【保存条件】 -20℃保存,有效期2年 【概述】 0.25%胰酶细胞消化液(含EDTA)含0.25%胰酶、EDTA和酚红，pH值为7.2-7.8。该消化液经过过滤除菌，可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的消化。 【使用建议（仅供参考）】 1. 贴壁细胞的消化：a.吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。b.加入少量0.25%胰酶细胞消化液(含EDTA)，略盖过细胞即可，室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。c.显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。d.如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。2. 组织的消化：a.不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。 【注意事项】 1. 胰酶消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。 2. 注意无菌操作，尽量避免污染。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】-20℃保存稳定6-12个月，长期保存请置于-80℃。【概述】HeLa细胞是世界上第一株体外连续培养的人类非整倍体永生化细胞株，也是合适的转染宿主，目前已被广泛用于肿瘤等疾病研究和生物制品制造。该细胞是GeyGO等人于1951年从一名罹患宫颈癌的31岁黑人妇女中分离出来的上皮细胞。据报道，该细胞免疫过氧化物酶染色显示细胞角蛋白阳性，p53的表达水平较低，且pRB（视网膜母细胞瘤抑制因子）水平正常。 该产品为Hela细胞收集沉淀，每4管由100mm 皿消化解离收集（每皿融合度约90-100%，约107细胞）。【基因组提取效果图】 图1. 293T细胞基因组琼脂糖凝胶电泳图（泳道从左往右分别为DNA Marker DL2000，Hela细胞基因组DNA)【注意事项】1. 使用时应尽量避免其他核酸或相关污染，细胞越新鲜收集其核酸越稳定。2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20℃保存稳定6-12个月，长期保存请置于-80℃。 【概述】 人胚肾细胞株 293 插入 SV40 T-抗原基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T。该细胞最初的名字是 293tsA1609neo，携带 SV40复制序列，被广泛用于逆转录病毒生产、基因表达和蛋白表达。 该产品为293T细胞收集沉淀，每4管由100mm 皿消化解离收集（每皿融合度约90-100%，约107细胞）。 【基因组提取效果图】 图1. 293T细胞基因组琼脂糖凝胶电泳图（泳道从左往右分别为293T细胞基因组DNA，DNA Marker DL2000) 【注意事项】 1. 使用时应尽量避免其他核酸或相关污染，细胞越新鲜收集其核酸越稳定。2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 4℃保存，有效期1年。 【概述】 本溶液由0.2M NaHCO3、0.05N NaOH、200mM HEPES组成，经过滤除菌，可用于细胞等相关实验。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 该试剂仅用于科研领域，不得用于临床诊断或其他用途。

【保存条件】 室温（15–25°C）保存12个月, 2–8°C或–20°C保存24个月 【概述】 TripleSelect与胰蛋白酶一样，可裂解赖氨酸和精氨酸C-末端上的肽键。但是，TripleSelect无与伦比的纯度提高了特异性，其原因在于只有一种酶发挥作用。这减少了胰蛋白酶和其他提取物中存在的多种酶的裂解作用造成的损害。 【产品特点】 l 对细胞作用温和：纯度提高了特异性，其原因在于只有一种酶发挥作用。这减少了胰蛋白酶和其他提取物中由于多种酶切割造成的损害。l 在室温下保持稳定：在室温或4°C下可保持稳定12-24个月，因此易于储存和处理、方便快捷。 l 无动物来源蛋白：与常用猪胰蛋白酶不同，本试剂不含动物来源成分。 l 无需终止，易于使用：无需使用胰蛋白酶抑制剂（如 FBS）终止消化，PBS或DMEM等稀释后自动失活。 【使用建议】 1. 使用前将TripleSelect 和完整的生长培养基恢复至室温。2. 将待消化细胞培养器皿中培养去除。 3. 使用DPBS（无钙镁）清洗细胞，清洗完去除DPBS液体。 4. 加入相应体积的TripleSelect消化液（如25cm2瓶中加入1-2ml TripleSelect消化液，75cm2瓶中加入5ml TripleSelect消化液） 5. 37°C孵育至细胞变圆脱落（镜下观察），可轻拍培养瓶/皿。 6. 加入5ml 完全培养基至培养瓶/皿（体积根据不同面积培养瓶/皿），可轻轻吹打使细胞更好分离。 7. 将含细胞的液体移入15ml无菌离心管中。以200-500g转速离心5-10分钟使细胞沉淀。 8. 去除上清后，加入含血清的完全培养液使细胞沉淀重新悬浮，即可用于后续实验【注意事项】 1. 注意无菌操作，尽量避免污染。 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】-20℃避光保存，有效期1年；4℃避光保存，有效期1个月【概述】细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一种采用经典的碘化丙啶染色 (Propidium staining，即PI staining)方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的检测试剂盒。碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一种常用的细胞核荧光染料，作为一种溴化乙锭（EB）的类似物，能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链 DNA的含量成正比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，然后根据DNA含量的分布 情况，可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。 碘化丙啶染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片段在染色过程中丢失，因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染，即荧光强度小于1，在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰，即凋亡细胞峰。 Ø细胞发生凋亡时，由于胞浆和染色质浓缩、核碎裂，产生凋亡小体，使细胞的光散射性质发生变化。在细胞凋亡的早期，细胞对前向角光散射的能力显著降低，对侧向光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期，前向和侧向光散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察细胞凋亡情况。 Ø本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测。如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测，则必须把组织消化成单细胞状态，才可以进行检测，每个样品的细胞数量可以为10-100万。【使用方法（仅供参考）】1. 细胞样品的准备：a. 对于贴壁细胞：小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞，至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时， 加入前面收集的细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50微升左右的PBS，以避免吸走细胞。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。 b. 对于悬浮细胞：1000g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50微升左右的PBS，以避免吸走细胞。轻轻弹击 离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。2. 细胞固定：加入1毫升冰浴预冷70%乙醇中，轻轻吹打混匀，4ºC固定30分钟或更长时间。通常固定2小时或以上更能保证染色效果，固定12-24小时可能效果更佳。1000g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的70%乙醇，以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的 PBS，重悬细胞。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50微升左右的PBS，以避免吸走细胞。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。3. 碘化丙啶染色混合液的配制：参考下表，根据待检测样品的数量配制适量的碘化丙啶染色液： 1个样品6个样品12个样品染色缓冲液0.5ml3ml6mlPI染色液（20×）25μl150μl300μlRNase溶液（50×）10μl60μl120μl总体积0.535ml3.21ml6.42ml4. 染色：每管细胞样品中加入0.5毫升碘化丙啶染色混合液，缓慢并充分重悬细胞沉淀，37ºC避光温浴30分钟。随后可以4ºC或冰浴避光存放。染色完成后宜在24小时内完成流式检测，最好能在当日完成流式检测。5. 流式检测和分析：用流式细胞仪在激发波长488nm波长处检测红色荧光，同时检测光散射情况。采用适当分析软件进行细胞 DNA含量分析和光散射分析。【注意事项】1. 荧光染料均存在淬灭问题，保存和使用过程中请尽量注意避光以减缓荧光淬灭。2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。3. 仅用于实验室研究，不适合农业/家庭/临床用途使用。

【保存条件】-20℃避光保存，有效期1年；4℃避光保存，有效期1个月【概述】细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一种采用经典的碘化丙啶染色 (Propidium staining，即PI staining)方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的检测试剂盒。碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一种常用的细胞核荧光染料，作为一种溴化乙锭（EB）的类似物，能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链 DNA的含量成正比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，然后根据DNA含量的分布 情况，可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。 