【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 Tris-HCl缓冲液用途广泛，常见于各种分子生物学实验或相关试剂配制。该产品在25℃时pH为6.8。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用，不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 温度变化对Tris-HCl缓冲液影响较大，温度每升高1℃，pH值降低约0.03，反之同理。

10×Tris-buffered saline (TBS) powder,1L×10packs

FasRun Acrylamide Kit（10%）

【保存条件】 -20℃保存，有效期1年 【使用建议（仅供参考）】 1. 准备溶液：室温融解试剂盒中的三种试剂，溶解后立即放置在冰上，混匀。取适当量的细胞浆蛋白抽提试剂CE I/II及细胞核蛋白抽提试剂 NE备用，在使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂混合物及PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM（现配现用）。 A: 对于贴壁细胞：用PBS洗一遍，用细胞刮子刮下细胞，或用EDTA溶液处理细胞使细胞不再贴壁很紧，并用移液器吹打下细胞。离心收集细胞，尽最大努力吸尽上清，留下细胞沉淀备用。（注：尽量避免用胰酶消化细胞，以免胰酶降解需抽提的目的蛋白。） B: 对于悬浮细胞：用预冷的PBS清洗一遍，离心收集细胞，尽最大努力吸尽上清，留下细胞沉淀备用。 2. 每20µL细胞沉淀加入200µL添加了PMSF和蛋白酶抑制剂的细胞浆蛋白抽提试剂CE I。（对于200万HeLa细胞，其细胞沉淀的体积大约为20µL或40mg。) 3. 最高速剧烈涡旋5-10秒，把细胞沉淀完全悬浮并分散开。(如果细胞沉淀没有完全悬浮并分散开，可以适当延长涡旋时间。) 4. 冰浴10-15分钟。（过程中可适当涡旋2-3次） 5. 加入细胞浆蛋白抽提试剂CE II 10µL。最高速剧烈涡旋5秒，冰浴1分钟。 6. 4℃下12,000-16,000g转速离心5分钟。 7. 立即吸取上清至一预冷的塑料管中，即为抽提得到的细胞浆蛋白。可以立即使用，也可以冻存。(千万不要触及沉淀，可以在沉淀上方保留极小体积的上清，以免触及沉淀。每200万细胞用200µL本产品中的细胞浆蛋白抽提试剂CE I裂解后可获得的上清，其细胞浆蛋白浓度约为2-5mg/ml，不同细胞有所不同。) 8. 对于沉淀，完全吸尽残余的上清后，加入50µL添加了PMSF的细胞核蛋白抽提试剂NE。(不吸尽上清会带来细胞浆蛋白的污染。若无法吸尽可使用PBS重悬高速离心后再吸弃上清进行裂解操作。) 9. 将沉淀重悬并在冰上孵育10分钟（过程中可适当涡旋3-5次）。 10. 4℃下12,000-16,000g转速离心10分钟。 12. 立即吸取上清至一预冷的塑料管中，即为抽提得到的细胞核蛋白。可以立即使用，也可以-80℃冻存。每200万细胞用50µL本产品中的细胞核蛋白抽提试剂裂解后获得的上清，其细胞核蛋白浓度约为1.2-3.0mg/ml，不同细胞有所不同。 另：新鲜组织细胞核与细胞质蛋白提取 ①　把组织尽可能切成非常细小的碎片。按照20:1的比例混合适当量的细胞浆蛋白抽提试剂CE I和CE II(例如200µL细胞浆蛋白抽提试剂CE I中加入10µL抽提试剂CEII)。并加入PMSF至最终浓度为1mM配制成组织匀浆液。按照每60mg组织加入200µL组织匀浆液的比例混合组织和组织匀浆液(对于不超过30mg的组织样品，仅需加入100µL组织匀浆液)，并在玻璃匀浆器内充分匀浆。匀浆需在冰浴或4℃进行。 ②　匀浆后把匀浆液转移到塑料离心管内，冰浴放置15分钟。 ③　4℃条件下1,500g离心5分钟。把上清转移至一预冷的塑料管中，为抽提得到的部分细胞浆蛋白。(吸上清时千万不要触及沉淀。) ④　对于沉淀，到了这一步已经充分匀浆，但很多细胞还没有破碎。接下去按照上一个细胞核质蛋白使用说明的步骤3开始操作，即把沉淀当做已经离心收集好的细胞沉淀操作，按照步骤3至步骤12抽提得到细胞浆蛋白和细胞核蛋白(特别说明:对于起始量为30-60mg的组织样品，后续直接按照步骤3-12操作即可;对于起始量不超过30mg的组织样品，后续步骤3-12中的溶液的用量须减半使用)。抽提得到的细胞浆蛋白可以和步骤13中抽提得到的细胞浆蛋白合并。新鲜的肝脏组织用本产品裂解后获得的上清，其细胞浆蛋白浓度约为3-10mg/ml，细胞核蛋白浓度约为3-10mg/ml，不同状态的不同组织有所不同。 【注意事项】 1. PMSF及蛋白酶抑制剂现配现用，配好后不能长时间储存。 2. 尽量减少反复冻融的次数，以免效率下降。

【保存条件】 室温（15-30℃）保存一年 【概述】 RNA holder是一种无毒的可直接使用的样品储存液，能迅速稳定组织，保护非冷冻细胞RNA于原位。可以快速可靠地保存动物组织、细胞内的RNA。组织获取后立即浸入RNA holder保存液中，在室温可以保存7天，4℃可以保存4周，-20℃、-80℃标本可以长期保存，RNA稳定存在不降解，取出后用各类方法抽提可以获得高质量的RNA。 【操作方法】 1. 根据要保存的各样本的体积，计算出所需 RNA holder用量。RNA holder的用量应当是组织体积的 10 倍（如 100mg 组织约用 1ml RNA holder）；离心收集 2×106细胞 RNA holder的用量是1ml。 2. 将 RNA holder按需要量分装入自备保存管中； 3. 快速将较大的组织切成任何一边最大厚度不大于0.5cm大小，然后将组织碎块放入到10倍体积的RNA holder中保存。注：组织过厚则RNA holder不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。 4. 保存时先将样本浸入RNA holder后置4℃冰箱过夜（使RNA holder完全渗入到组织中），然后转移至-20℃冰箱（RNA holder在-20℃仍为液态，有结晶析出为正常情况），或者过夜取出后直接转移至-80℃，可反复冻融20次不影响RNA质量。 【注意事项】 1. 组织和细胞取材要快速，防止RNA降解。冰冻组织不能用RNA holder保存，因其不能有效渗入冰冻组织中。 2. 保存样品的提取：组织样本从-20℃或-80℃取出后，复苏到室温后，取出组织块置于RNA提取液（如Trizol）中再行提取。细胞样本复温后低速离心收集细胞，去除RNA holder后，再加入RNA提取液提取RNA（细胞样本可直接在RNA holder中提取，需向混合物中加入10倍体积提取液如Trizol）。后续若需匀浆处理可直接在室温进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNA holder不影响后续提取质量。