【保存条件】
2-8℃保存,有效期1年;-20℃保存,至少2年有效
【概述】
Polybrene (聚凝胺),也称Hexadimethrine Bromide (海美溴铵),是一种聚溴化季铵阳离子,可显著提高慢病毒、腺病毒等病毒对某些细胞的感染效率,其原理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥从而促进吸附作用。另外,Polybrene也可用于哺乳动物细胞的转染、增强脂质体的转染效率。
带正电荷的Polybrene也是一种抗肝素剂(肝素拮抗剂),可中和红细胞表面负电荷而常用于制备非特异性凝集的红细胞;其抗凝特性也为体外测定肝素活性提供了一种准确、快速、简单的方法。
Polybrene在蛋白测序中有一定的作用:少量的Polybrene在自动测序分析中可明显改善多肽的降解;加入Polybrene能提高PVDF膜的亲水性,降低测序过程中多肽的机械损伤。
Polybrene也可降低某些酶原的自发激活而用于酶动力学测定。
该产品为超纯水配制并经0.22μm滤膜过滤除菌处理,可直接使用。
【使用建议】
1.推荐工作浓度:
Polybrene最佳终浓度因不同细胞株而异,通常范围在2~10μg/ml,最常用的浓度为5~8μg/ml。可以通过查阅相关文献或者预实验来摸索。
2.使用方法:
a.Day1:按实验需要将细胞铺板(比如12孔板)。细胞数以第2天密度约50%为宜。37℃培养过夜。
b.Day2:病毒感染前,从-80℃冰箱取出病毒后冰浴融化,参考相关文献或者根据预实验得到的MOI值用新鲜完全培养基将病毒稀释成所需浓度,并加入适量Polybrene,轻轻混匀。
c.吸除细胞原有培养基,将病毒液+培养基+Polybrene加入细胞中,轻轻摇匀。37℃继续培养。
d.Day4:吸除含病毒的培养基,换为新鲜的培养基。此时可以加入相应抗生素进行筛选。
e.Day5-6:根据需要收集细胞检测目的蛋白的表达。
【注意事项】
1. 为避免反复冻融,收到本产品或本产品配制成溶液后建议适当分装后-20℃保存。
2. 因为Polybrene对某些细胞可能有一定的毒性,而且Polybrene长时间作用(大于12小时)也可能对某些细胞产生毒性,所以初次使用Polybrene处理细胞,建议先做毒性测试。
3. 本产品仅可用于科研实验,不可用作药品、食品等方面。
4. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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