Tris抗原修复液(10×,pH10.0)-100ml

【保存条件】

4ºC保存,有效期一年

【概述】

Tris抗原修复液是一种常用的抗原修复液，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。

细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致蛋白之间的交联(cross-link)，从而遮蔽样品的抗原位点，导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。

本抗原修复液采用了广泛使用的Tris，可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。

【操作方法】

1. 对于石蜡切片： 

a. 脱蜡：二甲苯3次，每次3-5min→ 无水乙醇2次，每次3-5min→ 95％乙醇1次，3-5min→ 90%乙醇1次，3-5min→ 75％乙醇1次，3-5min→ 蒸馏水洗2次，每次3-5min。 

b. 抗原修复：

① 用去离子水稀释Tris抗原修复液(10×,pH10.0)至1×，例如10ml本抗原修复液(10×)加入90ml去离子水，混合均匀，即得100ml 1×抗原修复液；

② 将切片浸泡在抗原修复液(1×)中；95-100℃加热约 15 min (加热时间可以控制在10-20 min，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。 随后大约在20-30 min 内冷却至室温。

③ 用免疫染色洗涤液洗涤 1-2次，每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 

2. 对于冰冻切片：

① 用去离子水稀释Tris抗原修复液(10×,pH10.0)至1×，例如10ml本抗原修复液(10×)加入90ml去离子水，混合均匀，即得100ml 1×抗原修复液；

② 用免疫染色洗涤液洗涤切片5min；

③ 将切片浸泡在抗原修复液 (1×)中，95-100℃加热约15 min (加热时间可以控制在10-20 min内，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 min 内冷却至室温。

④ 用免疫染色洗涤液洗涤1-2 次，每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 

3. 对于其它样品的抗原修复，可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。

【注意事项】

1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 用后请及时拧紧瓶盖，以防挥发。