碘化丙啶染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片段在染色过程中丢失，因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染，即荧光强度小于1，在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰，即凋亡细胞峰。 Ø细胞发生凋亡时，由于胞浆和染色质浓缩、核碎裂，产生凋亡小体，使细胞的光散射性质发生变化。在细胞凋亡的早期，细胞对前向角光散射的能力显著降低，对侧向光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期，前向和侧向光散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察细胞凋亡情况。 Ø本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测。如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测，则必须把组织消化成单细胞状态，才可以进行检测，每个样品的细胞数量可以为10-100万。【使用方法（仅供参考）】1. 细胞样品的准备：a. 对于贴壁细胞：小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞，至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时， 加入前面收集的细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50微升左右的PBS，以避免吸走细胞。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。 b. 对于悬浮细胞：1000g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50微升左右的PBS，以避免吸走细胞。轻轻弹击 离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。2. 细胞固定：加入1毫升冰浴预冷70%乙醇中，轻轻吹打混匀，4ºC固定30分钟或更长时间。通常固定2小时或以上更能保证染色效果，固定12-24小时可能效果更佳。1000g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的70%乙醇，以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的 PBS，重悬细胞。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50微升左右的PBS，以避免吸走细胞。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。3. 碘化丙啶染色混合液的配制：参考下表，根据待检测样品的数量配制适量的碘化丙啶染色液： 1个样品6个样品12个样品染色缓冲液0.5ml3ml6mlPI染色液（20×）25μl150μl300μlRNase溶液（50×）10μl60μl120μl总体积0.535ml3.21ml6.42ml4. 染色：每管细胞样品中加入0.5毫升碘化丙啶染色混合液，缓慢并充分重悬细胞沉淀，37ºC避光温浴30分钟。随后可以4ºC或冰浴避光存放。染色完成后宜在24小时内完成流式检测，最好能在当日完成流式检测。5. 流式检测和分析：用流式细胞仪在激发波长488nm波长处检测红色荧光，同时检测光散射情况。采用适当分析软件进行细胞 DNA含量分析和光散射分析。【注意事项】1. 荧光染料均存在淬灭问题，保存和使用过程中请尽量注意避光以减缓荧光淬灭。2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。3. 仅用于实验室研究，不适合农业/家庭/临床用途使用。

【保存条件】 室温运输，2-8°C保存18个月，-20°C保存36个月 【概述】 Cell Store系列细胞冻存液可稳定长期储存细胞。凭借其独特的配方，可在冻融程序后实现稳定的冷冻保存和高存活率，是存储任何细胞类型（包括敏感细胞系）的值得信赖的解决方案。 本品可以用于常规细胞/肿瘤细胞/干细胞等细胞冻存，-80℃可长期保存（>5年），细胞存活率在90-98%，无需程序降温。 【产品特点】 即用型细胞冻存液 直接冻存于-80℃冰箱，长期保存（>5年），无需程序性降温 无血清及其它蛋白质成份 细胞存活率高于传统DMSO血清方法 【使用建议（仅供参考）】 细胞冻存步骤 1. 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。 2. 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。 3. 通过离心（3-5分钟，1,000~2,000rpm）收集培养细胞沉淀，彻底去除离心管中上清液。 4. 加入适量CellStore无血清细胞冻存液于离心管中（每1 ml冻存液可用于5×105-1×107细胞），轻柔混匀细胞制成细胞混合液。 5. 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中，建议每管1ml或1.5ml，标识细胞系名称、细胞浓度、传代日期和其他重要信息。 6. 直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中，可长期冷冻保存。 7. 若需转移至液氮中长期保存，需先放入-80℃冻存至少24小时后方可移至液氮罐中保存。 重要提示：最佳方案可能会随细胞类型而变化。 冻存细胞复苏步骤 1. 从冰箱或液氮中取出冻存的细胞，立即置于37℃水浴中快速解冻。 2. 待冻存管中细胞混合液完全融化后，立即加入1ml 细胞培养基于冷冻管中与细胞混合， 再将其中的混合液移至含有约5ml该细胞培养基的离心管中，1,000~2,000rpm离心3-5分钟收集细胞沉淀，移弃上清液（操作时小心，切勿将细胞沉淀移去） 3. 使用适当体积的完全细胞培养基轻轻悬浮细胞，后转入至细胞培养平板或培养瓶。 4. 使用显微镜观察后，可根据各自研究所需的方案继续进一步的培养。 【注意事项】 1. 本品仅用于科研用途，不得用于临床或诊断相关研究 2. 本品含有10% DMSO，部分对 DMSO 敏感的细胞，建议对其进行至少 1 周 的本产品试验性的细胞冻存培养，确认性能后再正式冻存。 3. 请注意冻存过程中的无菌操作。

