1×STET Buffer，pH8.0

【保存条件】 干粉及溶解液4℃避光保存，有效期12个月；制成溶液后-20℃分装保存，有效期半年。 【概述】 10%PAGE胶凝固剂即为10%APS，常用于PAGE胶的配制，建议现用现溶。4℃下可保存一周，其在室温下不稳定，不建议长期放置于室温。-20℃分装保存可最大限度保证后续产品使用效果。 【使用建议】 每管干粉加入1ml溶解液，吹打混匀，将干粉溶解成10%（w/v)溶液即可。 制成溶液后须-20℃避光保存，有效期约半年；4℃下可保存一周，建议现用现溶。 【注意事项】 1. PAGE胶凝聚的速度与温度及光照关系密切，可通过适当调节APS的用量，控制在不同的环境下凝胶凝聚的速度。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

伊文思蓝染色液（0.5%）使用说明书【包装规格】产品编号产品名称包装ES-8435Evans Blue Stain Solution 0.5%100ml/500ml 使用说明书1份【保存条件】室温保存，有效期1年【概述】伊文思蓝(Evans Blue)又称偶氮蓝，分子式C34H24N6Na4O14S4，分子量为960.80，CAS号为314-13-6。伊文思蓝属于一种常用的偶氮染料制剂，因其分子量大小和血浆白蛋白相近，而且在血液中和血浆白蛋白有很高的亲和力，因此在神经科学研究中常被用于示踪观察血脑屏障(BBB)的完整性，也用于细胞染色区分活细胞、死细胞，亦可测定血容量。伊文思蓝和台盼蓝都是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性和细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。伊文思蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量，其中0.5%为最常用的浓度。活细胞因有外排功能而无法被伊文思蓝染色，因此可以通过此方法在显微镜下区分死细胞和活细胞，但无法区分死亡和坏死。【使用建议】(一)血脑屏障通透性1. 取处理后的实验动物(以小鼠为例)，静脉注射Evans Blue Stain Solution(0.5%)数秒至1分钟，小鼠眼睛、皮肤出现蓝色。0.5～1h后处死小鼠，取目的脑组织。2. 脑组织置于1.5ml离心管中，加入1ml PBS， 迅速用组织匀浆器将脑组织制成匀浆，离心。3. 取上清，加入等量三氯乙酸，4℃孵育18～24h。该步骤亦可采用如下操作: 取上清，按上清:丙酮=3:7比例加入丙酮，室温孵育24h。4. 1000g离心20～30 min或2000g离心15min。5. 取上述溶液1～2ml，用分光光度计测620 nm处吸光值(OD值)。同时测定已知不同梯度的标准依文思蓝的OD值，绘制标准曲线。根据标准曲线计算出待测待测样品的依文思蓝含量。 (二)活细胞染色1、取100μl重悬细胞到常规1.5ml或0.5ml离心管内，加入100μl 伊文思蓝染液轻轻混匀，染色3min(染色时间可适当延长，但不宜超过10min)。2、吸取少量经过染色后的细胞，用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量，每个细胞样品至少数500个细胞，数出蓝色细胞和细胞总数。细胞存活率计算公式如下: 细胞存活率＝(细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数×100%【注意事项】1. 伊文思蓝对人体有轻微毒性，请小心防护。2. 细胞染色时，注意凋亡小体偶尔也有拒染现象。3. 血脑屏障通透性实验中，伊文思蓝染色液注射量应根据不同动物以及动物的重量调整。4. 最好采用低温冷冻离心机进行离心。5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 4℃保存，有效期1年；-20℃保存，有效期2年 【概述】 Polybrene (聚凝胺)，也称Hexadimethrine Bromide (海美溴铵)，是一种聚溴化季铵阳离子，可显著提高慢病毒、腺病毒等病毒对某些细胞的感染效率，其原理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥从而促进吸附作用。另外，Polybrene也可用于哺乳动物细胞的转染、增强脂质体的转染效率。 该产品为超纯水配制并经0.22μm滤膜过滤除菌处理，可直接使用。 【使用建议-病毒助感染】 1. 推荐工作浓度：Polybrene最佳终浓度因不同细胞株而异，通常范围在2~10μg/ml，最常用的浓度为5~8μg/ml。可以通过查阅相关文献或者预实验来摸索。2.使用方法：Day1：按实验需要将细胞铺板(比如12孔板)。细胞数以第2天密度约50%为宜。37℃培养过夜。Day2：病毒感染前，从-80℃冰箱取出病毒后冰浴融化，参考相关文献或者根据预实验得到的MOI值用新鲜完全培养基将病毒稀释成所需浓度，并加入适量Polybrene，轻轻混匀。吸除细胞原有培养基，将病毒液+培养基+Polybrene加入细胞中，轻轻摇匀。37℃继续培养。Day4：吸除含病毒的培养基，换为新鲜的培养基。此时可以加入相应抗生素进行筛选。Day5-6：根据需要收集细胞检测目的蛋白的表达。 【注意事项】 1. 为避免反复冻融，收到本产品或本产品配制成溶液后建议适当分装后-20℃保存。 2. 本产品仅可用于科研实验，不可用作药品、食品等方面。 3. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

