【保存条件】 室温保存，有效期2年 【概述】 用于蛋白非变性及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验（SDS-PAGE）中的转膜试剂。本产品为粉剂，请配成溶液使用。 【使用建议】 1. 加入蒸馏水或去离子水定容至1L，混匀后即为1×工作液，可直接使用。。 2. 本产品不含SDS，蛋白分子量较大或者疏水性较强时，为增加转膜效果，可适当添加少量SDS（参考工作浓度为0.025-0.1%）。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 丽春红（Ponceau S）也称猩红，可以用于PVDF膜、硝酸纤维素膜（nitrocellulose membrane）和醋酸纤维素膜（cellulose acetate membrane）上的蛋白的检测。丽春红带负电荷，可以与带正电荷的氨基酸残基结合，同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合，从而形成红色的条带。 丽春红染色的灵敏度不及考马斯亮蓝染色。丽春红对蛋白的染色是可逆的，染色后可以用蒸馏水，PBS或其它适宜的溶液洗去。 本试剂盒使用方便，本底低，灵敏度较高，对蛋白的检测下限是250ng。 【使用建议】 1. 本产品为10×溶液，使用前请用去离子水将溶液稀释至1×备用。如1ml 10×丽春红染色液加入9ml 去离子水稀释。 2. 将PVDF膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜浸没在1×丽春红染色液中，摇动3-5分钟或更长时间，直至出现清晰条带。对结果作适当记录。 3. 用蒸馏水，PBS或其它适当溶液漂洗2-3次，每次3-5分钟，去除丽春红，进行后续的Western检测。 【注意事项】 1. 丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 4℃保存，有效期1年 【概述】 丽春红（Ponceau S）也称猩红，可以用于PVDF膜、硝酸纤维素膜（nitrocellulose membrane）和醋酸纤维素膜（cellulose acetate membrane）上的蛋白的检测。丽春红带负电荷，可以与带正电荷的氨基酸残基结合，同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合，从而形成红色的条带。 丽春红染色的灵敏度不及考马斯亮蓝染色。丽春红对蛋白的染色是可逆的，染色后可以用蒸馏水，PBS或其它适宜的溶液洗去。 本试剂使用方便，本底低，灵敏度较高，对蛋白的检测下限是250ng。 【使用建议】 1. 将PVDF膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜浸没在1×丽春红染色液中，摇动3-5分钟或更长时间，直至出现清晰条带。对结果作适当记录。 2. 用蒸馏水，PBS或其它适当溶液漂洗2-3次，每次3-5分钟，去除丽春红，进行后续的Western检测。 【注意事项】 1. 丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

考马斯亮蓝染色液使用说明书 【包装规格】 产品编号 产品名称 包装 ES-8179 Coomassie Brilliant Blue Staining Solution 100ml/500ml 使用说明书 1份 【保存条件】 常温保存一年 【概述】 考马斯亮蓝染色液(Coomassie Blue Staining Solution)是以考马斯亮蓝R250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳胶的常规染色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。 【使用建议】 常规染色脱色方法： 1. 电泳结束后，取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，确保染色液可以充分覆盖凝胶。 2. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色1小时或更长时间。 注：具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚，温度较低，则染色时间宜适当延长。凝胶较薄，温度较高，则染色时间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近，在染色液中几乎看不清凝胶时，可以认为已染色充分。染色2-4个小时或更长时间不会对最终的染色效果产生负面影响。 3. 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。 4. 加入适量脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶。 5. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色4-24小时。期间更换脱色液2-4次，直至蓝色背景基本上全部被脱去，并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1-2小时后即可出现。 注：脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸，可以使部分染料吸附在吸水纸上，加快脱色。脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。 6. 完成脱色后，可以把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨，可以把胶保存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 脱色液需自行准备。脱色液可选购ECOTOP的考马斯亮蓝染色脱色液（ES-8180）。 3. 本染色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。

