【保存条件】-20℃保存一年【操作方法】A: 对于贴壁细胞：用 PBS 洗一遍，用细胞刮子刮下细胞，或用 EDTA 溶液处理细胞使细胞不再贴壁很紧，并用移液器吹打下细胞。离心收集细胞，尽最大努力吸尽上清，留下细胞沉淀备用。（注：尽量避免用胰酶消化细胞，以免胰酶降解需抽提的目的蛋白。）B: 对于悬浮细胞：用预冷的 PBS 清洗一遍，离心收集细胞，尽最大努力吸尽上清，留下细胞沉淀备用。C: 对于组织：建议先用将组织剪成小块，然后使用匀浆器加入预冷缓冲液 C 匀浆（冰上处理）。注意：手动方法可能适用于某些软组织，例如大脑。1. 从组织/细胞中提取各组分蛋白①使用前在 Buffer C、N、M 中加入蛋白酶抑制剂(磷酸化研究则需同时添加磷酸酶抑制剂，现配现用)。②收集细胞，建议数量量 5-10×10 6个细胞，加入 240μl 移液预冷缓冲液 C（含抑制剂）。如有必要，可以增加使用更多缓冲液 C。不建议降低使用量，因为如果溶液变得太稠，这将影响细胞成分的分离。组织量最小不小于 40mg（每 g组织加入约 2ml 预冷缓冲液 C），太小的组织蛋白提取出来后浓度过低。③通过涡旋使细胞充分分散，持续 20 秒或至细胞完全分散。若细胞贴壁过紧无法涡旋分散则用移液器吹打至均匀，组织则加入缓冲液 C 后低温匀浆至完全均质化。④在 4°C 下孵育混合物 10 分钟（震荡孵育有助于更好裂解）。⑤将混合物在 4°C 下以最高转速或 13,000 g 转速下离心 10 分钟。吸出上清液并将其保存到另一个干净离心管中，上清液即为细胞质蛋白。沉淀包含膜、细胞核部分，放在冰上继续后续操作。离心转速越高越利于分离，离心时间亦可延长至 20 分钟。⑥加入 300μl 预冷缓冲液 C（无需蛋白酶抑制剂等）洗涤并重悬沉淀。每克组织加入 1.5ml 预冷缓冲液 C 清洗。⑦在 4°C 下孵育混合物 5 分钟（震荡孵育有助于更好清洗）。本步骤主要目的是清洗，低温下有利于蛋白稳定。⑧在 4°C 下再次以最高转速或 13,000 g 转速下离心 10 分钟。小心地倒掉上清液并丢弃，必要时用纸巾擦拭管子的边缘。该洗涤步骤仅有助于减少与细胞质蛋白的交叉污染，如果需要，可以重复多一次该步骤以减少交叉污染。⑨向沉淀中加入 100μl 预冷缓冲液 N，并从上一步骤中重悬沉淀。⑩在 4°C 下孵育混合物 10 分钟（震荡孵育有助于更好裂解）。11.在 4°C 下以最高转速或 13,000 g 转速下离心 10 分钟。取出上清液并将其保存到另一个离心管中，核蛋白位于该上清液中。剩余含膜蛋白沉淀离心管放在冰上，继续下游操作。12. 用每克组织 300μl 预冷缓冲液 C（无需蛋白酶抑制剂等）洗涤并重悬沉淀。本步骤主要目的是清洗，低温下有利于蛋白稳定。13. 在 4°C 下再次以最高转速或 13,000 g 转速下离心 10 分钟。小心地倒掉上清液并丢弃，必要时用纸巾擦拭管子的边缘。该洗涤步骤仅有助于减少与细胞核蛋白的交叉污染，如果需要，可以重复多一次该步骤以减少交叉污染。14. 向沉淀中加入每克组织 100μl 预冷缓冲液 M 并重悬。15. 在 4°C 下摇床震荡轻轻混合混合物 20 分钟（可增加超声 10 秒促溶解）。建议增加超声过程有助于膜蛋白的溶解，10 秒每次，可多次超声。16. 在 4°C 下以最高转速或 13,000 g 离心 10 分钟。取出上清液并将其保存到另一个离心管中，膜蛋白位于该上清液中。【注意事项】1. 该产品仅实验室使用，不适合农业/家庭/临床用途使用。2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】-20℃保存一年【操作方法】A: 对于贴壁细胞：用 PBS 洗一遍，用细胞刮子刮下细胞，或用 EDTA 溶液处理细胞使细胞不再贴壁很紧，并用移液器吹打下细胞。离心收集细胞，尽最大努力吸尽上清，留下细胞沉淀备用。（注：尽量避免用胰酶消化细胞，以免胰酶降解需抽提的目的蛋白。）B: 对于悬浮细胞：用预冷的 PBS 清洗一遍，离心收集细胞，尽最大努力吸尽上清，留下细胞沉淀备用。C: 对于组织：建议先用将组织剪成小块，然后使用匀浆器加入预冷缓冲液 C 匀浆（冰上处理）。注意：手动方法可能适用于某些软组织，例如大脑。