【保存条件】
4℃避光保存,有效期2年
【概述】
G418 Sulfate (G418硫酸盐),也称作Geneticin (遗传霉素)、G418、G 418或者G-418,是一种结构类似于庆大霉素B1 (Gentamycin B1)的氨基糖苷类抗生素,来源于Micromonospora rhodorangea,常用于筛选表达neo基因的真核或原核多克隆或单克隆细胞。G418不仅用于稳定细胞株的筛选,也用于稳定细胞株的维持。本产品为50mg/ml G418水溶液,经0.22μm滤膜过滤除菌,可直接用于细胞培养。
【使用方法】
一般来说,刚开始筛选转化子需要高浓度的G418,并用一个较低浓度的G418维持培养。生长条件,细胞类型和其它的环境因素都可能影响G418的用量,因此第一次使用的实验体系建议通过剂量反应性曲线(dose-response curve or kill curve),来确定最佳筛选浓度。通常情况,哺乳动物细胞筛选范围200-2000μg/ml;植物细胞:10-100μg/ml;酵母细胞:500-1000μg/ml。具体浓度可参考文献或进行预实验测试。
【注意事项】
1. G418不要和其它抗生素/抗真菌剂(如青霉素/链霉素)共同使用,因为它们是G418的竞争性抑制剂。其它的抗生素也会产生交叉活性。
2. G418加入培养体系中,未转染的细胞有可能不会被杀死,原因在于药物浓度过低,或者细胞密度过高。另外,快速分裂的细胞相对于缓慢增殖细胞,更容易被杀死。对照细胞(未转染)可能在添加抗生素5-7天后才能被杀死,转染细胞(抗性克隆子)的克隆需要10-14天形成。
3. 即使加入有效剂量的G418,细胞可能会继续分裂2-3次。G418的药效通常在2天后才变得明显。
4. 反复冻融易导致抗生素失效,如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
5. 仅用于实验室,不适合农业/家庭/临床用途使用。
6. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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