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尿液外泌体提取试剂-100ml
ECOTOP货号:EK-5203-100ml(货期:现货)售价:¥1460.00
尿液外泌体提取试剂-100ml
【保存条件】 4ºC保存,有效期1年 【概述】 外泌体是含有复杂RNA和蛋白质的小囊泡(30-120 nm),所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。外泌体被认为是细胞间的信使,在特定细胞之间传递其效应物或向大分子发出信号,然而它们的形成、组成以及涉及它们的生物学途径仍未完全了解。 ECOTOP尿液外泌体提取试剂可以从尿样品中快速高效地富集完整的外泌体。 •为任何类型的下游应用最大限度地大大提高完整外泌体的回收率 • 使用简单可靠的实验方案轻松分离外泌体 • 避免耗时的超速离心 • 灵活性极佳—可以根据样品量按比例增加或减少 【操作方法】 样品处理(标准操作建议0.8-5ml尿液): 1. 将尿液样本从储存库中取出并放在冰上。如果样品被冷冻,请在25°C至37°C下解冻样品 2. 水浴直到完全液态,然后放在冰上直至使用。 3. 4°C条件下将尿样以2000×g离心30分钟以去除细胞和碎片。 4. 将含有澄清尿液的上清液转移到新的离心管,注意不要吸到管底的沉淀。 外泌体分离: 1. 从上一步分离的不含细胞的上清液中取所需体积至新管中,并加入1倍体积的ECOTOP尿液外泌体提取试剂。如1ml上清尿液加入1ml尿液外泌体提取试剂。 2. 通过倒置离心管、涡旋或上下移液直到溶液均匀,充分混合尿液/试剂混合物。。 3. 将混匀好的样品室温孵育1小时。 4. 孵育完成后,在2-8℃条件下10000×g离心1小时。 5. 完成离心后,吸走并丢弃上清液,外泌体即包含在试管底部的沉淀中(大多数情况下是不可见的)。 注:重要!如果在离心过程中使用固定角转子,则外泌体会沿着转子中试管的外表面内侧分布。 6. 加入合适体积的1×PBS或其他类似缓冲液重悬沉淀。具体见下表: 开始实验时所使用的尿液体积 重悬所需缓冲液体积 1ml 20-50μl 5ml 100-300μl 7. 当沉淀重新悬浮之后,所得的外泌体即可进行下游分析或通过亲和层析进一步纯化。提纯后的外泌体可在2-8℃中保存1周或在小于-20℃中长期保存。 【注意事项】 1. 尿液上清分离后尽快进行外泌体分离,保存在 4℃和-80℃,都会对产量有一定的影响。 2. 分离外泌体可用于细胞功能研究或根据后续研究加入相应 Trizol或蛋白裂解液抽提 RNA或蛋白质或 1:100 PBS稀释行粒径检测; 3. 本品仅限用于科研实验。
尿液外泌体提取试剂-50ml
ECOTOP货号:EK-5203-50ml(货期:现货)售价:¥850.00
尿液外泌体提取试剂-50ml
【保存条件】 4ºC保存,有效期1年 【概述】 外泌体是含有复杂RNA和蛋白质的小囊泡(30-120 nm),所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。外泌体被认为是细胞间的信使,在特定细胞之间传递其效应物或向大分子发出信号,然而它们的形成、组成以及涉及它们的生物学途径仍未完全了解。 ECOTOP尿液外泌体提取试剂可以从尿样品中快速高效地富集完整的外泌体。 •为任何类型的下游应用最大限度地大大提高完整外泌体的回收率 • 使用简单可靠的实验方案轻松分离外泌体 • 避免耗时的超速离心 • 灵活性极佳—可以根据样品量按比例增加或减少 【操作方法】 样品处理(标准操作建议0.8-5ml尿液): 1. 将尿液样本从储存库中取出并放在冰上。如果样品被冷冻,请在25°C至37°C下解冻样品 2. 水浴直到完全液态,然后放在冰上直至使用。 3. 4°C条件下将尿样以2000×g离心30分钟以去除细胞和碎片。 4. 将含有澄清尿液的上清液转移到新的离心管,注意不要吸到管底的沉淀。 外泌体分离: 1. 从上一步分离的不含细胞的上清液中取所需体积至新管中,并加入1倍体积的ECOTOP尿液外泌体提取试剂。如1ml上清尿液加入1ml尿液外泌体提取试剂。 2. 通过倒置离心管、涡旋或上下移液直到溶液均匀,充分混合尿液/试剂混合物。。 3. 将混匀好的样品室温孵育1小时。 4. 孵育完成后,在2-8℃条件下10000×g离心1小时。 5. 完成离心后,吸走并丢弃上清液,外泌体即包含在试管底部的沉淀中(大多数情况下是不可见的)。 注:重要!如果在离心过程中使用固定角转子,则外泌体会沿着转子中试管的外表面内侧分布。 6. 加入合适体积的1×PBS或其他类似缓冲液重悬沉淀。具体见下表: 开始实验时所使用的尿液体积 重悬所需缓冲液体积 1ml 20-50μl 5ml 100-300μl 7. 当沉淀重新悬浮之后,所得的外泌体即可进行下游分析或通过亲和层析进一步纯化。提纯后的外泌体可在2-8℃中保存1周或在小于-20℃中长期保存。 【注意事项】 1. 尿液上清分离后尽快进行外泌体分离,保存在 4℃和-80℃,都会对产量有一定的影响。 2. 分离外泌体可用于细胞功能研究或根据后续研究加入相应 Trizol或蛋白裂解液抽提 RNA或蛋白质或 1:100 PBS稀释行粒径检测; 3. 本品仅限用于科研实验。

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