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产品细节图:

尿液外泌体提取试剂-100ml

品牌:ECOTOP | 货号:EK-5203-100ml(货期:现货)
  • 所属大类 : 细胞培养
  • 所属小类 : 常用生化试剂
  • 品牌 : ECOTOP
  • 规格 : 100ml
  • 原价 : ¥1460.00
  • 促销价 : ¥1460.00
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    【保存条件】 

    4ºC保存有效期1

    【概述】 

    外泌体是含有复杂RNA和蛋白质小囊泡(30-120 nm),所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。外泌体被认为是细胞间的信使,在特定细胞之间传递其效应物或向大分子发出信号,然而它们的形成组成以及涉及它们的生物学途径仍未完全了解。

    ECOTOP尿液外泌体提取试剂可以从尿样品中快速高效地富集完整的外泌体。

    •为任何类型的下游应用最大限度地大大提高完整外泌体的回收率

    • 使用简单可靠的实验方案轻松分离外泌体

    • 避免耗时的超速离心

    • 灵活性极佳—可以根据样品量按比例增加或减少

    【操作方法】 

    样品处理标准操作建议0.8-5ml尿液

    1. 将尿液样本从储存库中取出并放在冰上。如果样品被冷冻,请在25°C37°C下解冻样品

    2. 水浴直到完全液态,然后放在冰上直至使用。

    3. 4°C条件下将尿样以2000×g离心30分钟以去除细胞和碎片。

    4. 将含有澄清尿液的上清液转移到新的离心管注意不要吸到管底的沉淀。

    外泌体分离

    1. 从上一步分离的不含细胞的上清液中取所需体积至新管中,并加入1倍体积的ECOTOP尿液外泌体提取试剂。如1ml上清尿液加入1ml尿液外泌体提取试剂。

    2. 通过倒置离心管、涡旋或上下移液直到溶液均匀,充分混合尿液/试剂混合物。。

    3. 将混匀好的样品室温孵育1小时。

    4. 孵育完成后,在2-8℃条件下10000×g离心1小时。

    5. 完成离心后,吸走并丢弃上清液,外泌体即包含在试管底部的沉淀中(大多数情况下是不可见的)。

    :重要!如果在离心过程中使用固定角转子,则外泌体会沿着转子中试管的外表面内侧分布

    6. 加入合适体积的1×PBS或其他类似缓冲液重悬沉淀。具体见下表:

    开始实验时所使用的尿液体积

    重悬所需缓冲液体积

    1ml

    20-50μl

    5ml

    100-300μl

    7. 当沉淀重新悬浮之后,所得的外泌体即可进行下游分析或通过亲和层析进一步纯化。提纯后的外泌体可在2-8℃中保存1周或在小于-20℃中长期保存。

    【注意事项】 

    1. 尿液上清分离后尽快进行外泌体分离,保存在 4℃-80℃,都会对产量有一定的影响。 

    2. 分离外泌体可用于细胞功能研究或根据后续研究加入相应 Trizol或蛋白裂解液抽提 RNA或蛋白质或 1:100 PBS稀释行粒径检测;

    3. 本品仅限用于科研实验。

    1.《Multifunction Sr, Co and F co-doped microporous coating on titanium of antibacterial, angiogenic and osteogenic activities》
    作者:Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影响因子:4.259
    期刊:《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID:27353337

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