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FFPE石蜡切片基因组DNA提取试剂盒-100T
ECOTOP货号:EK-1217-100T(货期:1天)售价:¥1100.00
FFPE石蜡切片基因组DNA提取试剂盒-100T
产品介绍 本产品FFPE提取试剂盒专为从甲醛固定、石蜡包埋的组织切片中提取DNA而设计。该试剂盒采用特殊的裂解条件释放组织切片中的DNA,并克服了由于甲醛交联核酸而引起的抑制效应。纯化的DNA可用于各种下游应用,如PCR、单核苷酸多态性(SNP)和短串联重复(STR)基因分型以及药物基因组研究等。 存储条件 Proteinase K Solution可在2~8℃保存,其余试剂可以室温(15~25℃)下保存12个月。 需要额外准备的材料 □ 无水乙醇(96%-100%) □ 无菌1.5ml离心管 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项: □ Buffer ATL, Buffer AL或Buffer AW1若有沉淀析出,可在55℃水浴中重新溶解,摇匀后使用。 □ Proteinase K Solution保存于2-8℃,反复冻融会影响其活性。 □ 小型高速离心机(~13000rpm) □ 水浴锅/加热块温度分别设置至56℃和90℃ 开始前试剂准备 □ 按瓶子标签所示,加入相应体积的无水乙醇稀释Buffer AW1,于室温密封保存。 □ 按瓶子标签所示,加入相应体积的无水乙醇稀释Buffer AW2,于室温密封保存。 注意事项 1. 拿到样品后要尽快在4-10%的福尔马林中固定,固定时间以8-24小时为宜。时间过长导致基因组断裂,影响下游实验。确保包埋前的样品彻底脱水,残留的福尔马林会抑制PCR检测酶的作用。 本产品所提取的DNA的完整性依赖于样本类型、储存时间以及固定条件。如果甲醛固定时间过长或样本存放时间过久(超过1年),则易导致DNA完整性受损,无法扩出长片段。
FFPE石蜡切片基因组DNA提取试剂盒-50T
ECOTOP货号:EK-1217-50T(货期:1天)售价:¥590.00
FFPE石蜡切片基因组DNA提取试剂盒-50T
产品介绍 本产品FFPE提取试剂盒专为从甲醛固定、石蜡包埋的组织切片中提取DNA而设计。该试剂盒采用特殊的裂解条件释放组织切片中的DNA,并克服了由于甲醛交联核酸而引起的抑制效应。纯化的DNA可用于各种下游应用,如PCR、单核苷酸多态性(SNP)和短串联重复(STR)基因分型以及药物基因组研究等。 存储条件 Proteinase K Solution可在2~8℃保存,其余试剂可以室温(15~25℃)下保存12个月。 需要额外准备的材料 □ 无水乙醇(96%-100%) □ 无菌1.5ml离心管 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项: □ Buffer ATL, Buffer AL或Buffer AW1若有沉淀析出,可在55℃水浴中重新溶解,摇匀后使用。 □ Proteinase K Solution保存于2-8℃,反复冻融会影响其活性。 □ 小型高速离心机(~13000rpm) □ 水浴锅/加热块温度分别设置至56℃和90℃ 开始前试剂准备 □ 按瓶子标签所示,加入相应体积的无水乙醇稀释Buffer AW1,于室温密封保存。 □ 按瓶子标签所示,加入相应体积的无水乙醇稀释Buffer AW2,于室温密封保存。 注意事项 1. 拿到样品后要尽快在4-10%的福尔马林中固定,固定时间以8-24小时为宜。时间过长导致基因组断裂,影响下游实验。确保包埋前的样品彻底脱水,残留的福尔马林会抑制PCR检测酶的作用。 本产品所提取的DNA的完整性依赖于样本类型、储存时间以及固定条件。如果甲醛固定时间过长或样本存放时间过久(超过1年),则易导致DNA完整性受损,无法扩出长片段。
通用型 DNA纯化回收试剂盒(胶与PCR纯化),
ECOTOP货号:EK-1104-100T(货期:1天)售价:¥450.00
通用型 DNA纯化回收试剂盒(胶与PCR纯化),
产品组成 FastPure Gel Extraction Kit 产品编号 EK-1104-50T EK-1104-100T 纯化次数 50次 100次 Buffer QG 30ml 60ml Buffer PB 30ml 60ml Buffer PW 12ml 24ml Buffer EB 10ml 20ml Gel Spin Columns 50 100 2ml Collection Tubes 50 100 使用手册 1 1 产品介绍 本试剂盒采用可高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统,可从各种浓度的TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收70bp-10kbp大小的DNA片段,也可以用于各种PCR体系中DNA回收,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质,回收率可达80%以上。