【保存条件】
室温保存,有效期一年
【概述】
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。本抗原修复液含有了广泛使用的SDS等抗原修复试剂等,pH值约为7.4,可以快速有效地去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
【操作方法】
1. 对于石蜡切片:
a. 脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡5分钟,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5分钟,两次。90%乙醇5 分钟,两次,70%乙醇5分钟,一次。蒸馏水5分钟,两次。
b. 抗原修复:用重蒸水或Milli-Q水将本抗原修复液(5×)稀释5倍,配制成抗原修复液(1×),例如1ml本抗原修复液(5×)加入 4ml去离子水混合均匀,即得5ml抗原修复液(1×)。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,室温孵育5分钟。用免疫染色洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟,以充分去除残留的SDS等试剂。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2. 对于冰冻切片: 用免疫染色洗涤液洗涤切片5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,室温孵育约5分钟。用免疫染色洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟,以充分去除残留的SDS等试剂。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
3. 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
【注意事项】
1. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 低温储存后可能会有析出,若出现析出或沉淀,可适当加热即溶解,不影响使用效果。
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