【保存条件】 常温运输，4℃保存，有效期1年 【概述】 本品适用于从少量样品多次检测不同蛋白质。即使样品量并不匮乏，采用这一策略多次检测同一张膜上的蛋白，能省去给药处理、蛋白电泳和膜转移等耗费性步骤。而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。可对同一张膜进行3-5次的Western Blot 检测。 【使用建议】 1. 完成Western Blot发光检测后，用蒸馏水漂洗膜5 min； 2. 加入10~20 ml剥离液覆盖膜。在摇床上漂洗5~20 min。剥离时间视膜上抗体结合量的多少而定（可根据抗体特异性调整时长，部分抗体可延长至30分钟）;3. 倒掉剥离液，加入蒸馏水漂洗膜5 min。此时可在膜上滴上显色发光液以快速检验抗体剥离效果； 4. 用合适的封闭液重新封闭膜，即可再次杂交其它抗体。【注意事项】 1. 本品仅用于科研用途，不得用于临床或诊断相关研究；2. 本品有轻微腐蚀性，使用时请注意防护。3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 常温运输，4℃保存，有效期1年 【概述】 本品适用于从少量样品多次检测不同蛋白质。即使样品量并不匮乏，采用这一策略多次检测同一张膜上的蛋白，能省去给药处理、蛋白电泳和膜转移等耗费性步骤。而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。可对同一张膜进行3-5次的Western Blot 检测。 【使用建议】 1. 完成Western Blot发光检测后，用蒸馏水漂洗膜5 min； 2. 加入10~20 ml剥离液覆盖膜。在摇床上漂洗5~20 min。剥离时间视膜上抗体结合量的多少而定（可根据抗体特异性调整时长，部分抗体可延长至30分钟）; 3. 倒掉剥离液，加入蒸馏水漂洗膜5 min。此时可在膜上滴上显色发光液以快速检验抗体剥离效果； 4. 用合适的封闭液重新封闭膜，即可再次杂交其它抗体。 【注意事项】 1. 本品仅用于科研用途，不得用于临床或诊断相关研究； 2. 本品有轻微腐蚀性，使用时请注意防护。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存12个月，4度保存可延长使用时间。 【概述】 本品用于蛋白实验的清洗，其组成浓度为1% SDS, 0.1M NaHCO3. 【注意事项】 1. 本品仅用于科研用途，不得用于临床或诊断相关研究 2. 低温储存时可能会有SDS析出，若有析出可加热5-10分钟溶解即可。

【保存条件】 EK-6200-A于4℃保存，其余-20℃保存，有效期1年。 【概述】 哺乳动物组织/细胞总蛋白提取试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，作用较为强烈，可快速获得总蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验。 【使用建议】 取1ml的预冷裂解液 Total Protein Extraction Buffer中加入20ul的蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物和10ul PMSF；混匀，放置在冰上备用； 1. 样品前处理： a) 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照6孔板每孔细胞量加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。 b) 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。 c) 对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。 2. 后处理：将裂解后的样品10000-14000g于4℃下离心15-30分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting和免疫沉淀等操作。（暂时不使用蛋白尽快保存于-80℃中，即用即取，避免反复冻融，避免长时间冻存）。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 本产品长时间低温存放可能会出现沉淀，可在37ºC水浴约10分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。 3. 为保证最佳的使用效果，请尽量避免过多的反复冻融，可分装后使用。 4. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。 5. 裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。 6. 该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

【保存条件】 EK-6200-A于4℃保存，其余-20℃保存，有效期1年。 【概述】 哺乳动物组织/细胞总蛋白提取试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，作用较为强烈，可快速获得总蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验。 【使用建议】 取1ml的预冷裂解液 Total Protein Extraction Buffer中加入20ul的蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物和10ul PMSF；混匀，放置在冰上备用； 1. 样品前处理： a) 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照6孔板每孔细胞量加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。 b) 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。 c) 对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。 2. 后处理：将裂解后的样品10000-14000g于4℃下离心15-30分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting和免疫沉淀等操作。（暂时不使用蛋白尽快保存于-80℃中，即用即取，避免反复冻融，避免长时间冻存）。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 本产品长时间低温存放可能会出现沉淀，可在37ºC水浴约10分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。 3. 为保证最佳的使用效果，请尽量避免过多的反复冻融，可分装后使用。 4. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。 5. 裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。 6. 该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