每个离心吸附柱每次可吸附的DNA量为20μg。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。 存储条件 该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月。Buffer QG/PB可能产生沉淀,若有沉淀使用前可在55℃水浴中预热10 min以溶解。需要额外准备的材料 □ 无水乙醇(96%-100%)□ 无菌1.5ml离心管开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 □ 电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。□ 如下一步实验要求较高,核酸电泳时则应尽量使用TAE电泳缓冲液。□ 切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。□ 如果回收率较低,可在胶充分溶解后检测pH值,如pH值大于7.5,可向含有DNA的胶溶液中加10-30µl 3M醋酸钠(pH5.2)将pH值调到5-7之间。□ 回收<70bp或>10kbp的DNA片段时,应加大Buffer QG的体积,延长吸附和洗脱时间。□ 回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越少,回收率越低。□ 高温及潮湿等不利环境因素对吸附柱产生影响,请将吸附柱储存于阴凉干燥的环境中。开始前试剂准备 □ 按瓶子标签所示,加入4倍体积的无水乙醇稀释Buffer PW,于室温密封保存。□ 确认Buffer QG溶液显示为黄色。DNA浓度及纯度检测 l 回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。l DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40μg/ml单链DNA。l OD260/OD280比值应为1.7-2.0,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用ddH2O比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。操作步骤: 一、琼脂糖回收DNA 1. 配制所需浓度的琼脂糖凝胶,电泳分离DNA片段。当DNA片段分离后,将凝胶置于紫外灯下,用干净锋利的手术刀快速切下含目的片段大小的DNA凝胶。 为避免DNA片段受到损伤,应尽量减少凝胶的紫外照射时间,切胶时应尽量切去多余凝胶。2. 放入1.5ml离心管中并称取凝胶块的重量,加入3倍体积的Buffer QG(如凝胶称重结果为100mg,则其体积约等于100µl,应加入300µl Buffer QG)。 对于>2%的琼脂糖凝胶,添加6倍体积的Buffer QG。3. 50℃水浴10min(或直至凝胶完全溶解即可),水浴期间可颠倒混匀加速溶胶。 注意:若回收<300bp的DNA片段可在完全溶胶后加入一倍凝胶体积的异丙醇以提高回收率;胶块完全溶解后最好将溶液温度降至室温再上柱,因为吸附柱在室温时结合DNA能力较强。4. 凝胶完全溶解后,检查颜色是否为黄色(类似于没有溶解琼脂糖的Buffer QG)。 如果混合物的颜色为橙色或紫色,则加入10µl 3 M 醋酸钠(pH 5.0)并混合,混合物的颜色会变成黄色。DNA吸附到膜上仅在pH ≤ 7.5时有效。Buffer QG含有一种pH指示剂,在pH ≤7.5时为黄色,在较高pH时为橙色或紫色,可通过颜色轻松确定DNA结合的最佳pH。5. 将吸附柱套在2ml收集管中,并将上一步得到的溶液加入到吸附柱中,≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。 6. 向吸附柱中加入500µl Buffer PW(已加入无水乙醇),≥8000×g(≥10,000 rpm)离心30s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。 注意:如果回收的DNA是用于盐敏感的实验,例如平末端连接实验或直接测序,建议加入Buffer PW后静置2-5min后再离心。7. 重复操作步骤7一次。 8. 倒掉收集管中的废液后将吸附柱再次套入收集管中,最大转速 (~13,400×g)离心2min以干燥吸附柱膜,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。将吸附柱套入新的1.5ml 离心管中并于室温开盖放置5-10min彻底晾干。 注意:Buffer PW中的乙醇残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。9. 向吸附柱膜中央位置悬空滴加30-50µl Buffer EB,盖上盖子室温静置2min后,最大转速 (~13,400×g)离心2min收集DNA溶液并置于-20℃保存。 