【保存条件】 室温保存，有效期2年；配成溶液后不宜超过一个月，如若污染，请重新配置新溶液。 【概述】 5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液是用于蛋白变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验（SDS-PAGE）中的缓冲试剂。本产品为粉剂，请配成溶液使用。 【组分浓度】 125mM Tris, 1.25M Glycine, 0.5%（W/V）SDS 【使用建议】 1. 取一包可以配制1升SDS-PAGE电泳液的粉剂，倒入到一洁净的烧杯中，加入蒸馏水到约900毫升，溶解。然后在量筒中定容到1升。混匀后即为5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液。 2. 使用前请取100ml 5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液加入400ml蒸馏水或去离子水（5倍稀释），混匀后即为1×工作液，可直接使用。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 回收的电泳液可以作为外槽电泳液重复使用1-2次，但为了取得最佳的电泳效果，应使用没有使用过的电泳液。 3. 本电泳液含有SDS，适用于变性胶蛋白电泳。对于非变性蛋白电泳，推荐使用非变性PAGE电泳液。

【保存条件】 室温保存，有效期2年；配成溶液后不宜超过一个月，如若污染，请重新配置新溶液。 【概述】 5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液是用于蛋白变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验（SDS-PAGE）中的缓冲试剂。本产品为粉剂，请配成溶液使用。 【组分浓度】 125mM Tris, 1.25M Glycine, 0.5%（W/V）SDS 【使用建议】 1. 取一包可以配制1升SDS-PAGE电泳液的粉剂，倒入到一洁净的烧杯中，加入蒸馏水到约900毫升，溶解。然后在量筒中定容到1升。混匀后即为5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液。 2. 使用前请取100ml 5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液加入400ml蒸馏水或去离子水（5倍稀释），混匀后即为1×工作液，可直接使用。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 回收的电泳液可以作为外槽电泳液重复使用1-2次，但为了取得最佳的电泳效果，应使用没有使用过的电泳液。 3. 本电泳液含有SDS，适用于变性胶蛋白电泳。对于非变性蛋白电泳，推荐使用非变性PAGE电泳液。

【保存条件】 室温保存，有效期2年；配成溶液后不宜超过一个月，如若污染，请重新配置新溶液。 【概述】 5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液是用于蛋白变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验（SDS-PAGE）中的缓冲试剂。本产品为粉剂，请配成溶液使用。 【组分浓度】 125mM Tris, 1.25M Glycine, 0.5%（W/V）SDS 【使用建议】 1. 取一包可以配制1升SDS-PAGE电泳液的粉剂，倒入到一洁净的烧杯中，加入蒸馏水到约900毫升，溶解。然后在量筒中定容到1升。混匀后即为5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液。 2. 使用前请取100ml 5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液加入400ml蒸馏水或去离子水（5倍稀释），混匀后即为1×工作液，可直接使用。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 回收的电泳液可以作为外槽电泳液重复使用1-2次，但为了取得最佳的电泳效果，应使用没有使用过的电泳液。 3. 本电泳液含有SDS，适用于变性胶蛋白电泳。对于非变性蛋白电泳，推荐使用非变性PAGE电泳液。

【保存条件】 室温保存，有效期2年；配成溶液后不宜超过一个月，如若污染，请重新配置新溶液。 【概述】 1×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液是用于蛋白变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验（SDS-PAGE）中的缓冲试剂。本产品为粉剂，请配成溶液使用。 【组分浓度】 25mM Tris, 250mM Glycine, 0.1%（W/V）SDS 【使用建议】 取一包可以配制1升SDS-PAGE电泳液的粉剂，倒入到一洁净的烧杯中，加入蒸馏水到约900毫升，溶解。然后在量筒中定容到1升。混匀后即可使用。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 回收的电泳液可以作为外槽电泳液重复使用1-2次，但为了取得最佳的电泳效果，应使用没有使用过的电泳液。 3. 本电泳液含有SDS，适用于变性胶蛋白电泳。对于非变性蛋白电泳，推荐使用非变性PAGE电泳液。

【保存条件】 室温保存，有效期2年；配成溶液后不宜超过一个月，如若污染，请重新配置新溶液。 【概述】 1×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液是用于蛋白变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验（SDS-PAGE）中的缓冲试剂。本产品为粉剂，请配成溶液使用。 【组分浓度】 25mM Tris, 250mM Glycine, 0.1%（W/V）SDS 【使用建议】 取一包可以配制1升SDS-PAGE电泳液的粉剂，倒入到一洁净的烧杯中，加入蒸馏水到约900毫升，溶解。然后在量筒中定容到1升。混匀后即可使用。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 回收的电泳液可以作为外槽电泳液重复使用1-2次，但为了取得最佳的电泳效果，应使用没有使用过的电泳液。 3. 本电泳液含有SDS，适用于变性胶蛋白电泳。对于非变性蛋白电泳，推荐使用非变性PAGE电泳液。

