【保存条件】 4℃保存3个月，-20℃保存一年 【使用建议（仅供参考）】 10×裂解缓冲液LBH稀释：用无菌去离子水稀释10倍，如取1ml的10×裂解缓冲液LBH加入9ml去离子水即得1×裂解缓冲液LBH（使用前添加相应蛋白酶抑制剂）。 哺乳动物细胞核蛋白提取： 1. 细胞收集（106–107个）：对于贴壁细胞（70-90%汇合单层培养）：从细胞中取出生长培养基后用PBS冲洗细胞两次（注意不要冲洗过于用力造成细胞脱落），吸去PBS，使用胰酶消化或刮刀（使用新鲜PBS）将细胞刮入适当的锥形离心管中。以450×g离心5分钟，倒出并弃去上清液以收集细胞沉淀备用（若使用胰酶消化则需用PBS重复清洗离心1-2次尽可能将胰酶去除）。 对于悬浮细胞：将细胞收集到适当的锥形离心管中以450×g离心5分钟，倒出并弃去上清液，用PBS洗涤细胞1-2次，将细胞沉淀重悬于PBS中。以450×g离心5分钟，倒出并弃去上清液以收集细胞沉淀备用。 1. 将收集的细胞中加入500μL 1×裂解缓冲液LBH（使用前添加相应蛋白酶抑制剂）并在冰上孵育15分钟，让细胞膨胀破裂。 2. 后在裂解缓冲液中加入裂解缓冲液CA 30μL（每100μL混合物加入6μL），剧烈涡旋10秒钟。 3. 在4℃下以10,000–11,000×g立即离心30-60秒。 4. 将上清液转移到新鲜管中，上清液为是细胞质部分，沉淀为细胞核部分。 5. 将粗核沉淀重新悬浮在50μl完整的提取缓冲液EXB中，在冰上放置30分钟裂解，后涡旋10分钟。 6. 在4℃下以14000×g离心30分钟。 7. 转移上清液即细胞核蛋白至新的离心管中，–80°C或者液氮中保存蛋白或直接进行后续实验。 从 100 mg 组织中提取核蛋白： 1. 准备1×裂解缓冲液LBH（如前所述，使用前加入相应蛋白酶抑制剂） 2. 用PBS缓冲液冲洗组织两次，丢弃PBS。 3. 将组织轻轻重悬于1,000μL的1×裂解缓冲液LBH（裂解液使用前加入相应蛋白酶抑制剂）中。 4. 低温匀浆组织直到>90%的细胞破碎，细胞核在显微镜下可视化。 5. 在4℃下将破碎的细胞以10,000-11,000×g离心20分钟。 6. 转移上清液到新鲜管，该部分是细胞质部分。 7. 将粗核沉淀重新悬浮在50μl完整的提取缓冲液EXB中，在冰上放置30分钟裂解，后涡旋10分钟。 8. 在4℃下以14000×g离心30分钟。 9. 转移上清液即细胞核蛋白至新的离心管中，–80°C或者液氮中保存蛋白或直接进行后续实验。 【注意事项】 1. 尽量减少反复冻融的次数，以免效率下降。 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作

【保存条件】 4℃保存3个月，-20℃保存一年 【使用建议（仅供参考）】 10×裂解缓冲液LBH稀释：用无菌去离子水稀释10倍，如取1ml的10×裂解缓冲液LBH加入9ml去离子水即得1×裂解缓冲液LBH（使用前添加相应蛋白酶抑制剂）。 哺乳动物细胞核蛋白提取： 1. 细胞收集（106–107个）： 对于贴壁细胞（70-90%汇合单层培养）：从细胞中取出生长培养基后用PBS冲洗细胞两次（注意不要冲洗过于用力造成细胞脱落），吸去PBS，使用胰酶消化或刮刀（使用新鲜PBS）将细胞刮入适当的锥形离心管中。以450×g离心5分钟，倒出并弃去上清液以收集细胞沉淀备用（若使用胰酶消化则需用PBS重复清洗离心1-2次尽可能将胰酶去除）。 对于悬浮细胞：将细胞收集到适当的锥形离心管中以450×g离心5分钟，倒出并弃去上清液，用PBS洗涤细胞1-2次，将细胞沉淀重悬于PBS中。以450×g离心5分钟，倒出并弃去上清液以收集细胞沉淀备用。 1. 将收集的细胞中加入500μL 1×裂解缓冲液LBH（使用前添加相应蛋白酶抑制剂）并在冰上孵育15分钟，让细胞膨胀破裂。 2. 后在裂解缓冲液中加入裂解缓冲液CA 30μL（每100μL混合物加入6μL），剧烈涡旋10秒钟。 3. 在4℃下以10,000–11,000×g立即离心30-60秒。 4. 将上清液转移到新鲜管中，上清液为是细胞质部分，沉淀为细胞核部分。 5. 将粗核沉淀重新悬浮在50μl完整的提取缓冲液EXB中，在冰上放置30分钟裂解，后涡旋10分钟。 6. 在4℃下以14000×g离心30分钟。 7. 转移上清液即细胞核蛋白至新的离心管中，–80°C或者液氮中保存蛋白或直接进行后续实验。 从 100 mg 组织中提取核蛋白： 1. 准备1×裂解缓冲液LBH（如前所述，使用前加入相应蛋白酶抑制剂） 2. 用PBS缓冲液冲洗组织两次，丢弃PBS。 3. 将组织轻轻重悬于1,000μL的1×裂解缓冲液LBH（裂解液使用前加入相应蛋白酶抑制剂）中。 4. 低温匀浆组织直到>90%的细胞破碎，细胞核在显微镜下可视化。 5. 在4℃下将破碎的细胞以10,000-11,000×g离心20分钟。 6. 转移上清液到新鲜管，该部分是细胞质部分。 7. 将粗核沉淀重新悬浮在50μl完整的提取缓冲液EXB中，在冰上放置30分钟裂解，后涡旋10分钟。 8. 在4℃下以14000×g离心30分钟。 9. 转移上清液即细胞核蛋白至新的离心管中，–80°C或者液氮中保存蛋白或直接进行后续实验。 【注意事项】 1. 尽量减少反复冻融的次数，以免效率下降。 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作

