【保存条件】室温保存12个月，4度保存可延长使用时间。【概述】本品用于蛋白实验的清洗，其组成浓度为1% SDS, 0.1M NaHCO3.【注意事项】1. 本品仅用于科研用途，不得用于临床或诊断相关研究2. 低温储存时可能会有SDS析出，若有析出可加热5-10分钟溶解即可。

【保存条件】EK-6200-A于4℃保存，其余-20℃保存，有效期1年。【概述】哺乳动物组织/细胞总蛋白提取试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，作用较为强烈，可快速获得总蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验。【使用建议】取1ml的预冷裂解液 Total Protein Extraction Buffer中加入20ul的蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物和10ul PMSF；混匀，放置在冰上备用；1. 样品前处理：a) 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照6孔板每孔细胞量加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。b) 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。c) 对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。2. 后处理：将裂解后的样品10000-14000g于4℃下离心15-30分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting和免疫沉淀等操作。（暂时不使用蛋白尽快保存于-80℃中，即用即取，避免反复冻融，避免长时间冻存）。【注意事项】1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。2. 本产品长时间低温存放可能会出现沉淀，可在37ºC水浴约10分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。3. 为保证最佳的使用效果，请尽量避免过多的反复冻融，可分装后使用。4. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。5. 裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。6. 该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

【保存条件】EK-6200-A于4℃保存，其余-20℃保存，有效期1年。【概述】哺乳动物组织/细胞总蛋白提取试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，作用较为强烈，可快速获得总蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验。【使用建议】取1ml的预冷裂解液 Total Protein Extraction Buffer中加入20ul的蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物和10ul PMSF；混匀，放置在冰上备用；1. 样品前处理：a) 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照6孔板每孔细胞量加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。b) 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。c) 对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。2. 后处理：将裂解后的样品10000-14000g于4℃下离心15-30分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting和免疫沉淀等操作。（暂时不使用蛋白尽快保存于-80℃中，即用即取，避免反复冻融，避免长时间冻存）。【注意事项】1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。2. 本产品长时间低温存放可能会出现沉淀，可在37ºC水浴约10分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。3. 为保证最佳的使用效果，请尽量避免过多的反复冻融，可分装后使用。4. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。5. 裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。6. 该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

【保存条件】2-8℃避光保存，有效期1年。【概述】碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一种常用的细胞核荧光染料，作为一种溴化乙锭（EB）的类似物，能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。PI经488 nm荧光激发，产生相对较大的斯托克司频移后，并在617 nm处具有最大发射波长。另外，PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外，但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用以上特性，PI可作为细胞活力分析的荧光探针之一。不仅可单独使用；也可以同Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用，同时对活细胞和死细胞染色和鉴定。也能够与488 nm激发的荧光素如FITC和PE等联合使用。 本品为Sigma原料配制即用型PI染色液，可进入死细胞内与DNA结合，并被活细胞排斥在外，适合用于流式细胞仪进行细胞活力分析。PI单染用FL2通道检测，若与FITC或PE标记抗体/蛋白联合使用FL3通道检测【使用方法（仅供参考）】1. 收集细胞，计数，最高以1×106 cells/100 μL的量加入FACS分选管2. 加2ml PBS（或HBSS）清洗细胞，300 × g离心5 min，去上清。重复一次。 注：若需要用抗体标记表面抗原，可在此步之后进行。PI不适合与检测胞内分子的抗体联合使用。3. 细胞清洗后，用100 μL流式细胞染色缓冲液（ED-8765，Cell Staining Buffer (Flow Cytometry)）重悬细胞；加入10 μL PI染色液，轻柔混匀，冰上或者室温避光孵育10-15 min。4. 直接上机进行流式分析。注：PI染色后不可再清洗细胞。PI染色孵育后尽快上机检测。【注意事项】1. 碘化丙啶（PI）是已知的诱变剂，操作过程中一定要做好防护工作避免与PI的直接接触。另外PI溶液在丢弃之前需要先经过活性炭处理。2. 流式细胞染色缓冲液可选择货号：ED-8765 Cell Staining Buffer (Flow Cytometry)。3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。4. 仅用于实验室研究，不适合农业/家庭/临床用途使用。