1. 从组织/细胞中提取各组分蛋白①使用前在 Buffer C、N、M 中加入蛋白酶抑制剂(磷酸化研究则需同时添加磷酸酶抑制剂，现配现用)。②收集细胞，建议数量量 5-10×106个细胞，加入 240μl 移液预冷缓冲液 C（含抑制剂）。如有必要，可以增加使用更多缓冲液 C。不建议降低使用量，因为如果溶液变得太稠，这将影响细胞成分的分离。组织量最小不小于 40mg（每 g组织加入约 2ml 预冷缓冲液 C），太小的组织蛋白提取出来后浓度过低。③通过涡旋使细胞充分分散，持续 20 秒或至细胞完全分散。若细胞贴壁过紧无法涡旋分散则用移液器吹打至均匀，组织则加入缓冲液 C 后低温匀浆至完全均质化。④在 4°C 下孵育混合物 10 分钟（震荡孵育有助于更好裂解）。⑤将混合物在 4°C 下以最高转速或 13,000 g 转速下离心 10 分钟。吸出上清液并将其保存到另一个干净离心管中，上清液即为细胞质蛋白。沉淀包含膜、细胞核部分，放在冰上继续后续操作。离心转速越高越利于分离，离心时间亦可延长至 20 分钟。⑥加入 300μl 预冷缓冲液 C（无需蛋白酶抑制剂等）洗涤并重悬沉淀。每克组织加入 1.5ml 预冷缓冲液 C 清洗。⑦在 4°C 下孵育混合物 5 分钟（震荡孵育有助于更好清洗）。本步骤主要目的是清洗，低温下有利于蛋白稳定。⑧在 4°C 下再次以最高转速或 13,000 g 转速下离心 10 分钟。小心地倒掉上清液并丢弃，必要时用纸巾擦拭管子的边缘。该洗涤步骤仅有助于减少与细胞质蛋白的交叉污染，如果需要，可以重复多一次该步骤以减少交叉污染。⑨向沉淀中加入 100μl 预冷缓冲液 N，并从上一步骤中重悬沉淀。⑩在 4°C 下孵育混合物 10 分钟（震荡孵育有助于更好裂解）。11.在 4°C 下以最高转速或 13,000 g 转速下离心 10 分钟。取出上清液并将其保存到另一个离心管中，核蛋白位于该上清液中。剩余含膜蛋白沉淀离心管放在冰上，继续下游操作。12. 用每克组织 300μl 预冷缓冲液 C（无需蛋白酶抑制剂等）洗涤并重悬沉淀。本步骤主要目的是清洗，低温下有利于蛋白稳定。13. 在 4°C 下再次以最高转速或 13,000 g 转速下离心 10 分钟。小心地倒掉上清液并丢弃，必要时用纸巾擦拭管子的边缘。该洗涤步骤仅有助于减少与细胞核蛋白的交叉污染，如果需要，可以重复多一次该步骤以减少交叉污染。14. 向沉淀中加入每克组织 100μl 预冷缓冲液 M 并重悬。15. 在 4°C 下摇床震荡轻轻混合混合物 20 分钟（可增加超声 10 秒促溶解）。建议增加超声过程有助于膜蛋白的溶解，10 秒每次，可多次超声。16. 在 4°C 下以最高转速或 13,000 g 离心 10 分钟。取出上清液并将其保存到另一个离心管中，膜蛋白位于该上清液中。【注意事项】1. 该产品仅实验室使用，不适合农业/家庭/临床用途使用。2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】4℃保存，有效期 1 年【概述】考马斯亮兰 G-250 染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置（Imax），由 465nm 变为 595nm，在一定的浓度范围内，测定的吸光度值 A595 与蛋白质浓度成正比。本试剂盒和常规的 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒相比可以兼容一系列常见的去垢剂，和 BCA 法相比，能兼容高浓度的还原剂，并且检测速度极快，在检测含去垢剂样品蛋白浓度时，比 BCA 法更加便捷。生命科学研究中的很多蛋白样品都是含有去垢剂的，因此常规Bradford 法的使用受到了很大的限制，通常只能使用可以兼容去垢剂但检测比较耗时的 BCA法。如果使用本试剂盒，不仅 能兼容去垢剂，而且由于能立即显色，检测速度会比 BCA 法快很多。当蛋白样品中同时含有一定浓度的去垢剂和还原剂时，常规的 Bradford 法和 BCA法就都不能使用了，而本试剂盒仍然是可以检测的。本试剂盒测定蛋白浓度时不受较高浓度去垢剂的影响，可以很好地兼容 1% Triton X-100、1% Tween 20、1% SDS、1% NP-40 和 1% Brij35 等去垢剂。