注意:洗脱体积不应小于30μl,体积过少影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若后续做测序,需使用ddH2O做洗脱液,并保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。为了提高DNA的回收量,可重复操作步骤10一次。二、从PCR反应液或者酶切反应中回收DNA 1. 将5倍体积的Buffer PB添加到1倍体积的PCR样品中,然后混匀。 例如,将500µl Buffer PB添加到100µl PCR样品(不包括油的体积),无需去除石蜡油或矿物油。2. 溶液完全溶解后,检查颜色是否为黄色。 如果混合物的颜色为红色,则加入10µl 3 M 醋酸钠(pH 5.0)并混合,混合物的颜色会变成黄色。DNA吸附到膜上仅在pH ≤ 7.5时有效。Buffer PB含有一种pH指示剂,在pH ≤7.5时为黄色,在较高pH时为红色,可通过颜色轻松确定DNA结合的最佳pH。3. 将吸附柱套在2ml收集管中,并将上一步得到的溶液加入到吸附柱中,≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。 4. 向吸附柱中加入500µl Buffer PW(已加入无水乙醇),≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。 注意:如果回收的DNA是用于盐敏感的实验,例如平末端连接实验或直接测序,建议加入Buffer PW后静置2-5min后再离心。5. 重复操作步骤4一次。 6. 倒掉收集管中的废液后将吸附柱再次套入收集管中,最大转速 (~13,400×g)离心2min以干燥吸附柱膜,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。将吸附柱套入新的1.5ml离心管中并于室温开盖放置5-10min彻底晾干。 7. 向吸附柱膜中央位置悬空滴加30-50µl Buffer EB,盖上盖子室温静置2min后,最大转速 (~13,400×g)离心2min收集DNA溶液并置于-20℃保存。
通用型 DNA纯化回收试剂盒(胶与PCR纯化)
ECOTOP货号:EK-1104-50T(货期:1天)售价:¥290.00
通用型 DNA纯化回收试剂盒(胶与PCR纯化)
产品组成 FastPure Gel Extraction Kit 产品编号 EK-1104-50T EK-1104-100T 纯化次数 50次 100次 Buffer QG 30ml 60ml Buffer PB 30ml 60ml Buffer PW 12ml 24ml Buffer EB 10ml 20ml Gel Spin Columns 50 100 2ml Collection Tubes 50 100 使用手册 1 1 产品介绍 本试剂盒采用可高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统,可从各种浓度的TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收70bp-10kbp大小的DNA片段,也可以用于各种PCR体系中DNA回收,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质,回收率可达80%以上。每个离心吸附柱每次可吸附的DNA量为20μg。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。 存储条件 该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月。Buffer QG/PB可能产生沉淀,若有沉淀使用前可在55℃水浴中预热10 min以溶解。 需要额外准备的材料 □ 无水乙醇(96%-100%) □ 无菌1.5ml离心管 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 □ 电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。 □ 如下一步实验要求较高,核酸电泳时则应尽量使用TAE电泳缓冲液。 □ 切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。 □ 如果回收率较低,可在胶充分溶解后检测pH值,如pH值大于7.5,可向含有DNA的胶溶液中加10-30µl 3M醋酸钠(pH5.2)将pH值调到5-7之间。 □ 回收<70bp或>10kbp的DNA片段时,应加大Buffer QG的体积,延长吸附和洗脱时间。 □ 回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越少,回收率越低。 □ 高温及潮湿等不利环境因素对吸附柱产生影响,请将吸附柱储存于阴凉干燥的环境中。 开始前试剂准备 □ 按瓶子标签所示,加入4倍体积的无水乙醇稀释Buffer PW,于室温密封保存。 □ 确认Buffer QG溶液显示为黄色。DNA浓度及纯度检测 l 回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。 l DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40μg/ml单链DNA。 l OD260/OD280比值应为1.7-2.0,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用ddH2O比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。 操作步骤: 一、琼脂糖回收DNA 1. 配制所需浓度的琼脂糖凝胶,电泳分离DNA片段。当DNA片段分离后,将凝胶置于紫外灯下,用干净锋利的手术刀快速切下含目的片段大小的DNA凝胶。 为避免DNA片段受到损伤,应尽量减少凝胶的紫外照射时间,切胶时应尽量切去多余凝胶。 2. 放入1.5ml离心管中并称取凝胶块的重量,加入3倍体积的Buffer QG(如凝胶称重结果为100mg,则其体积约等于100µl,应加入300µl Buffer QG)。 对于>2%的琼脂糖凝胶,添加6倍体积的Buffer QG。 3. 50℃水浴10min(或直至凝胶完全溶解即可),水浴期间可颠倒混匀加速溶胶。 注意:若回收<300bp的DNA片段可在完全溶胶后加入一倍凝胶体积的异丙醇以提高回收率;胶块完全溶解后最好将溶液温度降至室温再上柱,因为吸附柱在室温时结合DNA能力较强。 4. 凝胶完全溶解后,检查颜色是否为黄色(类似于没有溶解琼脂糖的Buffer QG)。 如果混合物的颜色为橙色或紫色,则加入10µl 3 M 醋酸钠(pH 5.0)并混合,混合物的颜色会变成黄色。DNA吸附到膜上仅在pH ≤ 7.5时有效。Buffer QG含有一种pH指示剂,在pH ≤7.5时为黄色,在较高pH时为橙色或紫色,可通过颜色轻松确定DNA结合的最佳pH。 5. 将吸附柱套在2ml收集管中,并将上一步得到的溶液加入到吸附柱中,≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。 6. 向吸附柱中加入500µl Buffer PW(已加入无水乙醇),≥8000×g(≥10,000 rpm)离心30s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。 注意:如果回收的DNA是用于盐敏感的实验,例如平末端连接实验或直接测序,建议加入Buffer PW后静置2-5min后再离心。 7. 重复操作步骤7一次。 8. 倒掉收集管中的废液后将吸附柱再次套入收集管中,最大转速 (~13,400×g)离心2min以干燥吸附柱膜,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。将吸附柱套入新的1.5ml 离心管中并于室温开盖放置5-10min彻底晾干。 注意:Buffer PW中的乙醇残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。 9. 向吸附柱膜中央位置悬空滴加30-50µl Buffer EB,盖上盖子室温静置2min后,最大转速 (~13,400×g)离心2min收集DNA溶液并置于-20℃保存。 注意:洗脱体积不应小于30μl,体积过少影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若后续做测序,需使用ddH2O做洗脱液,并保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。为了提高DNA的回收量,可重复操作步骤10一次。 二、从PCR反应液或者酶切反应中回收DNA 1. 将5倍体积的Buffer PB添加到1倍体积的PCR样品中,然后混匀。 例如,将500µl Buffer PB添加到100µl PCR样品(不包括油的体积),无需去除石蜡油或矿物油。 2. 溶液完全溶解后,检查颜色是否为黄色。 如果混合物的颜色为红色,则加入10µl 3 M 醋酸钠(pH 5.0)并混合,混合物的颜色会变成黄色。DNA吸附到膜上仅在pH ≤ 7.5时有效。Buffer PB含有一种pH指示剂,在pH ≤7.5时为黄色,在较高pH时为红色,可通过颜色轻松确定DNA结合的最佳pH。 3. 将吸附柱套在2ml收集管中,并将上一步得到的溶液加入到吸附柱中,≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。 4. 向吸附柱中加入500µl Buffer PW(已加入无水乙醇),≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。 注意:如果回收的DNA是用于盐敏感的实验,例如平末端连接实验或直接测序,建议加入Buffer PW后静置2-5min后再离心。 5. 重复操作步骤4一次。 6. 倒掉收集管中的废液后将吸附柱再次套入收集管中,最大转速 (~13,400×g)离心2min以干燥吸附柱膜,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。将吸附柱套入新的1.5ml离心管中并于室温开盖放置5-10min彻底晾干。 7. 向吸附柱膜中央位置悬空滴加30-50µl Buffer EB,盖上盖子室温静置2min后,最大转速 (~13,400×g)离心2min收集DNA溶液并置于-20℃保存。
