【保存条件】
-20℃保存,有效期2年
【概述】
0.25%胰酶细胞消化液(含EDTA)含0.25%胰酶、EDTA和酚红,pH值为7.2-7.8。该消化液经过过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。
【使用建议(仅供参考)】
1. 贴壁细胞的消化:
a.吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b.加入少量0.25%胰酶细胞消化液(含EDTA),略盖过细胞即可,室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。
c.显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
d.如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。
如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
a.不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【注意事项】
1. 胰酶消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
2. 注意无菌操作,尽量避免污染。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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