【保存条件及效期】 4℃保存，有效期1年 【用途】 本产品适用于从细胞培养液等无细胞生物样品中浓缩慢病毒，可浓缩10-100倍。 【使用方法】 1. 将10cm培养皿的上清液收集到15ml无菌离心管中，低速离心弃细胞沉淀吸取上清液（注：避免上清液中漂浮的部分细胞影响）。 2. 小心地将上清液转移到新的50 ml无菌离心管中。 3. 在3体积的上清液中加入1体积的病毒浓缩液（注：浓缩液使用前需用无菌0.45µm滤膜过滤除菌），如30ml细胞上清液加入10ml病毒浓缩液。 4. 振动60秒以充分混匀（病毒浓缩液较粘稠，一定留意充分混匀），然后在4℃环境以60转/分钟左右的恒速摇动孵育至少4小时 （过夜4℃摇动孵育效果更好）。 5. 将管取出，于4℃以1600×g转速离心60分钟。 6. 小心除去上清液，不要干扰沉淀(注：沉淀的多少并不一定代表病毒数量，沉淀更多的是细胞培养基中的血清蛋白及部分基因组DNA。若沉淀量不明显，则残留少量液体后再重悬)。 7. 将病毒沉淀完全重悬于原来体积的1/10~1/20或所需的培养基（无血清和抗生素）中，轻轻上下吹打混匀。 8. 分装并储存在-80 ℃直到使用。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 本品经0.45μm滤膜过滤处理，但并非为无菌产品。

【保存条件】 4℃保存，有效期6个月；-20℃保存，有效期1年 【概述】 本品是通用型电转染过程中的缓冲液，可用于 DNA、siRNA及蛋白等细胞转染，可显 著提高细胞转染效率及细胞存活率， 适用于常见各种细胞类型，与所有电转仪器兼容。 【使用建议（仅供参考） 】 1. 收集细胞（细胞应处于对数生长期）：用胰酶消化细胞，将细胞培养液吸入到15ml离心管中，1000rpm离心约 5min，弃上清。 2. 用不含血清的培养液洗涤一次，弃上清。 3. 取2- 10μg质粒加入到100μl电转缓冲液中，充分混匀。 4. 用100μl混有质粒的电转缓冲液充分溶解细胞，转入 0.2cm电转导入杯中。（每 5×105个细胞使用约 20μl电转缓冲液） 5. 将电转导入杯放入样品槽中，释放电脉冲，电击参数按电容1000µF，电压150-500V ，间隔20V取值，取得最佳效果。（具体方案依照使用仪器设备及不同细胞的要求为准） 6. 立即取出电击杯，分别用一次性吸管将混和液转移至加有完全培养基的一次性细胞培养瓶中，放入细胞培养箱中培养。 【注意事项】 1. 注意无菌操作，尽量避免污染。 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作

【保存条件】 4℃保存，有效期6个月；-20℃保存，有效期1年 【概述】 本品是通用型电转染过程中的缓冲液，可用于 DNA、siRNA及蛋白等细胞转染，可显 著提高细胞转染效率及细胞存活率， 适用于常见各种细胞类型，与所有电转仪器兼容。 【使用建议（仅供参考） 】 1. 收集细胞（细胞应处于对数生长期）：用胰酶消化细胞，将细胞培养液吸入到15ml离心管中，1000rpm离心约 5min，弃上清。 2. 用不含血清的培养液洗涤一次，弃上清。 3. 取2- 10μg质粒加入到100μl电转缓冲液中，充分混匀。 4. 用100μl混有质粒的电转缓冲液充分溶解细胞，转入 0.2cm电转导入杯中。（每 5×105个细胞使用约 20μl电转缓冲液） 5. 将电转导入杯放入样品槽中，释放电脉冲，电击参数按电容1000µF，电压150-500V ，间隔20V取值，取得最佳效果。（具体方案依照使用仪器设备及不同细胞的要求为准） 6. 立即取出电击杯，分别用一次性吸管将混和液转移至加有完全培养基的一次性细胞培养瓶中，放入细胞培养箱中培养。 【注意事项】 1. 注意无菌操作，尽量避免污染。 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 SuperBlot蛋白电泳快速转膜液是一种改良的Towbin经典缓冲液，这种专有的配方大大提高了转移速度，而不会产生过多的热量而影响蛋白质。能高效快速地将蛋白转移到印迹膜(PVDF 或硝纤膜)上。可不使用醇类，能在15-30分钟内完成转膜过程。 【操作方法】 1. 使用前用去离子水将10×SuperBlot蛋白电泳快速转膜液稀释至1×工作液，例如将100ml 10×SuperBlot蛋白电泳快速转膜液加入900ml去离子水中混匀。（如分子量大于130KD，可以添加100ml乙醇，如取100ml 10×SuperBlot蛋白电泳快速转膜液加入800ml去离子水与100ml 乙醇混匀备用） 2. 做好转印三明治结构，然后转移至电泳槽中，设定恒流400 mA，大约时间15-30分钟完成蛋白转膜。 胶浓度 6% 8% 10% 12% 推荐转膜时长 15分钟 20分钟 30分钟 35分钟 【注意事项】 1. PVDF膜需提前使用甲醇浸泡30秒以上。 2. 转印电流建议设定恒流400mA, 一般25-30分钟可以将150kD以下蛋白完全转印;小于100kD蛋白20分钟即可完全转印;对于大于150kD蛋白，建议延长5-10分钟。 3. 凝胶的浓度影响转印的效率，对于胶浓度8%,20分钟即可完成转印;对于胶浓度10%,25-30分钟即可完成转印;对于胶浓度大于 10%,建议延长5-10分钟 4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5×FastBlot Transfer Buffer

