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产品细节图:

伊文思蓝染色液(0.5%)

品牌:ECOTOP | 货号:ES-8435-100ml
  • 所属大类 : 蛋白类试剂
  • 所属小类 : 常用生化试剂
  • 品牌 : ECOTOP
  • 规格 : 100ml
  • 原价 : ¥130.00
  • 促销价 : ¥130.00
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    伊文思蓝染色液(0.5%使用说明书


    【包装规格】

    产品编号

    产品名称

    包装

    ES-8435

    Evans Blue Stain Solution 0.5%

    100ml/500ml

     

    使用说明书

    1


    【保存条件】

    室温保存,有效期1


    【概述】

    伊文思蓝(Evans Blue)又称偶氮蓝,分子式C34H24N6Na4O14S4,分子量为960.80CAS号为314-13-6。伊文思蓝属于一种常用的偶氮染料制剂,因其分子量大小和血浆白蛋白相近,而且在血液中和血浆白蛋白有很高的亲和力,因此在神经科学研究中常被用于示踪观察血脑屏障(BBB)的完整性,也用于细胞染色区分活细胞、死细胞,亦可测定血容量。

    伊文思蓝和台盼蓝都是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性和细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。伊文思蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量,其中0.5%为最常用的浓度。活细胞因有外排功能而无法被伊文思蓝染色,因此可以通过此方法在显微镜下区分死细胞和活细胞,但无法区分死亡和坏死。


    使用建议

    ()血脑屏障通透性

    1. 取处理后的实验动物(以小鼠为例),静脉注射Evans Blue Stain Solution(0.5%)数秒至1分钟,小鼠眼睛、皮肤出现蓝色。0.51h后处死小鼠,取目的脑组织。

    2. 脑组织置于1.5ml离心管中,加入1ml PBS, 迅速用组织匀浆器将脑组织制成匀浆离心。

    3. 取上清,加入等量三氯乙酸,4℃孵育1824h。该步骤亦可采用如下操作: 取上清,按上清:丙酮=3:7比例加入丙酮,室温孵育24h

    4. 1000g离心2030 min2000g离心15min

    5. 取上述溶液12ml,用分光光度计测620 nm处吸光值(OD)。同时测定已知同梯度的标准依文思蓝的OD值,绘制标准曲线。根据标准曲线计算出待测待测样品的依文思蓝含量。

     

    ()活细胞染色

    1、取100μl重悬细胞到常规1.5ml0.5ml离心管内,100μl 伊文思蓝染液轻轻混匀,染色3min(染色时间可适当延长,但宜超过10min)

    2、吸取少量经过染色后的细胞,用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少数500个细胞,数出蓝色细胞和细胞总数。细胞存活率计算公式如下: 细胞存活率=(细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数×100%


    【注意事项】

    1. 伊文思蓝对人体有轻微毒性,请小心防护。

    2. 细胞染色时,注意凋亡小体偶尔也有拒染现象。

    3. 血脑屏障通透性实验中,伊文思蓝染色液注射量应根据同动物以及动物的重量调整。

    4. 最好采用低温冷冻离心机进行离心

    5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


    1.《Multifunction Sr, Co and F co-doped microporous coating on titanium of antibacterial, angiogenic and osteogenic activities》
    作者:Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影响因子:4.259
    期刊:《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID:27353337

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