产品组成 FastPure Gel Extraction Kit 产品编号 EK-1104-50T EK-1104-100T 纯化次数 50次 100次 Buffer QG 30ml 60ml Buffer PB 30ml 60ml Buffer PW 12ml 24ml Buffer EB 10ml 20ml Gel Spin Columns 50 100 2ml Collection Tubes 50 100 使用手册 1 1 产品介绍 本试剂盒采用可高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统，可从各种浓度的TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收70bp-10kbp大小的DNA片段，也可以用于各种PCR体系中DNA回收，同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质，回收率可达80%以上。每个离心吸附柱每次可吸附的DNA量为20μg。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。 存储条件 该试剂盒置于室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月。Buffer QG/PB可能产生沉淀，若有沉淀使用前可在55℃水浴中预热10 min以溶解。需要额外准备的材料 □ 无水乙醇（96%-100%）□ 无菌1.5ml离心管开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 □ 电泳时最好使用新的电泳缓冲液，以免影响电泳和回收效果。□ 如下一步实验要求较高，核酸电泳时则应尽量使用TAE电泳缓冲液。□ 切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对DNA造成损伤。□ 如果回收率较低，可在胶充分溶解后检测pH值，如pH值大于7.5，可向含有DNA的胶溶液中加10-30µl 3M醋酸钠（pH5.2）将pH值调到5-7之间。□ 回收<70bp或>10kbp的DNA片段时，应加大Buffer QG的体积，延长吸附和洗脱时间。□ 回收率与初始DNA量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越少，回收率越低。□ 高温及潮湿等不利环境因素对吸附柱产生影响，请将吸附柱储存于阴凉干燥的环境中。开始前试剂准备 □ 按瓶子标签所示，加入4倍体积的无水乙醇稀释Buffer PW，于室温密封保存。□ 确认Buffer QG溶液显示为黄色。DNA浓度及纯度检测 l 回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。l DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40μg/ml单链DNA。l OD260/OD280比值应为1.7-2.0，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用ddH2O比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。操作步骤： 一、琼脂糖回收DNA 1. 配制所需浓度的琼脂糖凝胶，电泳分离DNA片段。当DNA片段分离后，将凝胶置于紫外灯下，用干净锋利的手术刀快速切下含目的片段大小的DNA凝胶。 为避免DNA片段受到损伤，应尽量减少凝胶的紫外照射时间，切胶时应尽量切去多余凝胶。2. 放入1.5ml离心管中并称取凝胶块的重量，加入3倍体积的Buffer QG（如凝胶称重结果为100mg，则其体积约等于100µl，应加入300µl Buffer QG）。 对于>2%的琼脂糖凝胶，添加6倍体积的Buffer QG。3. 50℃水浴10min（或直至凝胶完全溶解即可），水浴期间可颠倒混匀加速溶胶。 注意：若回收<300bp的DNA片段可在完全溶胶后加入一倍凝胶体积的异丙醇以提高回收率；胶块完全溶解后最好将溶液温度降至室温再上柱，因为吸附柱在室温时结合DNA能力较强。4. 凝胶完全溶解后，检查颜色是否为黄色（类似于没有溶解琼脂糖的Buffer QG）。 如果混合物的颜色为橙色或紫色，则加入10µl 3 M 醋酸钠(pH 5.0)并混合，混合物的颜色会变成黄色。DNA吸附到膜上仅在pH ≤ 7.5时有效。Buffer QG含有一种pH指示剂，在pH ≤7.5时为黄色，在较高pH时为橙色或紫色，可通过颜色轻松确定DNA结合的最佳pH。5. 将吸附柱套在2ml收集管中，并将上一步得到的溶液加入到吸附柱中，≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 6. 向吸附柱中加入500µl Buffer PW（已加入无水乙醇），≥8000×g(≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 注意：如果回收的DNA是用于盐敏感的实验，例如平末端连接实验或直接测序，建议加入Buffer PW后静置2-5min后再离心。7. 重复操作步骤7一次。 8. 