溶液。 本产品为4% 多聚甲醛PBS溶液(4% PFA)，主要由多聚甲醛、磷酸盐、去离子水组成，该固定液适合于绝大多数组织和细胞的固定，是免疫组织化学和培养细胞的固定液之一，它能较好的保护组织和细胞的形态结构以及核酸。其固定效果好、应用广，适用于各种常见细胞或组织的固定，对皮肤、肌肉、内脏等均有良好的固定效果，但主要作用于蛋白质，无法固定尿酸和糖类等。 若需使用低浓度多聚甲醛，可使用PBS按比例稀释。 【使用建议】 对于细胞样品，去除培养液后，按照每六孔板一个孔加入1毫升固定液的比例，加入4%多聚甲醛固定液。对于细胞涂片等其它细胞样品，加入固定液的量以充分盖住样品为准。通常室温固定10-20分钟即可，但固定较长时间，例如1-2小时也是可以的。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。 对于组织切片，加入4% 多聚甲醛固定液量以充分覆盖切片为准，或使用染色架进行固定。通常室温固定10-20分钟即可完成固定，但切片较厚时可以固定较长时间，例如1-2小时。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。 对于组织块样品，浸泡入4% 多聚甲醛固定液中，室温或4℃浸泡固定2到24小时。建议不超过8小时，除非组织块特别大，难以渗透。固定完成后，放入装有蒸馏水的离心管中清洗，每15-30分钟换一次水，共6-8次，建议在摇床进行，或用流水冲洗1-2小时。随后梯度脱水，进行包埋。如果暂时不包埋可放入70-75%的酒精中保存。 如将组织样品置于4% 多聚甲醛固定液中浸泡储存，请避光放置。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用，不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 本产品放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸，使溶液pH降低，从而影响染色。 4. 不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。 5. 多聚甲醛虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。 6. 多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中，固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留，因此后续实验结果如果受醛基影响，须尽量洗去残留的多聚甲醛。 7. 多聚甲醛固定液固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。 8. 醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，可造成假阴性的染色，影响免疫组化结果。因此，多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。

【保存条件】 4℃保存，有效期1年。 【概述】 RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western和ELISA等。 RIPA的本意是Radio Immuno Precipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为高强度、中强度、低强度三类。请根据不同需求选择不同强度RIPA裂解液。 【使用建议】 如发现RIPA有沉淀，请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。根据使用量，取每1ml RIPA加入10μl PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。混匀备用（PMSF现用现加）。 1. 样品前处理： a) 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照6孔板每孔细胞量加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。 b) 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。 c) 对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。 2. 后处理：将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting和免疫沉淀等操作。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 本产品长时间低温存放可能会出现沉淀，可在37ºC水浴约10分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。 3. 为保证最佳的使用效果，请尽量避免过多的反复冻融，可分装后使用。 4. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行，根据需要添加不同抑制剂。 5. RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。 6. 该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。