【保存条件】2-8℃避光保存，有效期1年。【概述】碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一种常用的细胞核荧光染料，作为一种溴化乙锭（EB）的类似物，能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。PI经488 nm荧光激发，产生相对较大的斯托克司频移后，并在617 nm处具有最大发射波长。另外，PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外，但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用以上特性，PI可作为细胞活力分析的荧光探针之一。不仅可单独使用；也可以同Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用，同时对活细胞和死细胞染色和鉴定。也能够与488 nm激发的荧光素如FITC和PE等联合使用。 本品为Sigma原料配制即用型PI染色液，可进入死细胞内与DNA结合，并被活细胞排斥在外，适合用于流式细胞仪进行细胞活力分析。PI单染用FL2通道检测，若与FITC或PE标记抗体/蛋白联合使用FL3通道检测【使用方法（仅供参考）】1. 收集细胞，计数，最高以1×106 cells/100 μL的量加入FACS分选管2. 加2ml PBS（或HBSS）清洗细胞，300 × g离心5 min，去上清。重复一次。 注：若需要用抗体标记表面抗原，可在此步之后进行。PI不适合与检测胞内分子的抗体联合使用。3. 细胞清洗后，用100 μL流式细胞染色缓冲液（ED-8765，Cell Staining Buffer (Flow Cytometry)）重悬细胞；加入10 μL PI染色液，轻柔混匀，冰上或者室温避光孵育10-15 min。4. 直接上机进行流式分析。注：PI染色后不可再清洗细胞。PI染色孵育后尽快上机检测。【注意事项】1. 碘化丙啶（PI）是已知的诱变剂，操作过程中一定要做好防护工作避免与PI的直接接触。另外PI溶液在丢弃之前需要先经过活性炭处理。2. 流式细胞染色缓冲液可选择货号：ED-8765 Cell Staining Buffer (Flow Cytometry)。3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。4. 仅用于实验室研究，不适合农业/家庭/临床用途使用。

【保存条件】 2-8℃避光保存，有效期1年。 【概述】 碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一种常用的细胞核荧光染料，作为一种溴化乙锭（EB）的类似物，能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。PI经488 nm荧光激发，产生相对较大的斯托克司频移后，并在617 nm处具有最大发射波长。另外，PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外，但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用以上特性，PI可作为细胞活力分析的荧光探针之一。不仅可单独使用；也可以同Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用，同时对活细胞和死细胞染色和鉴定。也能够与488 nm激发的荧光素如FITC和PE等联合使用。 本品为Sigma原料配制即用型PI染色液，可进入死细胞内与DNA结合，并被活细胞排斥在外，适合用于流式细胞仪进行细胞活力分析。PI单染用FL2通道检测，若与FITC或PE标记抗体/蛋白联合使用FL3通道检测 【使用方法（仅供参考）】 1. 收集细胞，计数，最高以1×106 cells/100 μL的量加入FACS分选管 2. 加2ml PBS（或HBSS）清洗细胞，300 × g离心5 min，去上清。重复一次。 注：若需要用抗体标记表面抗原，可在此步之后进行。PI不适合与检测胞内分子的抗体联合使用。 3. 细胞清洗后，用100 μL流式细胞染色缓冲液（ED-8765，Cell Staining Buffer (Flow Cytometry)）重悬细胞；加入10 μL PI染色液，轻柔混匀，冰上或者室温避光孵育10-15 min。 4. 直接上机进行流式分析。注：PI染色后不可再清洗细胞。PI染色孵育后尽快上机检测。 【注意事项】 1. 碘化丙啶（PI）是已知的诱变剂，操作过程中一定要做好防护工作避免与PI的直接接触。另外PI溶液在丢弃之前需要先经过活性炭处理。 2. 流式细胞染色缓冲液可选择货号：ED-8765 Cell Staining Buffer (Flow Cytometry)。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 4. 仅用于实验室研究，不适合农业/家庭/临床用途使用。