倒掉收集管中的废液后将吸附柱再次套入收集管中，最大转速 (~13,400×g)离心2min以干燥吸附柱膜，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。将吸附柱套入新的1.5ml 离心管中并于室温开盖放置5-10min彻底晾干。 注意：Buffer PW中的乙醇残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。9. 向吸附柱膜中央位置悬空滴加30-50µl Buffer EB，盖上盖子室温静置2min后，最大转速 (~13,400×g)离心2min收集DNA溶液并置于-20℃保存。 注意：洗脱体积不应小于30μl，体积过少影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若后续做测序，需使用ddH2O做洗脱液，并保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率。为了提高DNA的回收量，可重复操作步骤10一次。二、从PCR反应液或者酶切反应中回收DNA 1. 将5倍体积的Buffer PB添加到1倍体积的PCR样品中，然后混匀。 例如，将500µl Buffer PB添加到100µl PCR样品（不包括油的体积），无需去除石蜡油或矿物油。2. 溶液完全溶解后，检查颜色是否为黄色。 如果混合物的颜色为红色，则加入10µl 3 M 醋酸钠(pH 5.0)并混合，混合物的颜色会变成黄色。DNA吸附到膜上仅在pH ≤ 7.5时有效。Buffer PB含有一种pH指示剂，在pH ≤7.5时为黄色，在较高pH时为红色，可通过颜色轻松确定DNA结合的最佳pH。3. 将吸附柱套在2ml收集管中，并将上一步得到的溶液加入到吸附柱中，≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 4. 向吸附柱中加入500µl Buffer PW（已加入无水乙醇），≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 注意：如果回收的DNA是用于盐敏感的实验，例如平末端连接实验或直接测序，建议加入Buffer PW后静置2-5min后再离心。5. 重复操作步骤4一次。 6. 倒掉收集管中的废液后将吸附柱再次套入收集管中，最大转速 (~13,400×g)离心2min以干燥吸附柱膜，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。将吸附柱套入新的1.5ml离心管中并于室温开盖放置5-10min彻底晾干。 7. 向吸附柱膜中央位置悬空滴加30-50µl Buffer EB，盖上盖子室温静置2min后，最大转速 (~13,400×g)离心2min收集DNA溶液并置于-20℃保存。

产品组成 FastPure Gel Extraction Kit 产品编号 EK-1104-50T EK-1104-100T 纯化次数 50次 100次 Buffer QG 30ml 60ml Buffer PB 30ml 60ml Buffer PW 12ml 24ml Buffer EB 10ml 20ml Gel Spin Columns 50 100 2ml Collection Tubes 50 100 使用手册 1 1 产品介绍 本试剂盒采用可高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统，可从各种浓度的TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收70bp-10kbp大小的DNA片段，也可以用于各种PCR体系中DNA回收，同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质，回收率可达80%以上。每个离心吸附柱每次可吸附的DNA量为20μg。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。 存储条件 该试剂盒置于室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月。Buffer QG/PB可能产生沉淀，若有沉淀使用前可在55℃水浴中预热10 min以溶解。 需要额外准备的材料 □ 无水乙醇（96%-100%） □ 无菌1.5ml离心管 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 □ 电泳时最好使用新的电泳缓冲液，以免影响电泳和回收效果。 □ 如下一步实验要求较高，核酸电泳时则应尽量使用TAE电泳缓冲液。 □ 切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对DNA造成损伤。 □ 如果回收率较低，可在胶充分溶解后检测pH值，如pH值大于7.5，可向含有DNA的胶溶液中加10-30µl 3M醋酸钠（pH5.2）将pH值调到5-7之间。 □ 回收<70bp或>10kbp的DNA片段时，应加大Buffer QG的体积，延长吸附和洗脱时间。 □ 回收率与初始DNA量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越少，回收率越低。 □ 高温及潮湿等不利环境因素对吸附柱产生影响，请将吸附柱储存于阴凉干燥的环境中。 