20×SuperBlot 免冰浴快速蛋白电泳转膜液

【保存条件】

室温保存，有效期1年

【概述】

SuperBlot免冰浴快速转膜液是一种改良的Towbin经典缓冲液，这种专有的配方大大提高了转移速度，而不会产生过多的热量而影响蛋白质。SuperBlot免冰浴快速转膜液一般不需要额外添加甲醇/乙醇或SDS，但它与这些添加剂兼容（可添加甲醇/乙醇0-20%），当分子量大于130KD时建议添加10-20%甲醇或乙醇。

【操作方法】

1. 使用前用去离子水将20×SuperBlot免冰浴快速转膜液稀释至1×工作液，例如将50ml 20×SuperBlot免冰浴快速转膜液加入950ml去离子水中混匀。（如分子量大于130KD，可以添加100ml-200ml乙醇，如取100ml 10×SuperBlot蛋白电泳快速转膜液加入700ml-800ml去离子水与100ml-200ml 乙醇混匀备用）

2. 做好转印三明治结构，然后转移至电泳槽中，设定恒流 400 mA，大约时间15-30分钟完成蛋白转膜。

【注意事项】

1. PVDF膜需提前使用甲醇浸泡30秒以上。

2. 转印电流建议设定恒流400mA, 一般25-30分钟可以将150kD以下蛋白完全转印;小于100kD蛋白20分钟即可完全转印;对于大于150kD蛋白，建议延长5-10分钟。

3. 凝胶的浓度影响转印的效率，对于胶浓度8%,20分钟即可完成转印;对于胶浓度10%,25-30分钟即可完成转印;对于胶浓度大于 10%,建议延长5-10分钟

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。