【保存条件】室温避光保存，有效期至少一年【概述】苏木素染色(hematoxylin staining or haematoxylin staining)，也被称作苏木精染色，是最常用的组织和细胞的染色方法之一。无色的苏木素(hematoxylin)氧化后形成有醌环结构(quinoid ring)的氧化苏木素(hematein or haematein)，从而可以和三价的铝离子、铁离子等形成有颜色的带正电荷的复合物(如hematein-Al3+ complexes)。氧化苏木素(也称氧化苏木精)和铝离子等形成有色的复合物的过程也被称为Dye Lake Formation。细胞核内基因组DNA的双螺旋结构中，双链上的磷酸基团向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的氧化苏木素复合物结合，从而形成细胞核染色。苏木素染色液有多种不同的配制方法，不同的方法可以把细胞核染色成不同深浅的蓝色或蓝紫色。伊红(eosin)是一种化学合成的酸性染料，在水中解离成带负电荷的阴离子，可以和蛋白质氨基上带正电荷的阳离子结合，从而使细胞胞浆染成不同程度的红色或粉红色，与苏木素染色液染色形成的蓝色细胞核形成鲜明对比，从而使苏木素伊红(HE)染色成为病理组织切片中最广泛使用的一种常规染色方法。本试剂盒使用试剂为优化后的Mayer法配方，苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色，细胞浆呈现粉红色或红色。【使用方法（仅供参考）】1.样品处理a.对于石蜡切片：二甲苯（自备）中脱蜡5-10分钟；换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟；无水乙醇浸泡5分钟；90%乙醇浸泡2分钟；80%乙醇浸泡2分钟；70%乙醇浸泡2分钟。蒸馏水洗涤2分钟。b.对于冰冻切片：固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。c.对于培养细胞：固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。2.苏木素伊红(HE)染色对于上述处理好的样品：a.苏木素染色液染色1-5分钟(可以根据染色结果和要求调整时间，根据组织大小和厚度进行调整)。b.蒸馏水洗去浮色，用适当的返蓝液浸泡样品10-60s（亦可用自来水中冲洗去多余的染色液，约10分钟）。c.蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。d.选做：根据不同分化液（自备）的分化时间，分化约2-30秒，自来水冲洗10分钟。e.伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。 此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。3.脱水、透明、封片观察70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，无水乙醇10秒。二甲苯透明5分钟。换用新鲜的二甲苯，再透明5分钟。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察，细胞核呈蓝色，而细胞浆呈粉红色或红色。【注意事项】1. 染色后的分化为选做步骤，但分化后核质着色更清晰。2. 染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。3. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。4. 伊红在水和梯度乙醇中会出现脱色，因此建议快速脱水。5. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。6. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温避光保存，有效期至少一年 【概述】 苏木素染色(hematoxylin staining or haematoxylin staining)，也被称作苏木精染色，是最常用的组织和细胞的染色方法之一。无色的苏木素(hematoxylin)氧化后形成有醌环结构(quinoid ring)的氧化苏木素(hematein or haematein)，从而可以和三价的铝离子、铁离子等形成有颜色的带正电荷的复合物(如hematein-Al3+ complexes)。氧化苏木素(也称氧化苏木精)和铝离子等形成有色的复合物的过程也被称为Dye Lake Formation。细胞核内基因组DNA的双螺旋结构中，双链上的磷酸基团向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的氧化苏木素复合物结合，从而形成细胞核染色。苏木素染色液有多种不同的配制方法，不同的方法可以把细胞核染色成不同深浅的蓝色或蓝紫色。 伊红(eosin)是一种化学合成的酸性染料，在水中解离成带负电荷的阴离子，可以和蛋白质氨基上带正电荷的阳离子结合，从而使细胞胞浆染成不同程度的红色或粉红色，与苏木素染色液染色形成的蓝色细胞核形成鲜明对比，从而使苏木素伊红(HE)染色成为病理组织切片中最广泛使用的一种常规染色方法。 本试剂盒使用试剂为优化后的Mayer法配方，苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色，细胞浆呈现粉红色或红色。 【使用方法（仅供参考）】 1.样品处理a.对于石蜡切片：二甲苯（自备）中脱蜡5-10分钟；换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟；无水乙醇浸泡5分钟；90%乙醇浸泡2分钟；80%乙醇浸泡2分钟；70%乙醇浸泡2分钟。蒸馏水洗涤2分钟。b.对于冰冻切片：固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。c.对于培养细胞：固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。2.苏木素伊红(HE)染色对于上述处理好的样品：a.苏木素染色液染色1-5分钟(可以根据染色结果和要求调整时间，根据组织大小和厚度进行调整)。b.蒸馏水洗去浮色，用适当的返蓝液浸泡样品10-60s（亦可用自来水中冲洗去多余的染色液，约10分钟）。c.蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。d.选做：根据不同分化液（自备）的分化时间，分化约2-30秒，自来水冲洗10分钟。e.伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。 此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。3.脱水、透明、封片观察70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，无水乙醇10秒。二甲苯透明5分钟。换用新鲜的二甲苯，再透明5分钟。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察，细胞核呈蓝色，而细胞浆呈粉红色或红色。 【注意事项】 1. 染色后的分化为选做步骤，但分化后核质着色更清晰。 2. 染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。 3. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。 4. 伊红在水和梯度乙醇中会出现脱色，因此建议快速脱水。 5. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。 6. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】室温避光储存，有效期两年【概述】溴化乙锭染液是检测DNA/RNA最常用的染料。EB是DNA嵌入剂，嵌入在DNA双螺旋碱基之间。DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料，而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。溴化乙锭-DNA复合物的荧光产率比没有结合DNA的染料高出20~30倍。【操作方法】1. 琼脂糖凝胶中添加溴化乙锭溶液（10000×）：根据需要配制适当浓度(例如1-3%)的琼脂糖胶液。在琼脂糖完全融解后，适当冷却但又不会使琼脂糖凝固时，按照每100ml胶液加入10µl 溴化乙锭溶液（10000×）。混匀后即可把琼脂糖胶液倒入制备凝胶的模具中。适当量的DNA或RNA在该胶中电泳后，用相应的凝胶成像系统检测(也可以使用常规的紫外灯或紫外凝胶成像检测系统)，就可以观察到明亮的核酸条带。2. 电泳完毕后对琼脂糖凝胶染色：按照每100ml的100mM NaCl溶液或水中加入10µl 溴化乙锭溶液（10000×），配制成染色工作液。把电泳完毕的琼脂糖凝胶放到适当的容器中，加入适量上述配制好的溴化乙锭染色工作液，确保至少盖住凝胶。在摇床上缓慢摇动(30-50rpm)染色20-30分钟。染色的时间根据胶的厚度而定，胶厚则染色时间需要长一些，胶薄则染色时间可以短一些。染色完毕后，在紫外灯下即可观察核酸条带。【注意事项】1.溴化乙锭为强烈的诱变剂，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。2.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

