【保存条件】 室温保存 24 个月 【概述】 PathSave 细胞保存液是一种可靠、简单且经济高效的单层细胞学溶液。细胞将被完美保 存，具有可明显分辨的细胞核、细胞质和完整的诊断学细节，可用于随后的免疫学、遗传学 或细胞学分析。可适用的标本包括痰液、来自消化道（包括食道、 胃、胰腺、胆管和胰管） 的支气管肺泡灌洗标本、尿液和刷洗物等。 【产品特点】 . 样品在保存液中在室温下可稳定保存 4 周，在 2-8°C 条件下可保存 3-6 个月 . 操作简单，收集的细胞样本浸没到溶液中即可 . 可保存样品中 DNA 的稳定 . 保持蛋白稳定性用于后续免疫学等研究 【使用建议】 1. 收集细胞并转移到含保存液的管中，保证组织被保存液完全覆盖（运输空间要考虑组织 贴壁可以增加保存液体积）。 2. 在室温下储存或运输样品。 3. 在运输/存储结束时，取出样本并直接与下游处理应用。 【注意事项】 1. 本品仅用于科研用途，不得用于临床或诊断相关研究。 2. 本品含少量乙醇，使用时注意防护。

【保存条件】 室温保存 24 个月 【概述】 PathSave 细胞保存液是一种可靠、简单且经济高效的单层细胞学溶液。细胞将被完美保 存，具有可明显分辨的细胞核、细胞质和完整的诊断学细节，可用于随后的免疫学、遗传学 或细胞学分析。可适用的标本包括痰液、来自消化道（包括食道、 胃、胰腺、胆管和胰管） 的支气管肺泡灌洗标本、尿液和刷洗物等。 【产品特点】 . 样品在保存液中在室温下可稳定保存 4 周，在 2-8°C 条件下可保存 3-6 个月 . 操作简单，收集的细胞样本浸没到溶液中即可 . 可保存样品中 DNA 的稳定 . 保持蛋白稳定性用于后续免疫学等研究 【使用建议】 1. 收集细胞并转移到含保存液的管中，保证组织被保存液完全覆盖（运输空间要考虑组织 贴壁可以增加保存液体积）。 2. 在室温下储存或运输样品。 3. 在运输/存储结束时，取出样本并直接与下游处理应用。 【注意事项】 1. 本品仅用于科研用途，不得用于临床或诊断相关研究。 2. 本品含少量乙醇，使用时注意防护。

产品介绍 本产品适用于从拭子和体液中纯化和富集细菌微生物组DNA 的专用解决方案。在纯化过程中有效去除宿主DNA 可最大限度地提高下一代测序分析中的细菌DNA 覆盖率，并允许基于16S rDNA 的高灵敏度微生物组分析和全宏基因组测序研究。 存储条件 Benezonase 和Proteinase K 溶液保存时需置于-20℃，其余可在室温(15~25℃)保存12 个月。 需要额外准备的材料 □ 无水乙醇（96%-100%） □ 无菌1.5ml/2ml离心管 □ 离心机 □ 涡旋仪 □ 水浴锅（将温度调至70℃） □ PBS 或0.9% NaCl (用于液体样本稀释) 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 □ 可提取样品类型为：肺泡灌洗液、拭子和其他体液等富含宿主DNA 样本 □ 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的核酸片段较小且提取量下降。 □ 若Buffer ATL 或Buffer APL2 中有沉淀，可在56℃水浴中加热溶解后使用。 □ Buffer AW1 和Buffer AW2 中提前加入无水乙醇nhibit EX Buffer 如有沉淀现象，可37-70℃水浴至完全溶解。

产品介绍 本产品适用于从拭子和体液中纯化和富集细菌微生物组DNA 的专用解决方案。在纯化过程中有效去除宿主DNA 可最大限度地提高下一代测序分析中的细菌DNA 覆盖率，并允许基于16S rDNA 的高灵敏度微生物组分析和全宏基因组测序研究。 存储条件 Benezonase 和Proteinase K 溶液保存时需置于-20℃，其余可在室温(15~25℃)保存12 个月。 需要额外准备的材料 □ 无水乙醇（96%-100%） □ 无菌1.5ml/2ml离心管 □ 离心机 □ 涡旋仪 □ 水浴锅（将温度调至70℃） □ PBS 或0.9% NaCl (用于液体样本稀释) 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 □ 可提取样品类型为：肺泡灌洗液、拭子和其他体液等富含宿主DNA 样本 □ 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的核酸片段较小且提取量下降。 □ 若Buffer ATL 或Buffer APL2 中有沉淀，可在56℃水浴中加热溶解后使用。 □ Buffer AW1 和Buffer AW2 中提前加入无水乙醇nhibit EX Buffer 如有沉淀现象，可37-70℃水浴至完全溶解。

