【保存条件】
2-8℃避光保存,有效期1年。
【概述】
碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种常用的细胞核荧光染料,作为一种溴化乙锭(EB)的类似物,能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。PI经488 nm荧光激发,产生相对较大的斯托克司频移后,并在617 nm处具有最大发射波长。另外,PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外,但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用以上特性,PI可作为细胞活力分析的荧光探针之一。不仅可单独使用;也可以同Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用,同时对活细胞和死细胞染色和鉴定。也能够与488 nm激发的荧光素如FITC和PE等联合使用。
本品为Sigma原料配制即用型PI染色液,可进入死细胞内与DNA结合,并被活细胞排斥在外,适合用于流式细胞仪进行细胞活力分析。PI单染用FL2通道检测,若与FITC或PE标记抗体/蛋白联合使用FL3通道检测
【使用方法(仅供参考)】
1. 收集细胞,计数,最高以1×106 cells/100 μL的量加入FACS分选管
2. 加2ml PBS(或HBSS)清洗细胞,300 × g离心5 min,去上清。重复一次。
注:若需要用抗体标记表面抗原,可在此步之后进行。PI不适合与检测胞内分子的抗体联合使用。
3. 细胞清洗后,用100 μL流式细胞染色缓冲液(ED-8765,Cell Staining Buffer (Flow Cytometry))重悬细胞;加入10 μL PI染色液,轻柔混匀,冰上或者室温避光孵育10-15 min。
4. 直接上机进行流式分析。注:PI染色后不可再清洗细胞。PI染色孵育后尽快上机检测。
【注意事项】
1. 碘化丙啶(PI)是已知的诱变剂,操作过程中一定要做好防护工作避免与PI的直接接触。另外PI溶液在丢弃之前需要先经过活性炭处理。
2. 流式细胞染色缓冲液可选择货号:ED-8765 Cell Staining Buffer (Flow Cytometry)。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4. 仅用于实验室研究,不适合农业/家庭/临床用途使用。
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