本试剂盒检测灵敏度高，最小蛋白检测量达到 0.5μg。【使用方法】1. 蛋白标准液的准备a. 蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，如果蛋白样品所在溶液不含有干扰本试剂盒检测的物质，也可以用 0.9%NaCl、PBS 或水稀释标准品。蛋白标准液(20mg/ml BSA)如果冻存，请完全融化并混匀后使用。b. 按照下表配制 0、0.125、0.25、0.5、0.75、1、1.5mg/ml 蛋白标准。每次稀释时注意充分混匀。如果有必要可以增加设置 0.0625mg/ml 的蛋白标准。2. 蛋白浓度测定a. 取 10µl 不同浓度蛋白标准加到 96 孔板的蛋白标准孔中。b. 取 10µl 样品到 96 孔板的样品孔中。如果样品不足 10µl，需加标准品稀释液补足到 10µl。请注意记录样品体积。c. 各孔加入 250µl G250 染色液。d. 用酶标仪测定 A595，或 560-610nm 之间的其它波长的吸光度。可以立即测定吸光度，也可以在最长 2 小时内测定，一般来说 2 小时内检测数据无显著变化。e. 根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品中的蛋白浓度。【注意事项】1. 本品 BSA 因每次使用量较小，推荐分装使用。2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 DNAex ZOL试剂（基因组DNA分离试剂）是一种完整且现成的试剂，用于从动物、植物、酵母和细菌来源的固体和液体样本中分离基因组DNA。DNAex ZOL试剂程序基于使用一种新型的胍-洗涤剂裂解溶液，该溶液允许从细胞裂解液中选择性沉淀DNA。DNAex ZOL试剂协议速度快，允许从大量小批量或大批量样品中分离基因组DNA。 【操作方法】 I. 样本处理 a. 培养皿中细胞样本处理：每个10平方厘米的培养皿中加入0.75-1.0毫升的DNAex ZOL试剂。通过吹打培养皿使细胞裂解，并轻轻将裂解液吸入离心管中。 b. 细胞沉淀或悬浮液：向1-3×107个细胞（沉淀或悬浮液中，体积小于0.1毫升）中加入1毫升的DNAex ZOL试剂。通过轻轻吸取液体使细胞裂解。 b. 全血样本：对于不超过100微升的全血，向血液中加入1毫升的DNAex ZOL并轻轻上下移动以裂解细胞。对于超过100微升的全血，离心沉淀细胞并用0.9%氯化钠洗涤。再次沉淀细胞，并在冷（4°C）低渗透溶液中（20mM Tris HCl（pH 8.0），10mM EDTA）中将细胞悬浮。以4,000转/分钟的速度在4°C离心10分钟。丢弃上清液加入1毫升DNAex ZOL(每1-3×107个细胞加入1ml DNAex ZOL)。通过轻轻吸取液体使细胞裂解。 4. 植物/动物等组织样本处理：每25-50mg组织样品中加入1ml DNAex ZOL进行均质化和裂解。匀浆结束后室温下10,000×g下离心10分钟。离心后，将所得上清液转移到新鲜的管离心管中。此步骤从裂解物/匀浆中去除不溶性组织片段、RNA和多余的多糖。它仅用于从肝脏、肌肉和大多数含有大量细胞和/或细胞外物质的组织中分离 DNA。 II. DNA沉淀 1. 通过在用于分离的每1 ml DNAex ZOL 试剂中加入0.5 ml 100% 乙醇，从裂解物/匀浆中沉淀 DNA。通过倒置混合样品并在室温下储存1-3分钟。DNA应迅速以浑浊沉淀物的形式可见。在室温或4°C下以10,000×g离心3-5分钟将沉淀DNA收集。 2. 在室温下以10,000×g离心3-5分钟将沉淀DNA收集。 通常，在管的底部以白色沉淀的形式获得DNA。有些样品DNA在试管底部形成凝胶状膜。用乙醇洗涤后，膜变得更可见。 III. DNA清洗 1. 用0.8-1.0ml 75%乙醇洗涤DNA沉淀两次。在每次洗涤时，通过倒置试管3-6次将DNA悬浮在乙醇中。 2. 室温下以10,000×g离心3-5分钟以使DNA沉降到试管底部，并通过移液除去乙醇。 IV. DNA溶解 1. 