产品介绍
本试剂盒采用彩色溶液配方,提取步骤更清晰可视。同时应用先进的硅胶膜吸附技术,操作简单、快速。菌体经碱裂解法处理后通过离心吸附柱,专一性结合DNA,洗去杂质,高效快速提取多至40μg的质粒DNA。本试剂盒采用独特的缓冲液配方,最大限度去除蛋白杂质及其它有机化合物,每次可处理1-5ml菌液。得到的DNA比传统试剂盒纯度更高,可直接用于酶切、转化、测序及PCR等分子生物学实验。
存储条件
除RNase A Solution外,其它组份在室温(15-25°C)下干燥保存稳定至少12个月。RNase A Solution收到后请冻于-20°C,加至Buffer P1后混合液保存于4°C。
需要额外准备的材料
□ 无水乙醇(96%-100%)
□ 无菌1.5ml/2ml离心管
开始前注意事项
□ Buffer P1为粉红色澄清溶液,Buffer P2为紫红色澄清溶液,Buffer N3为黄色澄清溶液。
□ Buffer P2和Buffer N3如有混浊现象,可在37℃水浴中加热5-10min即可恢复澄清。
□ 处理低拷贝质粒时,按比例扩大Buffer P1、Buffer P2和Buffer N3的用量,可处理5~10ml细菌培养液。
□ 质粒提取所有步骤都在室温(15-25°C)下进行。
□ 试剂颜色不会影响到质粒提取的浓度及纯度,请放心使用。
开始前试剂准备
□ 短暂离心RNase A Solution管,把全部RNase A Solution转移至Buffer P1中,并于2-8℃保存。
□ 按瓶子标签所示,加入4倍体积的无水乙醇稀释Buffer PW,于室温密封保存。
DNA浓度及纯度检测:
回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40μg/ml单链DNA。
OD260/OD280比值应为1.7-2.0,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用ddH2O比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
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