【保存条件】
室温避光保存,有效期1年
【概述】
苏木素染色(hematoxylin staining or haematoxylin staining),也被称作苏木精染色,是最常用的组织和细胞的染色方法之一。无色的苏木素(hematoxylin)氧化后形成有醌环结构(quinoid ring)的氧化苏木素(hematein or haematein),从而可以和三价的铝离子、铁离子等形成有颜色的带正电荷的复合物(如hematein-Al3+ complexes)。伊红(eosin)是一种化学合成的酸性染料,在水中解离成带负电荷的阴离子,可以和蛋白质氨基上带正电荷的阳离子结合,从而使细胞胞浆染成不同程度的红色或粉红色,与苏木素染色液染色形成的蓝色细胞核形成鲜明对比,从而使苏木素伊红(HE)染色成为病理组织切片中最广泛使用的一种常规染色方法。
本试剂盒使用试剂为优化后的Mayer法配方,苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色,细胞浆呈现粉红色或红色。
【使用方法(仅供参考)】
1.样品处理
a.对于石蜡切片:
二甲苯(自备)中脱蜡5-10分钟;换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10分钟;无水乙醇浸泡5分钟;90%乙醇浸泡2分钟;80%乙醇浸泡2分钟;70%乙醇浸泡2分钟。蒸馏水洗涤2分钟。
b.对于冰冻切片:
固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。
c.对于培养细胞:
固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2分钟。
2.苏木素伊红(HE)染色
对于上述处理好的样品:
a.苏木素染色液染色1-5分钟(可以根据染色结果和要求调整时间,根据组织大小和厚度进行调整)。
b.蒸馏水洗去浮色,用适当的返蓝液浸泡样品10-60s(亦可用自来水中冲洗去多余的染色液,约10分钟)。
c.蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。
d.选做:根据不同分化液(自备)的分化时间,分化约2-30秒,自来水冲洗10分钟。
e.伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。
此时,如果需要直接观察,可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行,70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。
3.脱水、透明、封片观察
70%乙醇10秒,80%乙醇10秒,90%乙醇10秒,无水乙醇10秒。二甲苯透明5分钟。换用新鲜的二甲苯,再透明5分钟。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察,细胞核呈蓝色,而细胞浆呈粉红色或红色。
【注意事项】
1. 染色后的分化为选做步骤,但分化后核质着色更清晰。
2. 染色液可以重复使用多次,认为效果不佳时再更换新的染色液。
3. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
4. 伊红在水和梯度乙醇中会出现脱色,因此建议快速脱水。
5. 仅用于实验室,不适合农业/家庭/临床用途使用。
6. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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