IP/Co-IP细胞裂解液

【保存条件】

4ºC保存，有效期1年

【操作方法】

裂解贴壁细胞的方法（裂解前可加入相应蛋白酶/磷酸酶抑制剂）：

1. 小心地从细胞中去除培养基。 用冰冷的PBS清洗一次。

2. 将冰冷IP/Co-IP细胞裂解缓冲液添加到细胞板中（6孔板中每孔加入200-400μl），并在冰上孵育5分钟，中途不间断混匀。

3. 将裂解液转移至微量离心管中，以约13,000×g的速度离心10分钟，以在4°C下沉淀细胞碎片。

4. 将上清液转移到新的试管中，以测定蛋白浓度并进行进一步分析。

裂解悬浮细胞的方法（裂解前可加入相应蛋白酶/磷酸酶抑制剂）：

1. 将细胞悬液以1,000×g离心5分钟以沉淀细胞，丢弃上清液。

2. 用冰冷的PBS洗涤细胞一次，以1,000×g离心5分钟以沉淀细胞。

3. 将冰冷的IP/Co-IP细胞裂解缓冲液添加到细胞沉淀中。每50 mg湿细胞沉淀（10：1 v / w）使用500μl裂解缓冲液。

4. 在冰上孵育裂解物5分钟。通过在4°C下以〜13,000×g离心10分钟去除细胞碎片。

5. 将上清液转移到新的试管中，以测定蛋白浓度并进行进一步分析。

【注意事项】

1. 本品可用于蛋白纯化和各种免疫检测（如ELISA、Western印迹）。

2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。