【保存条件】
4ºC保存,避免强光直射,勿冷冻,有效期1年。
【概述】
固定剂、破膜剂用于细胞内细胞因子染色前对细胞膜的处理。固定剂起稳定细胞膜、保持细胞膜表面抗体与抗原结合的作用;破膜剂使流动的、完整的细胞膜产生小孔以利于抗体进入细胞。用流式细胞仪检测细胞内抗原及DNA时,对待测细胞进行固定、破膜处理后,加入相应抗体或检测试剂,孵育一定时间即可上机分析。
【操作方法(仅供参考)】
1. 收获待测细胞,1000 rpm离心10分钟,弃上清。
2. 加入500 μL预冷(4℃)固定剂。
3. 室温孵育10分钟。
4. 1000 rpm离心10分钟。
5. 弃上清,加入PBS洗一次,1000 rpm离心10分钟。
6. 弃上清,加入1.5 mL破膜剂。
7. 室温孵育10-15 分钟。
8. 1000 rpm离心5 分钟。
9. 弃上清,加入适量破膜剂重悬细胞。
10. 加入检测抗体进行染色后,用流式细胞仪进行分析
【注意事项】
1. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 用后请及时拧紧瓶盖,以防挥发。
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