【保存条件】 室温保存，有效期2年；配成溶液后不宜超过一个月，如若污染，请重新配置新溶液。 【概述】 1×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液是用于蛋白变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验（SDS-PAGE）中的缓冲试剂。本产品为粉剂，请配成溶液使用。 【组分浓度】 25mM Tris, 250mM Glycine, 0.1%（W/V）SDS 【使用建议】 取一包可以配制1升SDS-PAGE电泳液的粉剂，倒入到一洁净的烧杯中，加入蒸馏水到约900毫升，溶解。然后在量筒中定容到1升。混匀后即可使用。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 回收的电泳液可以作为外槽电泳液重复使用1-2次，但为了取得最佳的电泳效果，应使用没有使用过的电泳液。 3. 本电泳液含有SDS，适用于变性胶蛋白电泳。对于非变性蛋白电泳，推荐使用非变性PAGE电泳液。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 10×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液是用于蛋白变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验（SDS-PAGE）中的缓冲试剂。本产品按常规方法配制而成，为10×浓缩液，便于储存、操作简便。 【组分浓度】 0.25M Tris, 1.92M glycine, 1% SDS 【使用建议】 本产品为10×浓缩液，临用前按下述步骤稀释： 取100ml 10×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液加入900ml蒸馏水或去离子水（10倍稀释），混匀后即可使用。 【注意事项】 1. 本产品为高倍浓缩液，环境温度较低时可能会有结晶析出，可加热助溶，待溶解完全后再进行稀释使用；密封保存，防止污染。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20℃保存，有效期1年 【概述】 5×非变性蛋白上样缓冲液中不含SDS及DTT或者β-巯基乙醇，适合于常规的非变性PAGE 蛋白样品的电泳。内含溴酚蓝作为电泳进度追踪染料。 【使用建议】 1. 室温解冻5×非变性蛋白上样缓冲液。 2. 请按每40μl蛋白样品加入10μl上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。 3. 混匀后直接上样电泳。 4. 通常电泳时蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，pH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。

2×SDS-PAGE单色蛋白上样缓冲液（DTT）使用说明书 【包装规格】 产品编号 产品名称 包装 ES-8154 SDS-PAGE Loading buffer,2×(with DTT) 10ml/100ml 使用说明书 1份 【保存条件】 建议分装冻存，避免反复冻融，-20℃，有效期1年 【概述】 2×SDS-PAGE单色蛋白上样缓冲液可保护蛋白质在样品制备步骤中免受热降解，并在SDS-PAGE运行期间防止pH值变化。一些蛋白质对在Tris缓冲液中电泳期间温度波动引起的pH变化敏感，优化后的上样缓冲液组分可防止在SDS-PAGE电泳之前的样品加热过程中以及电泳过程中蛋白质降解。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。 溴酚蓝作为指示剂，用于追踪电泳进度。 【使用建议】 1. 室温或37℃水浴解冻2×SDS-PAGE单色蛋白上样缓冲液。 2. 请按每10μl蛋白样品加入10μl上样缓冲液的比例(两倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。 3. 混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。 4. 冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。 【注意事项】 1. DTT对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。 4. 聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右， 胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 SDS细胞裂解液是一种较为强烈的细胞组织裂解液，可用于动物、植物的细胞或组织样品，也可以用于真菌或细菌样品。SDS裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的PAGE、Western和ELISA等。 【使用建议】 1. 对于培养细胞样品：a.取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM，或者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。b.对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触动物细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。植物细胞宜在冰上裂解2-10min。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。对于悬浮细胞：离心收集细胞，轻轻涡旋或者弹击管底以把细胞尽量分散开。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。对于细菌或酵母：对于1ml菌液或酵母液，离心去上清，如果有必要可以使用PBS洗涤一次，充分去除液体后，轻轻涡旋或者弹击管底以把细菌或酵母尽量弹散。加入100-200μl裂解液，轻轻涡旋或者弹击管底以混匀，冰上裂解2-10min。如果希望获得更好的裂解效果，细菌和酵母可以分别使用溶菌酶和破壁酶(Lyticase)消化，然后再使用本裂解液进行裂解。裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞或者1ml的菌液或酵母液中的细菌和酵母量加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。每100万动物细胞用100μl本产品裂解后获得的上清，其蛋白浓度约为2-4mg/ml，不同细胞有所不同。c.充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和ChIP等操作。2.对于组织样品：a.把组织剪切成细小的碎片。b.融解SDS裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM，或者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。c.按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)d.用玻璃匀浆器匀浆，或使用组织研磨仪研磨，直至充分裂解。也可以把组织样品冷冻后液氮研磨，研磨充分后加入裂解液进行裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。e.充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和ChIP等操作。每20mg冻存的小鼠肝脏组织用200μl本裂解液裂解后获得的上清，其蛋白浓度约为15-25mg/ml，不同状态的不同组织有所不同。f.如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈涡旋使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器或研磨设备，缺点是不如匀浆或研磨那样裂解得比较充分。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 本产品长时间低温存放可能会出现沉淀，可在37ºC水浴约10分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解混匀后即可正常使用。 3. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。 4. 该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。