开始前试剂准备 □ 按瓶子标签所示，加入4倍体积的无水乙醇稀释Buffer PW，于室温密封保存。 □ 确认Buffer QG溶液显示为黄色。DNA浓度及纯度检测 l 回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。 l DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40μg/ml单链DNA。 l OD260/OD280比值应为1.7-2.0，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用ddH2O比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。 操作步骤： 一、琼脂糖回收DNA 1. 配制所需浓度的琼脂糖凝胶，电泳分离DNA片段。当DNA片段分离后，将凝胶置于紫外灯下，用干净锋利的手术刀快速切下含目的片段大小的DNA凝胶。 为避免DNA片段受到损伤，应尽量减少凝胶的紫外照射时间，切胶时应尽量切去多余凝胶。 2. 放入1.5ml离心管中并称取凝胶块的重量，加入3倍体积的Buffer QG（如凝胶称重结果为100mg，则其体积约等于100µl，应加入300µl Buffer QG）。 对于>2%的琼脂糖凝胶，添加6倍体积的Buffer QG。 3. 50℃水浴10min（或直至凝胶完全溶解即可），水浴期间可颠倒混匀加速溶胶。 注意：若回收<300bp的DNA片段可在完全溶胶后加入一倍凝胶体积的异丙醇以提高回收率；胶块完全溶解后最好将溶液温度降至室温再上柱，因为吸附柱在室温时结合DNA能力较强。 4. 凝胶完全溶解后，检查颜色是否为黄色（类似于没有溶解琼脂糖的Buffer QG）。 如果混合物的颜色为橙色或紫色，则加入10µl 3 M 醋酸钠(pH 5.0)并混合，混合物的颜色会变成黄色。DNA吸附到膜上仅在pH ≤ 7.5时有效。Buffer QG含有一种pH指示剂，在pH ≤7.5时为黄色，在较高pH时为橙色或紫色，可通过颜色轻松确定DNA结合的最佳pH。 5. 将吸附柱套在2ml收集管中，并将上一步得到的溶液加入到吸附柱中，≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 6. 向吸附柱中加入500µl Buffer PW（已加入无水乙醇），≥8000×g(≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 注意：如果回收的DNA是用于盐敏感的实验，例如平末端连接实验或直接测序，建议加入Buffer PW后静置2-5min后再离心。 7. 重复操作步骤7一次。 8. 倒掉收集管中的废液后将吸附柱再次套入收集管中，最大转速 (~13,400×g)离心2min以干燥吸附柱膜，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。将吸附柱套入新的1.5ml 离心管中并于室温开盖放置5-10min彻底晾干。 注意：Buffer PW中的乙醇残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。 9. 向吸附柱膜中央位置悬空滴加30-50µl Buffer EB，盖上盖子室温静置2min后，最大转速 (~13,400×g)离心2min收集DNA溶液并置于-20℃保存。 注意：洗脱体积不应小于30μl，体积过少影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若后续做测序，需使用ddH2O做洗脱液，并保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率。为了提高DNA的回收量，可重复操作步骤10一次。 二、从PCR反应液或者酶切反应中回收DNA 1. 将5倍体积的Buffer PB添加到1倍体积的PCR样品中，然后混匀。 例如，将500µl Buffer PB添加到100µl PCR样品（不包括油的体积），无需去除石蜡油或矿物油。 2. 溶液完全溶解后，检查颜色是否为黄色。 如果混合物的颜色为红色，则加入10µl 3 M 醋酸钠(pH 5.0)并混合，混合物的颜色会变成黄色。DNA吸附到膜上仅在pH ≤ 7.5时有效。Buffer PB含有一种pH指示剂，在pH ≤7.5时为黄色，在较高pH时为红色，可通过颜色轻松确定DNA结合的最佳pH。 3. 将吸附柱套在2ml收集管中，并将上一步得到的溶液加入到吸附柱中，≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 4. 向吸附柱中加入500µl Buffer PW（已加入无水乙醇），≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 注意：如果回收的DNA是用于盐敏感的实验，例如平末端连接实验或直接测序，建议加入Buffer PW后静置2-5min后再离心。 5. 重复操作步骤4一次。 6. 倒掉收集管中的废液后将吸附柱再次套入收集管中，最大转速 (~13,400×g)离心2min以干燥吸附柱膜，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。将吸附柱套入新的1.5ml离心管中并于室温开盖放置5-10min彻底晾干。 7. 向吸附柱膜中央位置悬空滴加30-50µl Buffer EB，盖上盖子室温静置2min后，最大转速 (~13,400×g)离心2min收集DNA溶液并置于-20℃保存。

