【保存条件】
4℃避光储存,有效期1年
【概述】
结晶紫染色液是革兰氏染色法中的一种成分。革兰阳性菌染色中,细胞经结晶紫染色后再经Gram碘液处理,形成不溶性复合物,该复合物不能通过细胞壁,不易被脱色,所以保持紫色。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。
【使用建议】
按实验具体要求操作或参考下列革兰氏染色的方法。
涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与水混合均匀,涂成薄层。
干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。
固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动3~5次,每次1s,温度不宜过高,防止菌体蛋白变性,放置待凉后染色。也可以用甲醇或乙醇固定。
初染:滴加结晶紫染色液染色1-2min,清水冲洗去染色液。
媒染:滴加Gram碘液,并覆盖载玻片室温放置1-2min,水洗。
脱色:滴加脱色液摇动,摇动10~30s,直至流下的脱色液不出现紫色为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。
复染:滴加沙黄染色液染色,30~60s,水洗,干燥。
镜检:置油镜观察。
染色结果:革兰氏阳性菌为蓝色至紫色;革兰氏阴性菌为红色。
【注意事项】
1. 涂片之前,应事先在背面做好圆圈标记,以便判断后续试验的位置。
2. 待检细菌培养时间会影响染色,阳性菌培养时间过长或已死亡或细菌溶解,常呈阴性。
3. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4. 结晶紫对人体有害,请注意适当防护。
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