ECOTOP货号:EK-5312-100ml售价:¥450.00
DNAex ZOL快速基因组DNA提取试剂-100ml
【保存条件】室温保存,有效期1年【概述】DNAex ZOL试剂(基因组DNA分离试剂)是一种完整且现成的试剂,用于从动物、植物、酵母和细菌来源的固体和液体样本中分离基因组DNA。DNAex ZOL试剂程序基于使用一种新型的胍-洗涤剂裂解溶液,该溶液允许从细胞裂解液中选择性沉淀DNA。DNAex ZOL试剂协议速度快,允许从大量小批量或大批量样品中分离基因组DNA。 【操作方法】I. 样本处理a. 培养皿中细胞样本处理:每个10平方厘米的培养皿中加入0.75-1.0毫升的DNAex ZOL试剂。通过吹打培养皿使细胞裂解,并轻轻将裂解液吸入离心管中。b. 细胞沉淀或悬浮液:向1-3×107个细胞(沉淀或悬浮液中,体积小于0.1毫升)中加入1毫升的DNAex ZOL试剂。通过轻轻吸取液体使细胞裂解。b. 全血样本:对于不超过100微升的全血,向血液中加入1毫升的DNAex ZOL并轻轻上下移动以裂解细胞。对于超过100微升的全血,离心沉淀细胞并用0.9%氯化钠洗涤。再次沉淀细胞,并在冷(4°C)低渗透溶液中(20mM Tris HCl(pH 8.0),10mM EDTA)中将细胞悬浮。以4,000转/分钟的速度在4°C离心10分钟。丢弃上清液加入1毫升DNAex ZOL(每1-3×107个细胞加入1ml DNAex ZOL)。通过轻轻吸取液体使细胞裂解。4. 植物/动物等组织样本处理:每25-50mg组织样品中加入1ml DNAex ZOL进行均质化和裂解。匀浆结束后室温下10,000×g下离心10分钟。离心后,将所得上清液转移到新鲜的管离心管中。此步骤从裂解物/匀浆中去除不溶性组织片段、RNA和多余的多糖。它仅用于从肝脏、肌肉和大多数含有大量细胞和/或细胞外物质的组织中分离 DNA。II. DNA沉淀1. 通过在用于分离的每1 ml DNAex ZOL 试剂中加入0.5 ml 100% 乙醇,从裂解物/匀浆中沉淀 DNA。通过倒置混合样品并在室温下储存1-3分钟。DNA应迅速以浑浊沉淀物的形式可见。在室温或4°C下以10,000×g离心3-5分钟将沉淀DNA收集。2. 在室温下以10,000×g离心3-5分钟将沉淀DNA收集。通常,在管的底部以白色沉淀的形式获得DNA。有些样品DNA在试管底部形成凝胶状膜。用乙醇洗涤后,膜变得更可见。III. DNA清洗1. 用0.8-1.0ml 75%乙醇洗涤DNA沉淀两次。在每次洗涤时,通过倒置试管3-6次将DNA悬浮在乙醇中。2. 室温下以10,000×g离心3-5分钟以使DNA沉降到试管底部,并通过移液除去乙醇。IV. DNA溶解1. 静置5-10分钟待乙醇挥发,无需过份干燥成固体,干燥成固体的DNA沉淀不易溶解2. 加入约50-100μl 配套DNA溶解液可确保DNA沉淀物的完全溶解。DNAex ZOL分离的DNA在Tris缓冲液中的再溶解度较低。因此,强烈建议使用配套溶解液,DNA在其中4°C下可稳定数月,在 -20°C 下可稳定一年以上。从肝脏、肌肉和植物等组织中分离出的 DNA 制剂可能含有一些不溶性物质(主要是多糖),通过在12,000×g离心10分钟除去不溶性物质即可。【注意事项】1. 仅用于实验室,不适合农业/家庭/临床用途使用。2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。