【保存条件】 -20℃避光保存，有效期1年。 【概述】 Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。Hoechst 33342染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。 Hoechst 33342的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；Hoechst 33342和双链DNA结合后，最大激发波长为 350nm，最大发射波长为461nm。 本Hoechst 33342染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。 【使用方法】 该产品使用时应室温解冻并充分摇匀。 1. 对于固定的细胞或组织： a. 对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33342染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33342染色。 b. 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst 33342染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。 c. 吸除Hoechst 33342染色液，用PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。 d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。 2. 对于活细胞或培养的组织： a. 加入适当量Hoechst 33342染色液，必须充分覆盖住待染色的样品，通常对于6孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100微升染色液。 b. 在适宜于细胞培养的温度培养20-30分钟。弃染色液，用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。细胞发生凋亡时，在荧光显微镜下观察会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。 【注意事项】 1. 本品为进口原料配制，成像与稳定效果更佳。 2. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。 3. 为减缓荧光淬灭可以使用ES-8312抗荧光淬灭封片剂。 4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 【参考文献】 1. Targeting a therapeutic LIF transgene to muscle via the immune system ameliorates muscular dystrophy. Steven S Welc et al. Nature communications, 10(1), 2788-2788 (2019) 2. The transforming activity of Wnt effectors correlates with their ability to induce the accumulation of mammary progenitor cells. Liu BY, et al. Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA, 101, 4158-4163 (2004)

【保存条件】-20℃避光保存，有效期1年。【概述】Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。Hoechst 33258染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。Hoechst 33258的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；Hoechst 33258和双链DNA结合后，最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。本品Hoechst 33258染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。【使用方法】该产品使用时应室温解冻并充分摇匀。1. 对于固定的细胞或组织：a. 对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258染色。b. 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。c. 吸除Hoechst 33258染色液，用PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。2. 对于活细胞或培养的组织：a. 加入适当量Hoechst 33258染色液，必须充分覆盖住待染色的样品，通常对于6孔板一个孔需加入1ml 染色液，对于96孔板一个孔需加入100微升染色液。b. 在适宜于细胞培养的温度培养20-30分钟。弃染色液，用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。细胞发生凋亡时，在荧光显微镜下观察会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。【注意事项】1. 本品为进口原料配制，成像与稳定效果更佳。2. Hoechst 33258对人体有害，请注意适当防护。3. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。4. 为减缓荧光淬灭可以使用ES-8312抗荧光淬灭封片剂。5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】-20℃避光保存，有效期1年。【概述】Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。Hoechst 33258染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。Hoechst 33258的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；Hoechst 33258和双链DNA结合后，最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。本品Hoechst 33258染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。【使用方法】该产品使用时应室温解冻并充分摇匀。1. 对于固定的细胞或组织：a. 对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258染色。b. 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。c. 吸除Hoechst 33258染色液，用PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。2. 对于活细胞或培养的组织：a. 加入适当量Hoechst 33258染色液，必须充分覆盖住待染色的样品，通常对于6孔板一个孔需加入1ml 染色液，对于96孔板一个孔需加入100微升染色液。b. 在适宜于细胞培养的温度培养20-30分钟。弃染色液，用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。细胞发生凋亡时，在荧光显微镜下观察会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。【注意事项】1. 