静置5-10分钟待乙醇挥发，无需过份干燥成固体，干燥成固体的DNA沉淀不易溶解 2. 加入约50-100μl 配套DNA溶解液可确保DNA沉淀物的完全溶解。 DNAex ZOL分离的DNA在Tris缓冲液中的再溶解度较低。因此，强烈建议使用配套溶解液，DNA在其中4°C下可稳定数月，在 -20°C 下可稳定一年以上。从肝脏、肌肉和植物等组织中分离出的 DNA 制剂可能含有一些不溶性物质（主要是多糖），通过在12,000×g离心10分钟除去不溶性物质即可。 【注意事项】 1. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

产品介绍 本试剂盒是最新一代的无毒无酚提取miRNA的方法，可以快速地从血浆及血清中提取miRNA。本产品仅供科研使用，请勿用于医药、临床治疗、食品级化妆品等用途。 存储条件 试剂室温干燥保存可至少稳定12个月。 需要额外准备的材料 □ 100%异丙醇 □ 80%乙醇（RNase-free水配制） □ 无RNase酶的1.5ml/2ml离心管 □ 无RNase酶的吸头 □ 干净的手套 □ 高速离心机 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 □ Buffer ML1和Buffer RWT作为浓缩液提供可能会形成沉淀，如果有沉淀出现请37-56℃加热溶解后室温使用。 □ Buffer RWT作为浓缩液提供，在第一次使用前加入2倍体积的乙醇（96-100％）以获得工作溶液。 □ Buffer RPE作为浓缩液提供，在第一次使用前加入4倍体积的乙醇（96-100％）以获得工作溶液。 □ RNase-free水中不含任何抑菌因子，室温放置或操作时可能会引入细菌或真菌污染，使用时尽量注意，推荐开瓶后分装保存以减少污染风险保证实验稳定性。 □ 若要处理冷冻样品，请在37°C 的水浴中孵育，直到样品完全解冻并溶解。避免长时间孵育，否则可能会损害RNA的完整性。

产品介绍 本试剂盒是最新一代的无毒无酚提取miRNA的方法，可以快速地从血浆及血清中提取miRNA。本产品仅供科研使用，请勿用于医药、临床治疗、食品级化妆品等用途。 存储条件 试剂室温干燥保存可至少稳定12个月。 需要额外准备的材料 □ 100%异丙醇 □ 80%乙醇（RNase-free水配制） □ 无RNase酶的1.5ml/2ml离心管 □ 无RNase酶的吸头 □ 干净的手套 □ 高速离心机 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 □ Buffer ML1和Buffer RWT作为浓缩液提供可能会形成沉淀，如果有沉淀出现请37-56℃加热溶解后室温使用。 □ Buffer RWT作为浓缩液提供，在第一次使用前加入2倍体积的乙醇（96-100％）以获得工作溶液。 □ Buffer RPE作为浓缩液提供，在第一次使用前加入4倍体积的乙醇（96-100％）以获得工作溶液。 □ RNase-free水中不含任何抑菌因子，室温放置或操作时可能会引入细菌或真菌污染，使用时尽量注意，推荐开瓶后分装保存以减少污染风险保证实验稳定性。 □ 若要处理冷冻样品，请在37°C 的水浴中孵育，直到样品完全解冻并溶解。避免长时间孵育，否则可能会损害RNA的完整性。

产品介绍 本试剂盒可以快速地从细胞、组织、全血、骨髓、体液、细菌、病毒等样本中提取总RNA。本产品仅供科研使用，请勿用于医药、临床治疗、食品级化妆品等用途。 存储条件 室温干燥保存可至少稳定24个月。 需要额外准备的材料 □ 无水乙醇（96%-100%） □ 无RNase酶的1.5ml离心管 □ 无RNase酶的枪头 □ 干净的手套 □ 离心机 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。。 □ Buffer RFL在储存时可能会形成沉淀， 如果有沉淀出现，请37-56℃加热溶解后室温使用。 □ Buffer RPE作为浓缩液提供，在第一次使用前加入4倍体积的乙醇（96-100％）以获得工作溶液。 □ RNase-free水中不含任何抑菌因子，室温放置或操作时可能会引入细菌或真菌污染，使用时尽量注意，推荐开瓶后分装保存以减少污染风险保证实验稳定性。 □ RNA在Buffer RFL中时不会被RNase降解（短时操作过程中）。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的无酶离心管或玻璃器皿。