40%丙烯酰胺溶液 (37.5:1)使用说明书 【包装规格】 产品编号 产品名称 包装 ES-8178 40% Acr-Bis Solution (37.5:1) 100ml/500ml 使用说明书 1份 【保存条件】 4℃避光保存，有效期1年 【概述】 40% Acr-Bis Solution (37.5:1) 即为含40% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为37.5:1。 40% Acr-Bis Solution (37.5:1) 常用于配制丙烯酰胺凝胶(PAGE胶)，包括SDS-PAGE胶等，可以用于蛋白或核酸的分离。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺（acrylamide，简称Acr）和交联剂甲叉双丙烯酰胺（bisacrylamide，简称Bis）在催化剂的作用下，通过自由基引发聚合反应，形成不带电荷、且具有分子筛性质的网状结构。其孔径大小由聚合链的长度和交联度所决定。 聚合链的长度与丙烯酰胺浓度有关，交联度由Acr与Bis的相对比例决定，调节单体丙烯酰胺与交联剂（Bis）的浓度比例，可形成具有不同交联度的网状聚合物。其中Bis的浓度越低，凝胶的孔径越大，适用于分离较大的分子；Bis的浓度越高，网孔越小，分辨率越高，越有利于分离较小的分子。 【注意事项】 1. 本产品对人体有毒，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

40%丙烯酰胺溶液 (29:1)使用说明书 【包装规格】 产品编号 产品名称 包装 ES-8177 40% Acr-Bis Solution (29:1) 100ml/500ml 使用说明书 1份 【保存条件】 4℃避光保存，有效期1年 【概述】 40% Acr-Bis Solution (29:1) 即为含40% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为29:1。 40% Acr-Bis Solution (29:1) 常用于配制丙烯酰胺凝胶(PAGE胶)，包括SDS-PAGE胶等，可以用于蛋白或核酸的分离。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺（acrylamide，简称Acr）和交联剂甲叉双丙烯酰胺（bisacrylamide，简称Bis）在催化剂的作用下，通过自由基引发聚合反应，形成不带电荷、且具有分子筛性质的网状结构。其孔径大小由聚合链的长度和交联度所决定。 聚合链的长度与丙烯酰胺浓度有关，交联度由Acr与Bis的相对比例决定，调节单体丙烯酰胺与交联剂（Bis）的浓度比例，可形成具有不同交联度的网状聚合物。其中Bis的浓度越低，凝胶的孔径越大，适用于分离较大的分子；Bis的浓度越高，网孔越小，分辨率越高，越有利于分离较小的分子。 【注意事项】 1. 本产品对人体有毒，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

40%丙烯酰胺溶液 (19:1)使用说明书【包装规格】产品编号产品名称包装ES-817640% Acr-Bis Solution (19:1)100ml/500ml 使用说明书1份【保存条件】4℃避光保存，有效期1年【概述】40% Acr-Bis Solution (19:1) 即为含40% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为19:1。40% Acr-Bis Solution (19:1) 常用于配制丙烯酰胺凝胶(PAGE胶)，包括SDS-PAGE胶等，可以用于蛋白或核酸的分离。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺（acrylamide，简称Acr）和交联剂甲叉双丙烯酰胺（bisacrylamide，简称Bis）在催化剂的作用下，通过自由基引发聚合反应，形成不带电荷、且具有分子筛性质的网状结构。其孔径大小由聚合链的长度和交联度所决定。聚合链的长度与丙烯酰胺浓度有关，交联度由Acr与Bis的相对比例决定，调节单体丙烯酰胺与交联剂（Bis）的浓度比例，可形成具有不同交联度的网状聚合物。其中Bis的浓度越低，凝胶的孔径越大，适用于分离较大的分子；Bis的浓度越高，网孔越小，分辨率越高，越有利于分离较小的分子。【注意事项】1. 本产品对人体有毒，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