【保存条件】 室温保存，有效期36个月 【概述】 可以代替氯仿使用，并且毒性较小。在单步TRI试剂方法中使用可以减少DNA污染RNA的可能性，本品不会对分离的RNA的质量或数量产生不利影响。 【操作方法】 1. 请按每使用1ml TRI试剂（Trizol试剂或RNAEx ZOL总RNA提取试剂）加入200μl比例来使用（等同RNA提取中氯仿的使用）。 【注意事项】 1. 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用，以免污染。 2. RNAEx ZOL总RNA提取试剂（货号：EK-5301）可在ECOTOP各平台咨询购买。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期36个月 【概述】 可以代替氯仿使用，并且毒性较小。在单步TRI试剂方法中使用可以减少DNA污染RNA的可能性，本品不会对分离的RNA的质量或数量产生不利影响。 【操作方法】 1. 请按每使用1ml TRI试剂（Trizol试剂或RNAEx ZOL总RNA提取试剂）加入200μl比例来使用（等同RNA提取中氯仿的使用）。 【注意事项】 1. 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用，以免污染。 2. RNAEx ZOL总RNA提取试剂（货号：EK-5301）可在ECOTOP各平台咨询购买。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20℃保存一年 【概述】 RNA Chill RNase灭活试剂(25×)设计用于代替DEPC用于分子生物学试剂，可用于与DEPC不兼容的溶液（例如Tris或MOPS缓冲液）、不能高压灭菌的溶液以及酶促反应中的无酶处理。 当酶学实验中试剂用RNA Chill RNase灭活试剂(25×)处理时，未观察到以下各类酶促反应受到抑制（包括但不限于）：T7、T3和SP6 RNA聚合酶，体外转录； MMLV和AMV，逆转录（42°C）；PCR实验的Taq酶。 【操作方法】 1. 在待处理的缓冲液或溶液中将RNA Chill RNase灭活试剂(25×)稀释至终浓度1×(如10ml待处理溶液中加入RNA Chill(25×) 0.4ml)，并充分混合。 2. 将混合物在60°C下孵育10-20分钟，然后冷却至室温。然后缓冲液/溶液即可用于RNA分离和分析。处理过的溶液可以在室温、4°C或–20°C下储存直至使用。 3. 为消除初始处理后可能出现的任何RNase污染，可将重复使用后的处理过的溶液重新加热至60°C 10-20 分钟。 【注意事项】 1. RNA Chill RNase灭活试剂(25×)在高于45°C时具有活性，但高于此温度孵育的反应中可能会使某些酶失活。 因此，在加入某些酶之前用RNA Chill(25×)试剂处理反应缓冲液(Taq酶等耐高温酶除外)。 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20℃保存一年 【概述】 RNA Chill RNase灭活试剂(25×)设计用于代替DEPC用于分子生物学试剂，可用于与DEPC不兼容的溶液（例如Tris或MOPS缓冲液）、不能高压灭菌的溶液以及酶促反应中的无酶处理。 当酶学实验中试剂用RNA Chill RNase灭活试剂(25×)处理时，未观察到以下各类酶促反应受到抑制（包括但不限于）：T7、T3和SP6 RNA聚合酶，体外转录； MMLV和AMV，逆转录（42°C）；PCR实验的Taq酶。 【操作方法】 1. 在待处理的缓冲液或溶液中将RNA Chill RNase灭活试剂(25×)稀释至终浓度1×(如10ml待处理溶液中加入RNA Chill(25×) 0.4ml)，并充分混合。 2. 将混合物在60°C下孵育10-20分钟，然后冷却至室温。然后缓冲液/溶液即可用于RNA分离和分析。处理过的溶液可以在室温、4°C或–20°C下储存直至使用。 3. 为消除初始处理后可能出现的任何RNase污染，可将重复使用后的处理过的溶液重新加热至60°C 10-20 分钟。 【注意事项】 1. RNA Chill RNase灭活试剂(25×)在高于45°C时具有活性，但高于此温度孵育的反应中可能会使某些酶失活。 因此，在加入某些酶之前用RNA Chill(25×)试剂处理反应缓冲液(Taq酶等耐高温酶除外)。 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20℃保存，有效期2年 【概述】 0.25%胰酶细胞消化液(不含EDTA，不含酚红)含0.25%胰酶和细胞培养缓冲液，pH值为7.2-7.8。该消化液经过过滤除菌，可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的消化。 【使用建议（仅供参考）】 1. 贴壁细胞的消化：a.吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。b.加入少量0.25%胰酶细胞消化液(不含EDTA，不含酚红)，略盖过细胞即可，室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。c.显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。d.如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。2. 组织的消化：a.不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。 【注意事项】 1. 胰酶消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。 2. 注意无菌操作，尽量避免污染。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。