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苏木素伊红(HE)染色试剂盒-100ml×2
ECOTOP货号:EK-5121-100ml×2(货期:现货)售价:¥260.00
苏木素伊红(HE)染色试剂盒-100ml×2
【保存条件】 室温避光保存,有效期至少一年 【概述】 苏木素染色(hematoxylin staining or haematoxylin staining),也被称作苏木精染色,是最常用的组织和细胞的染色方法之一。无色的苏木素(hematoxylin)氧化后形成有醌环结构(quinoid ring)的氧化苏木素(hematein or haematein),从而可以和三价的铝离子、铁离子等形成有颜色的带正电荷的复合物(如hematein-Al3+ complexes)。氧化苏木素(也称氧化苏木精)和铝离子等形成有色的复合物的过程也被称为Dye Lake Formation。细胞核内基因组DNA的双螺旋结构中,双链上的磷酸基团向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的氧化苏木素复合物结合,从而形成细胞核染色。苏木素染色液有多种不同的配制方法,不同的方法可以把细胞核染色成不同深浅的蓝色或蓝紫色。 伊红(eosin)是一种化学合成的酸性染料,在水中解离成带负电荷的阴离子,可以和蛋白质氨基上带正电荷的阳离子结合,从而使细胞胞浆染成不同程度的红色或粉红色,与苏木素染色液染色形成的蓝色细胞核形成鲜明对比,从而使苏木素伊红(HE)染色成为病理组织切片中最广泛使用的一种常规染色方法。 本试剂盒使用试剂为优化后的Mayer法配方,苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色,细胞浆呈现粉红色或红色。 【使用方法(仅供参考)】 1.样品处理a.对于石蜡切片:二甲苯(自备)中脱蜡5-10分钟;换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10分钟;无水乙醇浸泡5分钟;90%乙醇浸泡2分钟;80%乙醇浸泡2分钟;70%乙醇浸泡2分钟。蒸馏水洗涤2分钟。b.对于冰冻切片:固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。c.对于培养细胞:固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2分钟。2.苏木素伊红(HE)染色对于上述处理好的样品:a.苏木素染色液染色1-5分钟(可以根据染色结果和要求调整时间,根据组织大小和厚度进行调整)。b.蒸馏水洗去浮色,用适当的返蓝液浸泡样品10-60s(亦可用自来水中冲洗去多余的染色液,约10分钟)。c.蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。d.选做:根据不同分化液(自备)的分化时间,分化约2-30秒,自来水冲洗10分钟。e.伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。 此时,如果需要直接观察,可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行,70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。3.脱水、透明、封片观察70%乙醇10秒,80%乙醇10秒,90%乙醇10秒,无水乙醇10秒。二甲苯透明5分钟。换用新鲜的二甲苯,再透明5分钟。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察,细胞核呈蓝色,而细胞浆呈粉红色或红色。 【注意事项】 1. 染色后的分化为选做步骤,但分化后核质着色更清晰。 2. 染色液可以重复使用多次,认为效果不佳时再更换新的染色液。 3. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。 4. 伊红在水和梯度乙醇中会出现脱色,因此建议快速脱水。 5. 仅用于实验室,不适合农业/家庭/临床用途使用。 6. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
溴化乙锭EB溶液(10000×)
ECOTOP货号:ED-8672-5ml(货期:1-2天)售价:¥240.00
溴化乙锭EB溶液(10000×)
【保存条件】 室温避光储存,有效期两年 【概述】 溴化乙锭染液是检测DNA/RNA最常用的染料。EB是DNA嵌入剂,嵌入在DNA双螺旋碱基之间。DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料,而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。溴化乙锭-DNA复合物的荧光产率比没有结合DNA的染料高出20~30倍。 【操作方法】 1. 琼脂糖凝胶中添加溴化乙锭溶液(10000×):根据需要配制适当浓度(例如1-3%)的琼脂糖胶液。在琼脂糖完全融解后,适当冷却但又不会使琼脂糖凝固时,按照每100ml胶液加入10µl 溴化乙锭溶液(10000×)。混匀后即可把琼脂糖胶液倒入制备凝胶的模具中。适当量的DNA或RNA在该胶中电泳后,用相应的凝胶成像系统检测(也可以使用常规的紫外灯或紫外凝胶成像检测系统),就可以观察到明亮的核酸条带。 2. 电泳完毕后对琼脂糖凝胶染色:按照每100ml的100mM NaCl溶液或水中加入10µl 溴化乙锭溶液(10000×),配制成染色工作液。把电泳完毕的琼脂糖凝胶放到适当的容器中,加入适量上述配制好的溴化乙锭染色工作液,确保至少盖住凝胶。在摇床上缓慢摇动(30-50rpm)染色20-30分钟。染色的时间根据胶的厚度而定,胶厚则染色时间需要长一些,胶薄则染色时间可以短一些。染色完毕后,在紫外灯下即可观察核酸条带。 【注意事项】 1.溴化乙锭为强烈的诱变剂,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 2.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

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