【保存条件】 室温避光保存，有效期至少一年 【概述】 苏木素染色(hematoxylin staining or haematoxylin staining)，也被称作苏木精染色，是最常用的组织和细胞的染色方法之一。无色的苏木素(hematoxylin)氧化后形成有醌环结构(quinoid ring)的氧化苏木素(hematein or haematein)，从而可以和三价的铝离子、铁离子等形成有颜色的带正电荷的复合物(如hematein-Al3+ complexes)。氧化苏木素(也称氧化苏木精)和铝离子等形成有色的复合物的过程也被称为Dye Lake Formation。细胞核内基因组DNA的双螺旋结构中，双链上的磷酸基团向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的氧化苏木素复合物结合，从而形成细胞核染色。苏木素染色液有多种不同的配制方法，不同的方法可以把细胞核染色成不同深浅的蓝色或蓝紫色。 伊红(eosin)是一种化学合成的酸性染料，在水中解离成带负电荷的阴离子，可以和蛋白质氨基上带正电荷的阳离子结合，从而使细胞胞浆染成不同程度的红色或粉红色，与苏木素染色液染色形成的蓝色细胞核形成鲜明对比，从而使苏木素伊红(HE)染色成为病理组织切片中最广泛使用的一种常规染色方法。 本试剂盒使用试剂为优化后的Mayer法配方，苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色，细胞浆呈现粉红色或红色。 【使用方法（仅供参考）】 1.样品处理a.对于石蜡切片：二甲苯（自备）中脱蜡5-10分钟；换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟；无水乙醇浸泡5分钟；90%乙醇浸泡2分钟；80%乙醇浸泡2分钟；70%乙醇浸泡2分钟。蒸馏水洗涤2分钟。b.对于冰冻切片：固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。c.对于培养细胞：固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。2.苏木素伊红(HE)染色对于上述处理好的样品：a.苏木素染色液染色1-5分钟(可以根据染色结果和要求调整时间，根据组织大小和厚度进行调整)。b.蒸馏水洗去浮色，用适当的返蓝液浸泡样品10-60s（亦可用自来水中冲洗去多余的染色液，约10分钟）。c.蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。d.选做：根据不同分化液（自备）的分化时间，分化约2-30秒，自来水冲洗10分钟。e.伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。 此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。3.脱水、透明、封片观察70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，无水乙醇10秒。二甲苯透明5分钟。换用新鲜的二甲苯，再透明5分钟。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察，细胞核呈蓝色，而细胞浆呈粉红色或红色。 【注意事项】 1. 染色后的分化为选做步骤，但分化后核质着色更清晰。 2. 染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。 3. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。 4. 伊红在水和梯度乙醇中会出现脱色，因此建议快速脱水。 5. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。 6. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温避光保存，有效期至少一年 【概述】 苏木素染色(hematoxylin staining or haematoxylin staining)，也被称作苏木精染色，是最常用的组织和细胞的染色方法之一。无色的苏木素(hematoxylin)氧化后形成有醌环结构(quinoid ring)的氧化苏木素(hematein or haematein)，从而可以和三价的铝离子、铁离子等形成有颜色的带正电荷的复合物(如hematein-Al3+ complexes)。氧化苏木素(也称氧化苏木精)和铝离子等形成有色的复合物的过程也被称为Dye Lake Formation。细胞核内基因组DNA的双螺旋结构中，双链上的磷酸基团向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的氧化苏木素复合物结合，从而形成细胞核染色。苏木素染色液有多种不同的配制方法，不同的方法可以把细胞核染色成不同深浅的蓝色或蓝紫色。 伊红(eosin)是一种化学合成的酸性染料，在水中解离成带负电荷的阴离子，可以和蛋白质氨基上带正电荷的阳离子结合，从而使细胞胞浆染成不同程度的红色或粉红色，与苏木素染色液染色形成的蓝色细胞核形成鲜明对比，从而使苏木素伊红(HE)染色成为病理组织切片中最广泛使用的一种常规染色方法。 