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产品细节图:

Bradford蛋白浓度测定试剂盒-1000T

品牌:ECOTOP | 货号:EK-5002-1000T
  • 所属大类 : 蛋白类试剂
  • 所属小类 : 非常用试剂
  • 品牌 : ECOTOP
  • 规格 : 1000T
  • 原价 : ¥120.00
  • 促销价 : ¥120.00
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    【保存条件】

    4℃保存有效期1年


    【概述】

    考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置(Imax),由465nm变为595nm,在一定的浓度范围内,测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM,但受略高浓度的去垢剂影响,需确保SDS的浓度低于0.1%Triton X-100低于0.1%Tween 20, 60, 80低于0.06%


    【使用方法】

    1. 蛋白标准液的准备 

    a. 蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,如果蛋白样品所在溶液不含有干扰本试剂盒检测的物质,也可以用0.9%NaClPBS或水稀释标准品。蛋白标准液(5mg/ml BSA)如果冻存,请完全融化并混匀后使用。 

    b. 按照下表配制00.1250.250.50.7511.5mg/ml蛋白标准。每次稀释时注意充分混匀。如果有必要可以增加设置 0.0625mg/ml的蛋白标准。

    编号

    稀释液体积

    标准品体积

    最终浓度

    A

    70µl

    5mg/ml BSA 30µl

    1.5mg/ml

    B

    30µl

    A管取60µl

    1mg/ml

    C

    20µl

    B管取60µl

    0.75mg/ml

    D

    30µl

    C管取60µl

    0.5mg/ml

    E

    60µl

    D管取60µl

    0.25mg/ml

    F

    60µl

    E管取60µl

    0.125mg/ml

    G

    60µl

    0µl

    0mg/ml

    2. 蛋白浓度测定 

    a5µl不同浓度蛋白标准加到96孔板的蛋白标准孔中。 

    b. 5µl样品到96孔板的样品孔中。如果样品不足5µl,需加标准品稀释液补足到5µl。请注意记录样品体积。 

    c. 各孔加入250µl G250染色液。 

    d. 用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。可以立即测定吸光度,也可以在2小时内测定,2小时内检测数据无显著变化。 

    e. 根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品中的蛋白浓度。


    【注意事项】

    1. 本品BSA因每次使用量较小,推荐分装使用。

    2. 不同96板的吸收值会有不同,得到OD有区别为正常现象(保证数据呈线性关系)

    3. 请使用96孔底部透明板(如普通细胞培养板)检测,最佳波长为595nm

    4. G250染色液回复至室温后使用,有利于提高检测灵敏度

    5. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

     





    1.《Multifunction Sr, Co and F co-doped microporous coating on titanium of antibacterial, angiogenic and osteogenic activities》
    作者:Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影响因子:4.259
    期刊:《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID:27353337

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