ECOTOP货号:ES-8318-500ml(货期:现货)售价:¥180.00
Tris抗原修复液(10×,pH10.0)-500ml
【保存条件】 4ºC保存,有效期一年 【概述】 Tris抗原修复液是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。 细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。 本抗原修复液采用了广泛使用的Tris,可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。 【操作方法】 1. 对于石蜡切片: a. 脱蜡:二甲苯3次,每次3-5min→ 无水乙醇2次,每次3-5min→ 95%乙醇1次,3-5min→ 90%乙醇1次,3-5min→ 75%乙醇1次,3-5min→ 蒸馏水洗2次,每次3-5min。 b. 抗原修复: ① 用去离子水稀释Tris抗原修复液(10×,pH10.0)至1×,例如10ml本抗原修复液(10×)加入90ml去离子水,混合均匀,即得100ml 1×抗原修复液; ② 将切片浸泡在抗原修复液(1×)中;95-100℃加热约 15 min (加热时间可以控制在10-20 min,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。 随后大约在20-30 min 内冷却至室温。 ③ 用免疫染色洗涤液洗涤 1-2次,每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 2. 对于冰冻切片: ① 用去离子水稀释Tris抗原修复液(10×,pH10.0)至1×,例如10ml本抗原修复液(10×)加入90ml去离子水,混合均匀,即得100ml 1×抗原修复液; ② 用免疫染色洗涤液洗涤切片5min; ③ 将切片浸泡在抗原修复液 (1×)中,95-100℃加热约15 min (加热时间可以控制在10-20 min内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 min 内冷却至室温。 ④ 用免疫染色洗涤液洗涤1-2 次,每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 3. 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 用后请及时拧紧瓶盖,以防挥发。