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Tris抗原修复液(10×,pH10.0)-500ml
ECOTOP货号:ES-8318-500ml(货期:现货)售价:¥180.00
Tris抗原修复液(10×,pH10.0)-500ml
【保存条件】 4ºC保存,有效期一年 【概述】 Tris抗原修复液是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。 细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。 本抗原修复液采用了广泛使用的Tris,可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。 【操作方法】 1. 对于石蜡切片: a. 脱蜡:二甲苯3次,每次3-5min→ 无水乙醇2次,每次3-5min→ 95%乙醇1次,3-5min→ 90%乙醇1次,3-5min→ 75%乙醇1次,3-5min→ 蒸馏水洗2次,每次3-5min。 b. 抗原修复: ① 用去离子水稀释Tris抗原修复液(10×,pH10.0)至1×,例如10ml本抗原修复液(10×)加入90ml去离子水,混合均匀,即得100ml 1×抗原修复液; ② 将切片浸泡在抗原修复液(1×)中;95-100℃加热约 15 min (加热时间可以控制在10-20 min,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。 随后大约在20-30 min 内冷却至室温。 ③ 用免疫染色洗涤液洗涤 1-2次,每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 2. 对于冰冻切片: ① 用去离子水稀释Tris抗原修复液(10×,pH10.0)至1×,例如10ml本抗原修复液(10×)加入90ml去离子水,混合均匀,即得100ml 1×抗原修复液; ② 用免疫染色洗涤液洗涤切片5min; ③ 将切片浸泡在抗原修复液 (1×)中,95-100℃加热约15 min (加热时间可以控制在10-20 min内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 min 内冷却至室温。 ④ 用免疫染色洗涤液洗涤1-2 次,每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 3. 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 用后请及时拧紧瓶盖,以防挥发。
DAPI染色液即用型(10μg/ml)-100ml
ECOTOP货号:ES-8245-100ml(货期:现货)售价:¥600.00
DAPI染色液即用型(10μg/ml)-100ml
【保存条件】 -20℃避光保存,有效期1年。 【进口原料】 ROCHE REF10236276001, LOT53197821(不同批次产品原料批次会有更新) 【概述】 DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)是一种能够与DNA中大部分A、T碱基相互结合的荧光染料,常用于荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当DAPI与双链DNA结合时,最大吸收波长为358nm,最大发射波长为461nm。DAPI的发射光为蓝色,且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠,可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。本产品母液为DMF溶解,后以PBS稀释为DAPI-PBS溶液,浓度为10μg/ml。经过滤处理,为即用型工作液,可直接用于固定细胞或组织样品的细胞核染色。 【使用方法(仅供参考)】 1. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的DAPI染色。 2. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。 3. 室温放置5-10分钟。 4. 吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。 5. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。 【注意事项】 1. DAPI被普遍认为具有致癌性,操作时应戴手套,并避免交叉污染。 2. 本产品需避光,并尽量避免反复冻融。 3. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
DAPI染色液即用型(10μg/ml)-10ml
ECOTOP货号:ES-8245-10ml(货期:现货)售价:¥110.00
DAPI染色液即用型(10μg/ml)-10ml
【保存条件】 -20℃避光保存,有效期1年。 【进口原料】 ROCHE REF10236276001, LOT53197821(不同批次产品原料批次会有更新) 【概述】 DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)是一种能够与DNA中大部分A、T碱基相互结合的荧光染料,常用于荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当DAPI与双链DNA结合时,最大吸收波长为358nm,最大发射波长为461nm。DAPI的发射光为蓝色,且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠,可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。本产品母液为DMF溶解,后以PBS稀释为DAPI-PBS溶液,浓度为10μg/ml。经过滤处理,为即用型工作液,可直接用于固定细胞或组织样品的细胞核染色。 【使用方法(仅供参考)】 1. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的DAPI染色。 2. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。 3. 室温放置5-10分钟。 4. 吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。 5. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。 【注意事项】 1. DAPI被普遍认为具有致癌性,操作时应戴手套,并避免交叉污染。 2. 本产品需避光,并尽量避免反复冻融。 3. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
1×RBC 红细胞裂解液,无菌-500ml
ECOTOP货号:ES-8233-500ml售价:¥195.00
1×RBC 红细胞裂解液,无菌-500ml
红细胞裂解液(RBC lysing buffer)使用说明书【包装规格】产品编号产品名称包装ES-82331×Red Blood Cell Lysis Buffer (RBC Lysis Buffer), Sterile100ml 使用说明书1份【保存条件】4℃或室温避光保存12个月【概述】本裂解液经过优化配方,在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。本裂解液的主要有效成分为氯化铵。本裂解液经过无菌处理,处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。【使用建议(仅供参考)】1. 使用前应将红细胞裂解液恢复至室温。1倍体积的新鲜全血加入3倍体积的红细胞裂解液。如1ml新鲜全血加入3ml红细胞裂解液,吹打混匀或颠倒混匀。2. 冰上放置15分钟,其间轻轻涡旋混匀两次,红细胞裂解后,溶液应该是清亮透明的。3. 收集细胞:4℃,450×g离心10分钟以沉淀白细胞,小心吸弃上清液。4. 向白细胞沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液,轻轻涡旋充分重悬白细胞。如起始血液为1ml,则加入2ml的红细胞裂解液。5. 4℃,450×g离心10分钟沉淀白细胞,小心并彻底吸去上清液。6. 重悬细胞,用于后续实验;如提取RNA,最好于此步开始使用DEPC水配制的溶液进行操作。(组织细胞处理:新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心弃去上清液,其余同上。)【注意事项】1. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。2. 本裂解液为无菌产品,分离细胞用于细胞培养时请注意无菌操作。

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