本品为进口原料配制，成像与稳定效果更佳。2. Hoechst 33258对人体有害，请注意适当防护。3. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。4. 为减缓荧光淬灭可以使用ES-8312抗荧光淬灭封片剂。5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20℃保存,有效期2年 【概述】 0.25%胰酶细胞消化液(含EDTA)含0.25%胰酶、EDTA和酚红，pH值为7.2-7.8。该消化液经过过滤除菌，可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的消化。 【使用建议（仅供参考）】 1. 贴壁细胞的消化：a.吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。b.加入少量0.25%胰酶细胞消化液(含EDTA)，略盖过细胞即可，室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。c.显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。d.如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。2. 组织的消化：a.不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。 【注意事项】 1. 胰酶消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。 2. 注意无菌操作，尽量避免污染。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】-20℃保存稳定6-12个月，长期保存请置于-80℃。【概述】HeLa细胞是世界上第一株体外连续培养的人类非整倍体永生化细胞株，也是合适的转染宿主，目前已被广泛用于肿瘤等疾病研究和生物制品制造。该细胞是GeyGO等人于1951年从一名罹患宫颈癌的31岁黑人妇女中分离出来的上皮细胞。据报道，该细胞免疫过氧化物酶染色显示细胞角蛋白阳性，p53的表达水平较低，且pRB（视网膜母细胞瘤抑制因子）水平正常。 该产品为Hela细胞收集沉淀，每4管由100mm 皿消化解离收集（每皿融合度约90-100%，约107细胞）。【基因组提取效果图】 图1. 293T细胞基因组琼脂糖凝胶电泳图（泳道从左往右分别为DNA Marker DL2000，Hela细胞基因组DNA)【注意事项】1. 使用时应尽量避免其他核酸或相关污染，细胞越新鲜收集其核酸越稳定。2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20℃保存稳定6-12个月，长期保存请置于-80℃。 【概述】 人胚肾细胞株 293 插入 SV40 T-抗原基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T。该细胞最初的名字是 293tsA1609neo，携带 SV40复制序列，被广泛用于逆转录病毒生产、基因表达和蛋白表达。 该产品为293T细胞收集沉淀，每4管由100mm 皿消化解离收集（每皿融合度约90-100%，约107细胞）。 【基因组提取效果图】 图1. 293T细胞基因组琼脂糖凝胶电泳图（泳道从左往右分别为293T细胞基因组DNA，DNA Marker DL2000) 【注意事项】 1. 使用时应尽量避免其他核酸或相关污染，细胞越新鲜收集其核酸越稳定。2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 4℃保存，有效期1年。 【概述】 本溶液由0.2M NaHCO3、0.05N NaOH、200mM HEPES组成，经过滤除菌，可用于细胞等相关实验。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 该试剂仅用于科研领域，不得用于临床诊断或其他用途。

【保存条件】 室温（15–25°C）保存12个月, 2–8°C或–20°C保存24个月 【概述】 TripleSelect与胰蛋白酶一样，可裂解赖氨酸和精氨酸C-末端上的肽键。但是，TripleSelect无与伦比的纯度提高了特异性，其原因在于只有一种酶发挥作用。这减少了胰蛋白酶和其他提取物中存在的多种酶的裂解作用造成的损害。 【产品特点】 l 对细胞作用温和：纯度提高了特异性，其原因在于只有一种酶发挥作用。这减少了胰蛋白酶和其他提取物中由于多种酶切割造成的损害。l 在室温下保持稳定：在室温或4°C下可保持稳定12-24个月，因此易于储存和处理、方便快捷。 l 无动物来源蛋白：与常用猪胰蛋白酶不同，本试剂不含动物来源成分。 l 无需终止，易于使用：无需使用胰蛋白酶抑制剂（如 FBS）终止消化，PBS或DMEM等稀释后自动失活。 【使用建议】 1. 使用前将TripleSelect 和完整的生长培养基恢复至室温。2. 将待消化细胞培养器皿中培养去除。 3. 使用DPBS（无钙镁）清洗细胞，清洗完去除DPBS液体。 4. 加入相应体积的TripleSelect消化液（如25cm2瓶中加入1-2ml TripleSelect消化液，75cm2瓶中加入5ml TripleSelect消化液） 5. 37°C孵育至细胞变圆脱落（镜下观察），可轻拍培养瓶/皿。 6. 加入5ml 完全培养基至培养瓶/皿（体积根据不同面积培养瓶/皿），可轻轻吹打使细胞更好分离。 7. 将含细胞的液体移入15ml无菌离心管中。以200-500g转速离心5-10分钟使细胞沉淀。 8. 去除上清后，加入含血清的完全培养液使细胞沉淀重新悬浮，即可用于后续实验【注意事项】 1. 注意无菌操作，尽量避免污染。 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】-20℃避光保存，有效期1年；4℃避光保存，有效期1个月【概述】细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一种采用经典的碘化丙啶染色 (Propidium staining，即PI staining)方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的检测试剂盒。碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一种常用的细胞核荧光染料，作为一种溴化乙锭（EB）的类似物，能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链 DNA的含量成正比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，然后根据DNA含量的分布 情况，可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。 碘化丙啶染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片段在染色过程中丢失，因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染，即荧光强度小于1，在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰，即凋亡细胞峰。 Ø细胞发生凋亡时，由于胞浆和染色质浓缩、核碎裂，产生凋亡小体，使细胞的光散射性质发生变化。在细胞凋亡的早期，细胞对前向角光散射的能力显著降低，对侧向光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期，前向和侧向光散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察细胞凋亡情况。 Ø本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测。