本试剂盒使用试剂为优化后的Mayer法配方，苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色，细胞浆呈现粉红色或红色。 【使用方法（仅供参考）】 1.样品处理a.对于石蜡切片：二甲苯（自备）中脱蜡5-10分钟；换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟；无水乙醇浸泡5分钟；90%乙醇浸泡2分钟；80%乙醇浸泡2分钟；70%乙醇浸泡2分钟。蒸馏水洗涤2分钟。b.对于冰冻切片：固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。c.对于培养细胞：固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。2.苏木素伊红(HE)染色对于上述处理好的样品：a.苏木素染色液染色1-5分钟(可以根据染色结果和要求调整时间，根据组织大小和厚度进行调整)。b.蒸馏水洗去浮色，用适当的返蓝液浸泡样品10-60s（亦可用自来水中冲洗去多余的染色液，约10分钟）。c.蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。d.选做：根据不同分化液（自备）的分化时间，分化约2-30秒，自来水冲洗10分钟。e.伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。 此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。3.脱水、透明、封片观察70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，无水乙醇10秒。二甲苯透明5分钟。换用新鲜的二甲苯，再透明5分钟。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察，细胞核呈蓝色，而细胞浆呈粉红色或红色。 【注意事项】 1. 染色后的分化为选做步骤，但分化后核质着色更清晰。 2. 染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。 3. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。 4. 伊红在水和梯度乙醇中会出现脱色，因此建议快速脱水。 5. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。 6. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 4℃保存，有效期6个月。-20℃保存，有效期1年。 【概述】 SDT裂解缓冲液用于裂解哺乳动物细胞和组织。其含有SDS、Tris-HCl、DTT，对样本全蛋白有很好的提取效果。 但其中所含的SDS会使蛋白质变性失活，因此不适合后续活性相关实验。试剂请于避光保存，以确保其稳定性。 【使用建议】 1. 取100mg动物组织或细胞（组织提前剪成小块）加入500μl PBS溶液中初步匀浆（60 Hz，45s），再加入500μl SDT裂解液。 2. 将上一步加有SDT裂解液的动物组织或细胞于4℃进行匀浆（60 Hz，20s）。 3. 低速短暂离心将管壁液体离下，后置于沸水浴（或100℃）3min。 4. 再次使用探头超声：40-50W超声5s，间隔5s，一共6个循环。 5. 将溶液置于沸水浴（或100℃）2min，10000g离心10min。 6. 收集上清进行后续实验。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 该试剂仅用于科研领域，不得用于临床诊断或其他用途。 3. SDT裂解液不适用于后续做与活性相关的实验，如免疫共沉淀。在进行蛋白质浓度测定时由于SDT裂解液中含有SDS和DTT，因此 Bradford法和BCA方法不适用，而应选择去垢剂和还原剂均兼容的荧光法测定蛋白质浓度。各种裂解液中含有的去垢剂均会影响胰蛋白酶活性，并且对质谱分析产生很大影响，因此均需要在蛋白质样品酶解前除去。 4. SDT裂解液中含有较高浓度的SDS，在低温下可能析出为正常现象，使用前只需将溶液置于37℃加热5-10min或至溶解即可。

【保存条件】 4ºC保存，一年有效；长期不用可-20℃保存延长保质期。 【概述】 针对不同种类的生物体以及不同的细胞和组织类型，有效的细胞裂解和蛋白质提取需要不同的缓冲液配方。 NETN溶液由20mM Tris-HCl pH8.0，100mM NaCl，1mM EDTA，0.5% NP-40组成，经0.45um滤膜过滤处理，可直接用于细胞裂解。 【操作方法】 根据实验需求使用。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。

【保存条件】 4℃保存，有效期1年 【概述】 用于Co IP 实验过程中磁珠的清洗，本品由磷酸盐缓冲液及低浓度还原剂组成。 【注意事项】 1. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。