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TripleSelect 无动物源常温胰酶
ECOTOP货号:ES-8750-100ml(货期:1天)售价:¥260.00
TripleSelect 无动物源常温胰酶
【保存条件】 室温避光保存12个月, 2–8°C或-20°C保存24个月 【概述】 TripleSelect与胰蛋白酶一样,可裂解赖氨酸和精氨酸C-末端上的肽键。但是,TripleSelect无与伦比的纯度提高了特异性,其原因在于只有一种酶发挥作用。这减少了胰蛋白酶和其他提取物中存在的多种酶的裂解作用造成的损害。 【产品特点】 对细胞作用温和:纯度提高了特异性,其原因在于只有一种酶发挥作用。这减少了胰蛋白酶和其他提取物中由于多种酶切割造成的损害。 在室温下保持稳定:在室温或4°C下可保持稳定12-24个月,因此易于储存和处理、方便快捷。 无动物来源蛋白:与常用猪胰蛋白酶不同,本试剂不含动物来源成分。 无需终止,易于使用:无需使用胰蛋白酶抑制剂(如 FBS)终止消化,PBS或DMEM等稀释后自动失活。 【使用建议】 1. 使用前将TripleSelect 和完整的生长培养基恢复至室温。 2. 将待消化细胞培养器皿中培养去除。 3. 使用DPBS(无钙镁)清洗细胞,清洗完去除DPBS液体。 4. 加入相应体积的TripleSelect消化液(如25cm2瓶中加入1-2ml TripleSelect消化液,75cm2瓶中加入5ml TripleSelect消化液) 5. 37°C孵育至细胞变圆脱落(镜下观察),可轻拍培养瓶/皿。 6. 加入5ml 完全培养基至培养瓶/皿(体积根据不同面积培养瓶/皿),可轻轻吹打使细胞更好分离。 7. 将含细胞的液体移入15ml无菌离心管中。以200-500g转速离心5-10分钟使细胞沉淀。 8. 去除上清后,加入含血清的完全培养液使细胞沉淀重新悬浮,即可用于后续实验。 【注意事项】 1. 注意无菌操作,尽量避免污染。 2. 夏天若室内温度较高建议4°C保存,运输增加适量冰袋。 3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
0.5%胰酶溶液(含EDTA,含酚红)
ECOTOP货号:ES-8626-100ml(货期:1天)售价:¥230.00
0.5%胰酶溶液(含EDTA,含酚红)
【保存条件】 -20℃保存,有效期2年 【概述】 0.5%胰酶细胞消化液(含EDTA)含0.5%胰酶、EDTA和酚红,pH值为7.2-7.8。该消化液经过过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。 【使用建议(仅供参考)】 1. 贴壁细胞的消化:a.吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。b.加入少量0.5%胰酶细胞消化液(含EDTA),略盖过细胞即可,室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。c.显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。d.如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。2. 组织的消化:a.不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。 【注意事项】 1. 胰酶消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。 2. 注意无菌操作,尽量避免污染。 3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
0.05%胰酶溶液(含EDTA,含酚红)
ECOTOP货号:ES-8448-100ml(货期:1天)售价:¥90.00
0.05%胰酶溶液(含EDTA,含酚红)
【保存条件】 -20℃保存,有效期2年 【概述】 0.05%胰酶细胞消化液(含EDTA)含0.05%胰酶、EDTA和酚红,pH值为7.2-7.8。该消化液经过过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。 【使用建议(仅供参考)】 1. 贴壁细胞的消化:a.吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。b.加入少量0.05%胰酶细胞消化液(含EDTA),略盖过细胞即可,室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。c.显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。d.如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。2. 组织的消化:a.不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。 【注意事项】 1. 胰酶消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。 2. 注意无菌操作,尽量避免污染。 3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
100mM 丙酮酸钠溶液(100×,无菌,细胞用)
ECOTOP货号:ED-8747-100ml(货期:现货)售价:¥95.00
100mM 丙酮酸钠溶液(100×,无菌,细胞用)