产品介绍 本产品FFPE提取试剂盒专为从甲醛固定、石蜡包埋的组织切片中提取DNA而设计。该试剂盒采用特殊的裂解条件释放组织切片中的DNA，并克服了由于甲醛交联核酸而引起的抑制效应。纯化的DNA可用于各种下游应用，如PCR、单核苷酸多态性（SNP）和短串联重复（STR）基因分型以及药物基因组研究等。 存储条件 Proteinase K Solution可在2~8℃保存，其余试剂可以室温(15~25℃)下保存12个月。 需要额外准备的材料 □ 无水乙醇（96%-100%） □ 无菌1.5ml离心管 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项： □ Buffer ATL, Buffer AL或Buffer AW1若有沉淀析出，可在55℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。 □ Proteinase K Solution保存于2-8℃，反复冻融会影响其活性。 □ 小型高速离心机（~13000rpm） □ 水浴锅/加热块温度分别设置至56℃和90℃ 开始前试剂准备 □ 按瓶子标签所示，加入相应体积的无水乙醇稀释Buffer AW1，于室温密封保存。 □ 按瓶子标签所示，加入相应体积的无水乙醇稀释Buffer AW2，于室温密封保存。 注意事项 1. 拿到样品后要尽快在4-10%的福尔马林中固定，固定时间以8-24小时为宜。时间过长导致基因组断裂，影响下游实验。确保包埋前的样品彻底脱水，残留的福尔马林会抑制PCR检测酶的作用。 本产品所提取的DNA的完整性依赖于样本类型、储存时间以及固定条件。如果甲醛固定时间过长或样本存放时间过久（超过1年），则易导致DNA完整性受损，无法扩出长片段。

产品介绍 本产品FFPE提取试剂盒专为从甲醛固定、石蜡包埋的组织切片中提取DNA而设计。该试剂盒采用特殊的裂解条件释放组织切片中的DNA，并克服了由于甲醛交联核酸而引起的抑制效应。纯化的DNA可用于各种下游应用，如PCR、单核苷酸多态性（SNP）和短串联重复（STR）基因分型以及药物基因组研究等。 存储条件 Proteinase K Solution可在2~8℃保存，其余试剂可以室温(15~25℃)下保存12个月。 需要额外准备的材料 □ 无水乙醇（96%-100%） □ 无菌1.5ml离心管 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项： □ Buffer ATL, Buffer AL或Buffer AW1若有沉淀析出，可在55℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。 □ Proteinase K Solution保存于2-8℃，反复冻融会影响其活性。 □ 小型高速离心机（~13000rpm） □ 水浴锅/加热块温度分别设置至56℃和90℃ 开始前试剂准备 □ 按瓶子标签所示，加入相应体积的无水乙醇稀释Buffer AW1，于室温密封保存。 □ 按瓶子标签所示，加入相应体积的无水乙醇稀释Buffer AW2，于室温密封保存。 注意事项 1. 拿到样品后要尽快在4-10%的福尔马林中固定，固定时间以8-24小时为宜。时间过长导致基因组断裂，影响下游实验。确保包埋前的样品彻底脱水，残留的福尔马林会抑制PCR检测酶的作用。 本产品所提取的DNA的完整性依赖于样本类型、储存时间以及固定条件。如果甲醛固定时间过长或样本存放时间过久（超过1年），则易导致DNA完整性受损，无法扩出长片段。

