【保存条件】
室温避光储存,有效期两年
【概述】
溴化乙锭染液是检测DNA/RNA最常用的染料。EB是DNA嵌入剂,嵌入在DNA双螺旋碱基之间。DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料,而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。溴化乙锭-DNA复合物的荧光产率比没有结合DNA的染料高出20~30倍。
【操作方法】
1. 琼脂糖凝胶中添加溴化乙锭溶液(10000×):
根据需要配制适当浓度(例如1-3%)的琼脂糖胶液。在琼脂糖完全融解后,适当冷却但又不会使琼脂糖凝固时,按照每100ml胶液加入10µl 溴化乙锭溶液(10000×)。混匀后即可把琼脂糖胶液倒入制备凝胶的模具中。适当量的DNA或RNA在该胶中电泳后,用相应的凝胶成像系统检测(也可以使用常规的紫外灯或紫外凝胶成像检测系统),就可以观察到明亮的核酸条带。
2. 电泳完毕后对琼脂糖凝胶染色:
按照每100ml的100mM NaCl溶液或水中加入10µl 溴化乙锭溶液(10000×),配制成染色工作液。把电泳完毕的琼脂糖凝胶放到适当的容器中,加入适量上述配制好的溴化乙锭染色工作液,确保至少盖住凝胶。在摇床上缓慢摇动(30-50rpm)染色20-30分钟。染色的时间根据胶的厚度而定,胶厚则染色时间需要长一些,胶薄则染色时间可以短一些。染色完毕后,在紫外灯下即可观察核酸条带。
【注意事项】
1.溴化乙锭为强烈的诱变剂,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
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