【保存条件】 2-8℃避光保存，有效期1年。 【概述】 碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一种常用的细胞核荧光染料，作为一种溴化乙锭（EB）的类似物，能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。PI经488 nm荧光激发，产生相对较大的斯托克司频移后，并在617 nm处具有最大发射波长。另外，PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外，但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用以上特性，PI可作为细胞活力分析的荧光探针之一。不仅可单独使用；也可以同Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用，同时对活细胞和死细胞染色和鉴定。也能够与488 nm激发的荧光素如FITC和PE等联合使用。 本品为Sigma原料配制即用型PI染色液，可进入死细胞内与DNA结合，并被活细胞排斥在外，适合用于流式细胞仪进行细胞活力分析。PI单染用FL2通道检测，若与FITC或PE标记抗体/蛋白联合使用FL3通道检测 【使用方法（仅供参考）】 1. 收集细胞，计数，最高以1×106 cells/100 μL的量加入FACS分选管 2. 加2ml PBS（或HBSS）清洗细胞，300 × g离心5 min，去上清。重复一次。 注：若需要用抗体标记表面抗原，可在此步之后进行。PI不适合与检测胞内分子的抗体联合使用。 3. 细胞清洗后，用100 μL流式细胞染色缓冲液（ED-8765，Cell Staining Buffer (Flow Cytometry)）重悬细胞；加入10 μL PI染色液，轻柔混匀，冰上或者室温避光孵育10-15 min。 4. 直接上机进行流式分析。注：PI染色后不可再清洗细胞。PI染色孵育后尽快上机检测。 【注意事项】 1. 碘化丙啶（PI）是已知的诱变剂，操作过程中一定要做好防护工作避免与PI的直接接触。另外PI溶液在丢弃之前需要先经过活性炭处理。 2. 流式细胞染色缓冲液可选择货号：ED-8765 Cell Staining Buffer (Flow Cytometry)。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 4. 仅用于实验室研究，不适合农业/家庭/临床用途使用。

【保存条件】 2-8℃避光保存，有效期1年。 【概述】 碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一种常用的细胞核荧光染料，作为一种溴化乙锭（EB）的类似物，能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。PI经488 nm荧光激发，产生相对较大的斯托克司频移后，并在617 nm处具有最大发射波长。另外，PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外，但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用以上特性，PI可作为细胞活力分析的荧光探针之一。不仅可单独使用；也可以同Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用，同时对活细胞和死细胞染色和鉴定。也能够与488 nm激发的荧光素如FITC和PE等联合使用。 本品为Sigma原料配制即用型PI染色液，可进入死细胞内与DNA结合，并被活细胞排斥在外，适合用于流式细胞仪进行细胞活力分析。PI单染用FL2通道检测，若与FITC或PE标记抗体/蛋白联合使用FL3通道检测 【使用方法（仅供参考）】 1. 收集细胞，计数，最高以1×106 cells/100 μL的量加入FACS分选管 2. 加2ml PBS（或HBSS）清洗细胞，300 × g离心5 min，去上清。重复一次。 注：若需要用抗体标记表面抗原，可在此步之后进行。PI不适合与检测胞内分子的抗体联合使用。 3. 细胞清洗后，用100 μL流式细胞染色缓冲液（ED-8765，Cell Staining Buffer (Flow Cytometry)）重悬细胞；加入10 μL PI染色液，轻柔混匀，冰上或者室温避光孵育10-15 min。 4. 直接上机进行流式分析。注：PI染色后不可再清洗细胞。PI染色孵育后尽快上机检测。 【注意事项】 1. 碘化丙啶（PI）是已知的诱变剂，操作过程中一定要做好防护工作避免与PI的直接接触。另外PI溶液在丢弃之前需要先经过活性炭处理。 2. 流式细胞染色缓冲液可选择货号：ED-8765 Cell Staining Buffer (Flow Cytometry)。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 4. 仅用于实验室研究，不适合农业/家庭/临床用途使用。