【保存条件】 室温储存，有效期1年。 【概述】 本产品用于HE染色或苏木素染色后的返蓝。苏木素在酸性条件下为离子状态，呈红色；在碱性条件下呈蓝色。组织切片经苏木素染色后，先酸性分化液分化去除过多结合的苏木素，此时苏木素呈红色或粉红色。水洗终止分化，再用弱碱性溶液处理使苏木素呈现蓝色，这个过程就是返蓝作用。HE染色中苏木素染色后的返蓝很重要，使苏木素呈现应有的蓝色。 该返蓝液为弱碱性平衡盐溶液，多用于苏木素染色后蓝化。 【使用建议】 根据实验需求，一般蓝化3-30s。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用，不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 一些组织内含有骨质或钙化灶时，含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同，较难切除完整的切片。对含钙组织最好固定之后，再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游的实验，如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸（EDTA）以及电解法脱钙。 EDTA是一种相对较好的螯合脱钙剂，对组织结构影响最小，可以较好的保存组织的某些酶类，经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢，一般脱需要数周至数月。 【使用建议】 1. 骨组织脱钙时，取材不易过厚，一般大约5mm。 2. 组织固定后，用PBS清洗3次，每次20min。 3. 组织用蒸馏水洗清洗3次，每次20min。 4. 组织转移至20～30倍体积的EDTA脱钙液中，脱钙10～30天或更长时间。如果想加快脱钙速度，可以置于37℃进行脱钙。如果必要，更换新的EDTA脱钙液继续脱钙，多数组织脱钙2周～3个月即可，每周更换一次，直至终点。亦可采用微波快速脱钙法：微波炉设在200W左右的档位，每次加热5min，依据组织厚度和密度重复3～5min，中间间隔3～5min。 5. 用蒸馏水冲洗数次。6. 常规脱水、包埋。【注意事项】 1. 厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙10~30天即可。 2. 适当加温能加快脱钙的速度，一般不应超过37～40℃，温度过高容易使骨组织造成松散解体，尤其不可大于60℃。3. 脱钙应彻底，防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间，以免脱钙过长引起组织损害。4. 脱钙用具避免使用金属容器，尽量使用玻璃容器。5. 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行，不应先脱钙后固定，以便减少组织的损伤程度。6. 每隔一段时间检测一次脱钙程度，避免脱钙过度，脱钙过度会增加组织的损伤程度，影响染色结果。7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。8. 脱钙终点的测定（物理法）：采用针刺、手掐、钳夹等方法，当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害，尽量避免用力过大或反复检测。

【保存条件】 室温避光保存，有效期1年 【概述】 苏木素染色(hematoxylin staining or haematoxylin staining)，也被称作苏木精染色，是最常用的组织和细胞的染色方法之一。无色的苏木素(hematoxylin)氧化后形成有醌环结构(quinoid ring)的氧化苏木素(hematein or haematein)，从而可以和三价的铝离子、铁离子等形成有颜色的带正电荷的复合物(如hematein-Al3+ complexes)。伊红(eosin)是一种化学合成的酸性染料，在水中解离成带负电荷的阴离子，可以和蛋白质氨基上带正电荷的阳离子结合，从而使细胞胞浆染成不同程度的红色或粉红色，与苏木素染色液染色形成的蓝色细胞核形成鲜明对比，从而使苏木素伊红(HE)染色成为病理组织切片中最广泛使用的一种常规染色方法。 本试剂盒使用试剂为优化后的Mayer法配方，苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色，细胞浆呈现粉红色或红色。 【使用方法（仅供参考）】 1.样品处理 a.对于石蜡切片： 二甲苯（自备）中脱蜡5-10分钟；换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟；无水乙醇浸泡5分钟；90%乙醇浸泡2分钟；80%乙醇浸泡2分钟；70%乙醇浸泡2分钟。蒸馏水洗涤2分钟。 b.对于冰冻切片： 固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。 c.