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产品细节图:

RIPA裂解液 (低强度)

品牌:ECOTOP | 货号:ES-8150-100ml(货期:现货)
  • 所属大类 : 蛋白类试剂
  • 所属小类 : 常用生化试剂
  • 品牌 : ECOTOP
  • 规格 : 100ml
  • 原价 : ¥180.00
  • 促销价 : ¥180.00
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    【保存条件】

    4℃保存,有效期1

    【概述】

    RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的WesternIPELISA等。
          RIPA的本意是Radio Immuno Precipitation AssayRIPA裂解液的配方有很多种,根据其裂解液的强度大致可以分为高强度、中强度、低强度三类。请根据不同需求选择不同强度RIPA裂解液。

    使用建议

    如发现RIPA有沉淀,请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。根据使用量,取每1ml RIPA加入10μl PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。混匀备用(PMSF现用现加)。

    1. 样品前处理:

    a) 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照6孔板每孔细胞量加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。

    b) 对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。

    c) 对于组织样品:把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。

    2. 后处理:将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGEWestern blotting和免疫沉淀等操作。

    【注意事项】

    1. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    2. 本产品长时间低温存放可能会出现沉淀,可在37ºC水浴约10分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。

    3. 为保证最佳的使用效果,请尽量避免过多的反复冻融,可分装后使用。

    4. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行,根据需要添加不同抑制剂

    5. RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaBp53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。

    6. 该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

     


    1.《Multifunction Sr, Co and F co-doped microporous coating on titanium of antibacterial, angiogenic and osteogenic activities》
    作者:Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影响因子:4.259
    期刊:《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID:27353337

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    高质量生物试剂供应商

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