细胞质与细胞核RNA小量提取试剂盒-100T
ECOTOP货号:EK-1315-100T(货期:1天)售价:¥2400.00
细胞质与细胞核RNA小量提取试剂盒-100T
产品介绍 本试剂盒可以快速地从哺乳动物细胞或组织中提取细胞质或细胞核RNA,不含酚氯仿等有毒试剂。其提取的总RNA纯度高,无蛋白质及其它杂质污染,可用于RT-PCR、Real Time RT-PCR、mRNA差异显示、分子克隆等多种下游实验。本产品仅供科研使用,请勿用于医药、临床治疗、食品级化妆品等用途。 存储条件 Buffer RN收到后置于2-8℃保存;Buffer RT可室温(15℃-25℃)干燥放置至少一年;其他试剂室温干燥保存可至少稳定12个月。 需要额外准备的材料 □ 14.3 M β-巯基乙醇(β-ME) (常规购买商业化商品即为14.3 M)或2M DTT □ 70%乙醇:RNase-Free水配制 □ 无水乙醇(96%-100%) □ 无酶1.5ml离心管 □ 无酶吸头 □ 干净的手套 □ 高速离心机 □ 物理研磨设备 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 □ 操作前在Buffer RN中加入β-巯基乙醇(β-ME)至终浓度为1%(建议现配现用),如1 ml Buffer RN中加入10μl β-巯基乙醇(或加入20 µl的2 M DTT),每次使用前取部分配置。 □ Buffer RT在储存时可能会形成沉淀,如果有沉淀出现,请37℃加热溶解后室温使用。 □ Buffer RW1作为浓缩液提供,在第一次使用前加入0.25倍体积的乙醇(96-100%)以获得工作溶液。 □ Buffer RPE作为浓缩液提供,在第一次使用前加入4倍体积的乙醇(96-100%)以获得工作溶液。 □ RNase-Free水中不含任何抑菌因子,室温放置或操作时可能会引入细菌或真菌污染,使用时尽量注意,推荐开瓶后分装保存以减少污染风险保证实验稳定性。 □ RNA在Buffer RT中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的离心管或玻璃器皿。 □ RNA提取操作及离心过程室温进行即可。
细胞质与细胞核RNA小量提取试剂盒-50T
ECOTOP货号:EK-1315-50T(货期:1天)售价:¥1700.00
细胞质与细胞核RNA小量提取试剂盒-50T
产品介绍 本试剂盒可以快速地从哺乳动物细胞或组织中提取细胞质或细胞核RNA,不含酚氯仿等有毒试剂。其提取的总RNA纯度高,无蛋白质及其它杂质污染,可用于RT-PCR、Real Time RT-PCR、mRNA差异显示、分子克隆等多种下游实验。本产品仅供科研使用,请勿用于医药、临床治疗、食品级化妆品等用途。 存储条件 Buffer RN收到后置于2-8℃保存;Buffer RT可室温(15℃-25℃)干燥放置至少一年;其他试剂室温干燥保存可至少稳定12个月。 需要额外准备的材料 □ 14.3 M β-巯基乙醇(β-ME) (常规购买商业化商品即为14.3 M)或2M DTT □ 70%乙醇:RNase-Free水配制 □ 无水乙醇(96%-100%) □ 无酶1.5ml离心管 □ 无酶吸头 □ 干净的手套 □ 高速离心机 □ 物理研磨设备 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 □ 操作前在Buffer RN中加入β-巯基乙醇(β-ME)至终浓度为1%(建议现配现用),如1 ml Buffer RN中加入10μl β-巯基乙醇(或加入20 µl的2 M DTT),每次使用前取部分配置。 □ Buffer RT在储存时可能会形成沉淀,如果有沉淀出现,请37℃加热溶解后室温使用。 □ Buffer RW1作为浓缩液提供,在第一次使用前加入0.25倍体积的乙醇(96-100%)以获得工作溶液。 □ Buffer RPE作为浓缩液提供,在第一次使用前加入4倍体积的乙醇(96-100%)以获得工作溶液。 □ RNase-Free水中不含任何抑菌因子,室温放置或操作时可能会引入细菌或真菌污染,使用时尽量注意,推荐开瓶后分装保存以减少污染风险保证实验稳定性。 □ RNA在Buffer RT中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的离心管或玻璃器皿。 □ RNA提取操作及离心过程室温进行即可。

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