产品介绍 本试剂盒可以快速地从细胞、组织、全血、骨髓、体液、细菌、病毒等样本中提取总RNA。本产品仅供科研使用，请勿用于医药、临床治疗、食品级化妆品等用途。 存储条件 室温干燥保存可至少稳定24个月。 需要额外准备的材料 □ 无水乙醇（96%-100%） □ 无RNase酶的1.5ml离心管 □ 无RNase酶的枪头 □ 干净的手套 □ 离心机 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。。 □ Buffer RFL在储存时可能会形成沉淀， 如果有沉淀出现，请37-56℃加热溶解后室温使用。 □ Buffer RPE作为浓缩液提供，在第一次使用前加入4倍体积的乙醇（96-100％）以获得工作溶液。 □ RNase-free水中不含任何抑菌因子，室温放置或操作时可能会引入细菌或真菌污染，使用时尽量注意，推荐开瓶后分装保存以减少污染风险保证实验稳定性。 □ RNA在Buffer RFL中时不会被RNase降解（短时操作过程中）。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的无酶离心管或玻璃器皿。

产品介绍 本产品适用于从拭子和体液中纯化和富集细菌微生物组DNA 的专用解决方案。在纯化过程中有效去除宿主DNA 可最大限度地提高下一代测序分析中的细菌DNA 覆盖率，并允许基于16S rDNA 的高灵敏度微生物组分析和全宏基因组测序研究。 存储条件 Benezonase 和Proteinase K 溶液保存时需置于-20℃，其余可在室温(15~25℃)保存12 个月。 需要额外准备的材料 □ 无水乙醇（96%-100%） □ 无菌1.5ml/2ml离心管 □ 离心机 □ 涡旋仪 □ 水浴锅（将温度调至70℃） □ PBS 或0.9% NaCl (用于液体样本稀释) 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 □ 可提取样品类型为：肺泡灌洗液、拭子和其他体液等富含宿主DNA 样本 □ 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的核酸片段较小且提取量下降。 □ 若Buffer ATL 或Buffer APL2 中有沉淀，可在56℃水浴中加热溶解后使用。 □ Buffer AW1 和Buffer AW2 中提前加入无水乙醇nhibit EX Buffer 如有沉淀现象，可37-70℃水浴至完全溶解。

产品介绍 本产品适用于从拭子和体液中纯化和富集细菌微生物组DNA 的专用解决方案。在纯化过程中有效去除宿主DNA 可最大限度地提高下一代测序分析中的细菌DNA 覆盖率，并允许基于16S rDNA 的高灵敏度微生物组分析和全宏基因组测序研究。 存储条件 Benezonase 和Proteinase K 溶液保存时需置于-20℃，其余可在室温(15~25℃)保存12 个月。 需要额外准备的材料 □ 无水乙醇（96%-100%） □ 无菌1.5ml/2ml离心管 □ 离心机 □ 涡旋仪 □ 水浴锅（将温度调至70℃） □ PBS 或0.9% NaCl (用于液体样本稀释) 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 □ 可提取样品类型为：肺泡灌洗液、拭子和其他体液等富含宿主DNA 样本 □ 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的核酸片段较小且提取量下降。 □ 若Buffer ATL 或Buffer APL2 中有沉淀，可在56℃水浴中加热溶解后使用。 □ Buffer AW1 和Buffer AW2 中提前加入无水乙醇nhibit EX Buffer 如有沉淀现象，可37-70℃水浴至完全溶解。