Sodium Chloride Solution, 5mol/L，Sterilize

Sodium Chloride Solution, 1mol/L，Sterilize

2M氯化镁溶液使用说明书【包装规格】产品编号产品名称包装ES-8361Magnesium Chloride Solution, 2mol/L100ml/500ml 使用说明书1份【保存条件】室温保存，有效期1年【概述】2M氯化镁溶液由六水氯化锰镁和去离子水组成，该溶液经高温高压灭菌处理，可直接用于溶液的配制和细胞培养等方面。【注意事项】1. 仅限于科研使用，不可用于各种食品药品或临床治疗中。2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

Potassium Chloride Solution, 3mol/L

Calcium Chloride Solution, 1mol/L, Sterilize

【保存条件】 室温保存，有效期2年 【概述】 柠檬酸-柠檬酸钠抗原修复液是一种最常用的抗原修复液，可以用于多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的石蜡切片、冰冻切片的抗原修复。 细胞或组织多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致蛋白之间的交联，遮蔽了样品的抗原位点，导致免疫染色时 染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果，这就需要对组织进行抗原修复。 通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色 效果，对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善，特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可以考虑尝试进 行抗原修复。从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗 原修复都会有效去除蛋白之间的交联，充分暴露抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。 本产品特别适用于石蜡切片，也可以用于冰冻切片。 【使用建议】 实验前准备： 本产品为干粉，使用时用蒸馏水或去离子水溶解，定容至1L，如需必要，可使用盐酸调pH值至6.0。 抗原修复： 1. 高压蒸汽法 a. 抗原修复：压力锅中加入足以淹没切片的抗原修复液，加热至沸腾。 b. 将脱蜡至水的切片置染色架上，放入锅中，盖好锅盖，扣上压力阀加压，设置保压4 min。 c. 压力下降后打开锅盖，放置室温冷却，待溶液冷却至室温后取出切片。 d. PBS或TBS洗涤3次，每次5 min，随后即可进行后续的免疫染色步骤。 2. 蒸煮锅法 a. 将置于染色架上的切片放于抗原修复液中，95~100°C加热10~20 min。 b. 冷却至室温后取出，PBS或TBS洗涤3次，每次5 min，随后即可进行后续的免疫染色步骤。 3. 微波法 a. 向微波炉专用容器中加入抗原修复液，加热至沸腾。 b. 将脱蜡至水的切片置染色架上，放于容器中，煮沸10~20 min。 c. 冷却至室温后取出，PBS或TBS洗涤3次，每次5 min，随后即可进行后续的免疫染色步骤。 4. 对于其他切片 对于其它样品的抗原修复，可以参考石蜡切片的步骤进行。 【注意事项】 1. 抗原修复的时间为建议时间，请根据不同的样品、抗体和抗原自行摸索。 2. 抗原修复后，待溶液冷却至室温后再取出切片，使抗原表位在经历高温后复原。 3. 抗原修复液的加入量要足以淹没切片几厘米，防止在煮沸过程中切片变干。 4. 抗原修复过程需使用耐热染色架进行操作。 5. 试剂有潮解性，若有潮解请放心使用。 6. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。