【保存条件】 4℃保存,有效期1年 【概述】 Sodium Pyruvate,中文名为丙酮酸钠。Sodium Pyruvate的分子式为C3H3NaO3,CAS号为113-24-6,分子量为110.0。 丙酮酸钠是细胞培养的常用添加剂,通常在添加葡萄糖后,丙酮酸钠还可作为能量来源而补充到细胞培养基中,因此常作为替代性碳源,并且可避免葡萄糖作为唯一碳源时代谢产物乳酸的堆积。丙酮酸(Pyruvate)作为丙酮酸钠的阴离子,是糖酵解途径(glycolysis pathway)的代谢产物,因此并不是必须的细胞培养添加剂。通常在低葡萄糖配方(如1.0g/L葡萄糖)的培养基中加入丙酮酸钠,有时也在高糖细胞培养基中添加丙酮酸钠。如果细胞已在添加丙酮酸钠的培养基中生长,细胞会对丙酮酸钠表现出一定的依赖性,一旦从培养基中突然撤走丙酮酸钠,细胞的生长可能会出现一个短暂的延迟,因此通常宜维持添加丙酮酸钠。 该产品经0.22μm滤膜过滤除菌,可直接用于细胞培养。 【使用建议(仅供参考)】 100mM丙酮酸钠溶液常以1:100加入细胞培养液中,不同用途的工作浓度有所不同。具体的最佳工作浓度请参考相关文献,或根据实验目的,以及所培养的特定细胞和组织,通过实验进行摸索和优化。 【注意事项】 1. 该产品为无菌产品,应尽量避免微生物污染。 2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
助感染试剂Polybrene 溶液(10mg/ml)-1ml
ECOTOP货号:ES-8425-1ml(货期:现货)售价:¥130.00
助感染试剂Polybrene 溶液(10mg/ml)-1ml
【保存条件】 2-8℃保存,有效期1年;-20℃保存,至少2年有效 【概述】 Polybrene (聚凝胺),也称Hexadimethrine Bromide (海美溴铵),是一种聚溴化季铵阳离子,可显著提高慢病毒、腺病毒等病毒对某些细胞的感染效率,其原理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥从而促进吸附作用。另外,Polybrene也可用于哺乳动物细胞的转染、增强脂质体的转染效率。 带正电荷的Polybrene也是一种抗肝素剂(肝素拮抗剂),可中和红细胞表面负电荷而常用于制备非特异性凝集的红细胞;其抗凝特性也为体外测定肝素活性提供了一种准确、快速、简单的方法。 Polybrene在蛋白测序中有一定的作用:少量的Polybrene在自动测序分析中可明显改善多肽的降解;加入Polybrene能提高PVDF膜的亲水性,降低测序过程中多肽的机械损伤。 Polybrene也可降低某些酶原的自发激活而用于酶动力学测定。 该产品为超纯水配制并经0.22μm滤膜过滤除菌处理,可直接使用。 【使用建议】 1.推荐工作浓度:Polybrene最佳终浓度因不同细胞株而异,通常范围在2~10μg/ml,最常用的浓度为5~8μg/ml。可以通过查阅相关文献或者预实验来摸索。2.使用方法:a.Day1:按实验需要将细胞铺板(比如12孔板)。细胞数以第2天密度约50%为宜。37℃培养过夜。b.Day2:病毒感染前,从-80℃冰箱取出病毒后冰浴融化,参考相关文献或者根据预实验得到的MOI值用新鲜完全培养基将病毒稀释成所需浓度,并加入适量Polybrene,轻轻混匀。c.吸除细胞原有培养基,将病毒液+培养基+Polybrene加入细胞中,轻轻摇匀。37℃继续培养。d.Day4:吸除含病毒的培养基,换为新鲜的培养基。此时可以加入相应抗生素进行筛选。e.Day5-6:根据需要收集细胞检测目的蛋白的表达。 【注意事项】 1. 为避免反复冻融,收到本产品或本产品配制成溶液后建议适当分装后-20℃保存。 2. 因为Polybrene对某些细胞可能有一定的毒性,而且Polybrene长时间作用(大于12小时)也可能对某些细胞产生毒性,所以初次使用Polybrene处理细胞,建议先做毒性测试。 3. 本产品仅可用于科研实验,不可用作药品、食品等方面。 4. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
结晶紫染色液(0.4%)-500ml
ECOTOP货号:ES-8107-500ml(货期:现货)售价:¥390.00
结晶紫染色液(0.4%)-500ml
【保存条件】 4℃避光储存,有效期1年 【概述】 结晶紫染色液是革兰氏染色法中的一种成分。革兰阳性菌染色中,细胞经结晶紫染色后再经Gram碘液处理,形成不溶性复合物,该复合物不能通过细胞壁,不易被脱色,所以保持紫色。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。 【使用建议】 按实验具体要求操作或参考下列革兰氏染色的方法。 涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与水混合均匀,涂成薄层。 干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。 固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动3~5次,每次1s,温度不宜过高,防止菌体蛋白变性,放置待凉后染色。也可以用甲醇或乙醇固定。 初染:滴加结晶紫染色液染色1-2min,清水冲洗去染色液。 媒染:滴加Gram碘液,并覆盖载玻片室温放置1-2min,水洗。 脱色:滴加脱色液摇动,摇动10~30s,直至流下的脱色液不出现紫色为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。 复染:滴加沙黄染色液染色,30~60s,水洗,干燥。 镜检:置油镜观察。 染色结果:革兰氏阳性菌为蓝色至紫色;革兰氏阴性菌为红色。 【注意事项】 1. 涂片之前,应事先在背面做好圆圈标记,以便判断后续试验的位置。 2. 待检细菌培养时间会影响染色,阳性菌培养时间过长或已死亡或细菌溶解,常呈阴性。 3. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 4. 结晶紫对人体有害,请注意适当防护。

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