【保存条件】4ºC保存，避免强光直射，勿冷冻，有效期1年。【概述】固定剂、破膜剂用于细胞内细胞因子染色前对细胞膜的处理。固定剂起稳定细胞膜、保持细胞膜表面抗体与抗原结合的作用；破膜剂使流动的、完整的细胞膜产生小孔以利于抗体进入细胞。用流式细胞仪检测细胞内抗原及DNA时，对待测细胞进行固定、破膜处理后，加入相应抗体或检测试剂，孵育一定时间即可上机分析。将10×母液稀释后使用：如取100ml 10×母液加入900ml纯水稀释成1×工作液。【操作方法(仅供参考）】1. 收获待测细胞，1000 rpm离心10 分钟，弃上清。2. 加入 500 μL预冷(4℃)固定剂。3. 室温孵育10 分钟。4. 1000 rpm离心10 分钟。5. 弃上清，加入PBS洗一次，1000 rpm离心10 分钟。6. 弃上清，加入1.5 mL破膜剂。7. 室温孵育10-15 分钟。8. 1000 rpm离心5 分钟。9. 弃上清，加入适量破膜剂重悬细胞。10. 加入检测抗体进行染色后，用流式细胞仪进行分析【注意事项】1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。2. 用后请及时拧紧瓶盖，以防挥发。