对于培养细胞： 固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。 2.苏木素伊红(HE)染色 对于上述处理好的样品： a.苏木素染色液染色1-5分钟(可以根据染色结果和要求调整时间，根据组织大小和厚度进行调整)。 b.蒸馏水洗去浮色，用适当的返蓝液浸泡样品10-60s（亦可用自来水中冲洗去多余的染色液，约10分钟）。 c.蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。 d.选做：根据不同分化液（自备）的分化时间，分化约2-30秒，自来水冲洗10分钟。 e.伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。 此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。 3.脱水、透明、封片观察 70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，无水乙醇10秒。二甲苯透明5分钟。换用新鲜的二甲苯，再透明5分钟。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察，细胞核呈蓝色，而细胞浆呈粉红色或红色。 【注意事项】 1. 染色后的分化为选做步骤，但分化后核质着色更清晰。 2. 染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。 3. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。 4. 伊红在水和梯度乙醇中会出现脱色，因此建议快速脱水。 5. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。 6. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温避光储存，有效期1年 【概述】 伊红(Eosin Y)是一种化学合成的酸性染料，在水中解离成带负电荷的阴离子，可以和蛋白质氨基上带正电荷的阳离子结合，从而使细胞胞浆染成不同程度的红色或粉红色，与苏木素染色液染色形成的蓝色细胞核形成鲜明对比，从而使苏木素伊红(HE)染色成为病理组织切片中最广泛使用的一种常规染色方法。本伊红染色液染色后细胞浆呈粉红色或红色。 【使用建议】 1. 样品处理a.对于石蜡切片：二甲苯（自备）中脱蜡5-10分钟；换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟；无水乙醇浸泡5分钟；90%乙醇浸泡2分钟；80%乙醇浸泡2分钟；70%乙醇浸泡2分钟。蒸馏水洗涤2分钟。b.对于冰冻切片：固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。c.对于培养细胞：固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。2.伊红染色对于上述处理好的样品：伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。注：如果用于免疫组化等染色后的复染，可以参考上述步骤在其它染色完成后直接进行伊红染色。3.脱水、透明、封片观察或进行其他染色a.脱水、透明、封片观察: 70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，无水乙醇10秒。二甲苯透明5分钟。换用新鲜的二甲苯，再透明5分钟。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察，细胞浆呈粉红色或红色。 b. 进行其它染色：如果进行免疫荧光染色，或进行Hoechst等荧光染料的染色，在伊红染色液染色后：70%乙醇洗涤2次，每次2分钟。PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟。然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。如果免疫荧光染色效果不佳，可能染料对抗体结合有影响，请单独染色。 【注意事项】 1. 染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。 2. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。 3. 仅限于科研使用，不可用于各种食品药品或临床治疗中。 4. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温避光储存，有效期1年 【概述】 伊红(Eosin Y)是一种化学合成的酸性染料，在水中解离成带负电荷的阴离子，可以和蛋白质氨基上带正电荷的阳离子结合，从而使细胞胞浆染成不同程度的红色或粉红色，与苏木素染色液染色形成的蓝色细胞核形成鲜明对比，从而使苏木素伊红(HE)染色成为病理组织切片中最广泛使用的一种常规染色方法。本伊红染色液染色后细胞浆呈粉红色或红色。 【使用建议】 1. 样品处理a.对于石蜡切片：二甲苯（自备）中脱蜡5-10分钟；换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟；无水乙醇浸泡5分钟；90%乙醇浸泡2分钟；80%乙醇浸泡2分钟；70%乙醇浸泡2分钟。