10×流式破膜缓冲液(Saponin)（破膜剂）-500ml

【保存条件】

4ºC保存，避免强光直射，勿冷冻，有效期1年。

【概述】

固定剂、破膜剂用于细胞内细胞因子染色前对细胞膜的处理。固定剂起稳定细胞膜、保持细胞膜表面抗体与抗原结合的作用；破膜剂使流动的、完整的细胞膜产生小孔以利于抗体进入细胞。用流式细胞仪检测细胞内抗原及DNA时，对待测细胞进行固定、破膜处理后，加入相应抗体或检测试剂，孵育一定时间即可上机分析。

将10×母液稀释后使用：如取100ml 10×母液加入900ml纯水稀释成1×工作液。

【操作方法(仅供参考）】

1. 收获待测细胞，1000 rpm离心10 分钟，弃上清。

2. 加入 500 μL预冷(4℃)固定剂。

3. 室温孵育10 分钟。

4. 1000 rpm离心10 分钟。

5. 弃上清，加入PBS洗一次，1000 rpm离心10 分钟。

6. 弃上清，加入1.5 mL破膜剂。

7. 室温孵育10-15 分钟。

8. 1000 rpm离心5 分钟。

9. 弃上清，加入适量破膜剂重悬细胞。

10. 加入检测抗体进行染色后，用流式细胞仪进行分析

【注意事项】

1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 用后请及时拧紧瓶盖，以防挥发。