30%丙烯酰胺溶液 (37.5:1)使用说明书【包装规格】产品编号产品名称包装ES-817430% Acr-Bis Solution (37.5:1)100ml/500ml 使用说明书1份【保存条件】4℃避光保存，有效期1年【概述】30% Acr-Bis Solution (37.5:1) 即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为37.5:1。30% Acr-Bis Solution (37.5:1) 常用于配制丙烯酰胺凝胶(PAGE胶)，包括SDS-PAGE胶等，可以用于蛋白或核酸的分离。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺（acrylamide，简称Acr）和交联剂甲叉双丙烯酰胺（bisacrylamide，简称Bis）在催化剂的作用下，通过自由基引发聚合反应，形成不带电荷、且具有分子筛性质的网状结构。其孔径大小由聚合链的长度和交联度所决定。聚合链的长度与丙烯酰胺浓度有关，交联度由Acr与Bis的相对比例决定，调节单体丙烯酰胺与交联剂（Bis）的浓度比例，可形成具有不同交联度的网状聚合物。其中Bis的浓度越低，凝胶的孔径越大，适用于分离较大的分子；Bis的浓度越高，网孔越小，分辨率越高，越有利于分离较小的分子。【注意事项】1. 本产品对人体有毒，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液（DTT）使用说明书 【包装规格】 产品编号 产品名称 包装 ES-8153 SDS-PAGE Dual Color Protein Loading Buffer,4×(with DTT) 1ml/10ml/100ml 使用说明书 1份 【保存条件】 建议分装冻存，避免反复冻融，-20℃保存，有效期1年 【概述】 4×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液可保护蛋白质在样品制备步骤中免受热降解，并在SDS-PAGE运行期间防止pH值变化。一些蛋白质对在Tris缓冲液中电泳期间温度波动引起的pH变化敏感，优化后的上样缓冲液组分可防止在SDS-PAGE电泳之前的样品加热过程中以及电泳过程中蛋白质降解。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。 上样缓冲液包含两种跟踪染料：蓝色（溴酚蓝），用于跟踪电泳的进度；粉红色（pyronin Y），用于在Western印迹过程中监测蛋白质向膜的转移。 【使用建议】 1. 室温解冻4×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液。 2. 请按每30μl蛋白样品加入10μl上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。 3. 混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。 4. 冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。 【效果图】 【注意事项】 1. DTT对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右， 胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。 4. 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝、吡罗红指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。 5. 一般而言，吡罗红的迁移速度快于溴酚蓝。在较高百分比的SDS聚丙烯酰胺凝胶（例如15%）中，吡罗红染料的迁移速度比溴酚蓝慢。 6. 该产品于-20℃保存时会出现SDS沉淀，使用前请确保溶液完全复溶混匀，有必要时可置于37℃水浴促溶。

【保存条件】 建议分装冻存，避免反复冻融，-20℃保存，有效期1年 【概述】 4×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液可保护蛋白质在样品制备步骤中免受热降解，并在SDS-PAGE运行期间防止pH值变化。一些蛋白质对在Tris缓冲液中电泳期间温度波动引起的pH变化敏感，优化后的上样缓冲液组分可防止在SDS-PAGE电泳之前的样品加热过程中以及电泳过程中蛋白质降解。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。 上样缓冲液包含两种跟踪染料：蓝色（溴酚蓝），用于跟踪电泳的进度；粉红色（pyronin Y），用于在Western印迹过程中监测蛋白质向膜的转移。 【使用建议】 1. 室温解冻4×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液。 2. 请按每30μl蛋白样品加入10μl上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。 3. 混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。 4. 冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。 【效果图】 【注意事项】 1. DTT对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右， 胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。 4. 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝、吡罗红指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。 5. 一般而言，吡罗红的迁移速度快于溴酚蓝。在较高百分比的SDS聚丙烯酰胺凝胶（例如15%）中，吡罗红染料的迁移速度比溴酚蓝慢。 6. 该产品于-20℃保存时会出现SDS沉淀，使用前请确保溶液完全复溶混匀，有必要时可置于37℃水浴促溶。