【保存条件】
-20℃避光保存,有效期1年。
【进口原料】
ROCHE REF10236276001, LOT53197821(不同批次产品原料批次会有更新)
【概述】
DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)是一种能够与DNA中大部分A、T碱基相互结合的荧光染料,常用于荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当DAPI与双链DNA结合时,最大吸收波长为358nm,最大发射波长为461nm。DAPI的发射光为蓝色,且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠,可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。本产品母液为DMF溶解,后以PBS稀释为DAPI-PBS溶液,浓度为10μg/ml。经过滤处理,为即用型工作液,可直接用于固定细胞或组织样品的细胞核染色。
【使用方法(仅供参考)】
1. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的DAPI染色。
2. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。
3. 室温放置5-10分钟。
4. 吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
5. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
【注意事项】
1. DAPI被普遍认为具有致癌性,操作时应戴手套,并避免交叉污染。
2. 本产品需避光,并尽量避免反复冻融。
3. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
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