蒸馏水洗涤2分钟。b.对于冰冻切片：固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。c.对于培养细胞：固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。2.伊红染色对于上述处理好的样品：伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。注：如果用于免疫组化等染色后的复染，可以参考上述步骤在其它染色完成后直接进行伊红染色。3.脱水、透明、封片观察或进行其他染色a.脱水、透明、封片观察: 70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，无水乙醇10秒。二甲苯透明5分钟。换用新鲜的二甲苯，再透明5分钟。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察，细胞浆呈粉红色或红色。 b. 进行其它染色：如果进行免疫荧光染色，或进行Hoechst等荧光染料的染色，在伊红染色液染色后：70%乙醇洗涤2次，每次2分钟。PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟。然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。如果免疫荧光染色效果不佳，可能染料对抗体结合有影响，请单独染色。 【注意事项】 1. 染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。 2. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。 3. 仅限于科研使用，不可用于各种食品药品或临床治疗中。 4. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温避光储存，有效期1年 【概述】 苏木素染色也被称作苏木精染色，是最常用的组织和细胞的染色方法之一。无色的苏木素(hematoxylin)氧化后形成有醌环结构(quinoid ring)的氧化苏木素(hematein or haematein)，从而可以和三价的铝离子、铁离子等形成有颜色的带正电荷的复合物(如hematein-Al3+ complexes)。氧化苏木素(也称氧化苏木精)和铝离子等形成有色的复合物的过程也被称为Dye Lake Formation。细胞核内基因组DNA的双螺旋结构中，双链上的磷酸基团向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的氧化苏木素复合物结合，从而形成细胞核染色。苏木素染色液有多种不同的配制方法，不同的方法可以把细胞核染色成不同深浅的蓝色或蓝紫色。 本试剂为Hematoxylin, Mayer's (Lillie's Modification)，是一种渐进式的核苏木精染色剂，具有多种组织学应用。细胞核染色强、干净、清晰，无需分化。苏木素染色后细胞核呈现蓝色。 【使用建议】 1.样品处理a.对于石蜡切片：二甲苯（自备）中脱蜡5-10分钟；换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟；无水乙醇浸泡5分钟；90%乙醇浸泡2分钟；80%乙醇浸泡2分钟；70%乙醇浸泡2分钟。蒸馏水洗涤2分钟。b.对于冰冻切片：固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。c.对于培养细胞：固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。2.苏木素染色对于上述处理好的样品：a.苏木素染色液染色1-5分钟(可以根据染色结果和要求调整时间，根据组织大小和厚度进行调整)。b.蒸馏水洗去浮色，用自来水中冲洗去多余的染色液，约10分钟。c.蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。d.选做：根据不同分化液（自备）的分化时间，分化约2-30秒，自来水冲洗10分钟。此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。3.脱水、透明、封片观察70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，无水乙醇10秒。二甲苯透明5分钟。换用新鲜的二甲苯，再透明5分钟。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察，细胞核呈蓝色。 【注意事项】 1. 染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。 2. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。 3. 染色后的分化为选做步骤，但分化后细胞核着色更清晰。 4. 仅限于科研使用，不可用于各种食品药品或临床治疗中。 5. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。