SDT裂解液-100ml

【保存条件】

4℃保存，有效期6个月。-20℃保存，有效期1年。

【概述】

SDT裂解缓冲液用于裂解哺乳动物细胞和组织。其含有SDS、Tris-HCl、DTT，对样本全蛋白有很好的提取效果。 但其中所含的SDS会使蛋白质变性失活，因此不适合后续活性相关实验。试剂请于避光保存，以确保其稳定性。

【使用建议】

1. 取100mg动物组织或细胞（组织提前剪成小块）加入500μl PBS溶液中初步匀浆（60 Hz，45s），再加入500μl SDT裂解液。

2. 将上一步加有SDT裂解液的动物组织或细胞于4℃进行匀浆（60 Hz，20s）。

3. 低速短暂离心将管壁液体离下，后置于沸水浴（或100℃）3min。

4. 再次使用探头超声：40-50W超声5s，间隔5s，一共6个循环。

5. 将溶液置于沸水浴（或100℃）2min，10000g离心10min。

6. 收集上清进行后续实验。

【注意事项】

1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 该试剂仅用于科研领域，不得用于临床诊断或其他用途。

3. SDT裂解液不适用于后续做与活性相关的实验，如免疫共沉淀。在进行蛋白质浓度测定时由于SDT裂解液中含有SDS和DTT，因此 Bradford法和BCA方法不适用，而应选择去垢剂和还原剂均兼容的荧光法测定蛋白质浓度。各种裂解液中含有的去垢剂均会影响胰蛋白酶活性，并且对质谱分析产生很大影响，因此均需要在蛋白质样品酶解前除去。

4. SDT裂解液中含有较高浓度的SDS，在低温下可能析出为正常现象，使用前只需将溶液置于37℃加热5-10min或至溶解即可。