如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测，则必须把组织消化成单细胞状态，才可以进行检测，每个样品的细胞数量可以为10-100万。【使用方法（仅供参考）】1. 细胞样品的准备：a. 对于贴壁细胞：小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞，至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时， 加入前面收集的细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50微升左右的PBS，以避免吸走细胞。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。 b. 对于悬浮细胞：1000g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50微升左右的PBS，以避免吸走细胞。轻轻弹击 离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。2. 细胞固定：加入1毫升冰浴预冷70%乙醇中，轻轻吹打混匀，4ºC固定30分钟或更长时间。通常固定2小时或以上更能保证染色效果，固定12-24小时可能效果更佳。1000g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的70%乙醇，以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的 PBS，重悬细胞。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50微升左右的PBS，以避免吸走细胞。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。3. 碘化丙啶染色混合液的配制：参考下表，根据待检测样品的数量配制适量的碘化丙啶染色液： 1个样品6个样品12个样品染色缓冲液0.5ml3ml6mlPI染色液（20×）25μl150μl300μlRNase溶液（50×）10μl60μl120μl总体积0.535ml3.21ml6.42ml4. 染色：每管细胞样品中加入0.5毫升碘化丙啶染色混合液，缓慢并充分重悬细胞沉淀，37ºC避光温浴30分钟。随后可以4ºC或冰浴避光存放。染色完成后宜在24小时内完成流式检测，最好能在当日完成流式检测。5. 流式检测和分析：用流式细胞仪在激发波长488nm波长处检测红色荧光，同时检测光散射情况。采用适当分析软件进行细胞 DNA含量分析和光散射分析。【注意事项】1. 荧光染料均存在淬灭问题，保存和使用过程中请尽量注意避光以减缓荧光淬灭。2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。3. 仅用于实验室研究，不适合农业/家庭/临床用途使用。

【保存条件】-20℃避光保存，有效期1年；4℃避光保存，有效期1个月【概述】细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一种采用经典的碘化丙啶染色 (Propidium staining，即PI staining)方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的检测试剂盒。碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一种常用的细胞核荧光染料，作为一种溴化乙锭（EB）的类似物，能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链 DNA的含量成正比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，然后根据DNA含量的分布 情况，可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。 碘化丙啶染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片段在染色过程中丢失，因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染，即荧光强度小于1，在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰，即凋亡细胞峰。 Ø细胞发生凋亡时，由于胞浆和染色质浓缩、核碎裂，产生凋亡小体，使细胞的光散射性质发生变化。在细胞凋亡的早期，细胞对前向角光散射的能力显著降低，对侧向光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期，前向和侧向光散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察细胞凋亡情况。 Ø本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测。如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测，则必须把组织消化成单细胞状态，才可以进行检测，每个样品的细胞数量可以为10-100万。【使用方法（仅供参考）】1. 细胞样品的准备：a. 对于贴壁细胞：小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞，至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时， 加入前面收集的细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50微升左右的PBS，以避免吸走细胞。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。 b. 对于悬浮细胞：1000g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50微升左右的PBS，以避免吸走细胞。轻轻弹击 离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。2. 细胞固定：加入1毫升冰浴预冷70%乙醇中，轻轻吹打混匀，4ºC固定30分钟或更长时间。通常固定2小时或以上更能保证染色效果，固定12-24小时可能效果更佳。1000g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的70%乙醇，以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的 PBS，重悬细胞。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50微升左右的PBS，以避免吸走细胞。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。3. 碘化丙啶染色混合液的配制：参考下表，根据待检测样品的数量配制适量的碘化丙啶染色液： 1个样品6个样品12个样品染色缓冲液0.5ml3ml6mlPI染色液（20×）25μl150μl300μlRNase溶液（50×）10μl60μl120μl总体积0.535ml3.21ml6.42ml4. 染色：每管细胞样品中加入0.5毫升碘化丙啶染色混合液，缓慢并充分重悬细胞沉淀，37ºC避光温浴30分钟。随后可以4ºC或冰浴避光存放。染色完成后宜在24小时内完成流式检测，最好能在当日完成流式检测。5. 流式检测和分析：用流式细胞仪在激发波长488nm波长处检测红色荧光，同时检测光散射情况。采用适当分析软件进行细胞 DNA含量分析和光散射分析。【注意事项】1. 荧光染料均存在淬灭问题，保存和使用过程中请尽量注意避光以减缓荧光淬灭。2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。3. 仅用于实验室研究，不适合农业/家庭/临床用途使用。