ECOTOP常用生化试剂货号:ES-8246-1ml(货期:现货)售价:¥500.00
DAPI溶液(1mg/ml)
【保存条件】 -20℃避光保存,至少1年有效期。 【进口原料】 ROCHE REF10236276001, LOT53197821(不同批次产品原料批次会有更新) 【概述】 DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)是一种能够与DNA中大部分A、T碱基相互结合的荧光染料,常用于荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当DAPI与双链DNA结合时,最大吸收波长为358nm,最大发射波长为461nm。DAPI的发射光为蓝色,且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠,可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。本产品为DAPI-DMF溶液,浓度为1mg/ml。使用时根据实验不同直接将本产品用相应溶液稀释到工作浓度。用于细胞核染色时,推荐的DAPI工作浓度为0.5-10μg/ml。 【使用方法(仅供参考)】 取适量1mg/ml DAPI染色液加到PBS中,制备成0.5-10μg/ml的DAPI染色液。 1. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的DAPI染色。 2. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。 3. 室温放置5-10分钟。 4. 吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。 5. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。 【注意事项】 1. DAPI被普遍认为具有致癌性,操作时应戴手套,并避免交叉污染。 2. 本产品需避光,并尽量避免反复冻融。 3. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。