产品组成 FastPure Gel Extraction Kit 产品编号 EK-1104-50T EK-1104-100T 纯化次数 50次 100次 Buffer QG 30ml 60ml Buffer PB 30ml 60ml Buffer PW 12ml 24ml Buffer EB 10ml 20ml Gel Spin Columns 50 100 2ml Collection Tubes 50 100 使用手册 1 1 产品介绍 本试剂盒采用可高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统，可从各种浓度的TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收70bp-10kbp大小的DNA片段，也可以用于各种PCR体系中DNA回收，同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质，回收率可达80%以上。每个离心吸附柱每次可吸附的DNA量为20μg。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。 存储条件 该试剂盒置于室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月。Buffer QG/PB可能产生沉淀，若有沉淀使用前可在55℃水浴中预热10 min以溶解。需要额外准备的材料 □ 无水乙醇（96%-100%）□ 无菌1.5ml离心管开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 □ 电泳时最好使用新的电泳缓冲液，以免影响电泳和回收效果。□ 如下一步实验要求较高，核酸电泳时则应尽量使用TAE电泳缓冲液。□ 切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对DNA造成损伤。□ 如果回收率较低，可在胶充分溶解后检测pH值，如pH值大于7.5，可向含有DNA的胶溶液中加10-30µl 3M醋酸钠（pH5.2）将pH值调到5-7之间。□ 回收<70bp或>10kbp的DNA片段时，应加大Buffer QG的体积，延长吸附和洗脱时间。□ 回收率与初始DNA量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越少，回收率越低。□ 高温及潮湿等不利环境因素对吸附柱产生影响，请将吸附柱储存于阴凉干燥的环境中。开始前试剂准备 □ 按瓶子标签所示，加入4倍体积的无水乙醇稀释Buffer PW，于室温密封保存。□ 确认Buffer QG溶液显示为黄色。DNA浓度及纯度检测 l 回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。l DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40μg/ml单链DNA。l OD260/OD280比值应为1.7-2.0，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用ddH2O比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。操作步骤： 一、琼脂糖回收DNA 1. 配制所需浓度的琼脂糖凝胶，电泳分离DNA片段。当DNA片段分离后，将凝胶置于紫外灯下，用干净锋利的手术刀快速切下含目的片段大小的DNA凝胶。 为避免DNA片段受到损伤，应尽量减少凝胶的紫外照射时间，切胶时应尽量切去多余凝胶。2. 放入1.5ml离心管中并称取凝胶块的重量，加入3倍体积的Buffer QG（如凝胶称重结果为100mg，则其体积约等于100µl，应加入300µl Buffer QG）。 对于>2%的琼脂糖凝胶，添加6倍体积的Buffer QG。3. 50℃水浴10min（或直至凝胶完全溶解即可），水浴期间可颠倒混匀加速溶胶。 注意：若回收<300bp的DNA片段可在完全溶胶后加入一倍凝胶体积的异丙醇以提高回收率；胶块完全溶解后最好将溶液温度降至室温再上柱，因为吸附柱在室温时结合DNA能力较强。4. 凝胶完全溶解后，检查颜色是否为黄色（类似于没有溶解琼脂糖的Buffer QG）。 如果混合物的颜色为橙色或紫色，则加入10µl 3 M 醋酸钠(pH 5.0)并混合，混合物的颜色会变成黄色。DNA吸附到膜上仅在pH ≤ 7.5时有效。Buffer QG含有一种pH指示剂，在pH ≤7.5时为黄色，在较高pH时为橙色或紫色，可通过颜色轻松确定DNA结合的最佳pH。5. 将吸附柱套在2ml收集管中，并将上一步得到的溶液加入到吸附柱中，≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 6. 向吸附柱中加入500µl Buffer PW（已加入无水乙醇），≥8000×g(≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 注意：如果回收的DNA是用于盐敏感的实验，例如平末端连接实验或直接测序，建议加入Buffer PW后静置2-5min后再离心。7. 重复操作步骤7一次。 8. 倒掉收集管中的废液后将吸附柱再次套入收集管中，最大转速 (~13,400×g)离心2min以干燥吸附柱膜，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。将吸附柱套入新的1.5ml 离心管中并于室温开盖放置5-10min彻底晾干。 注意：Buffer PW中的乙醇残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。9. 向吸附柱膜中央位置悬空滴加30-50µl Buffer EB，盖上盖子室温静置2min后，最大转速 (~13,400×g)离心2min收集DNA溶液并置于-20℃保存。 注意：洗脱体积不应小于30μl，体积过少影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若后续做测序，需使用ddH2O做洗脱液，并保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率。为了提高DNA的回收量，可重复操作步骤10一次。二、从PCR反应液或者酶切反应中回收DNA 1. 将5倍体积的Buffer PB添加到1倍体积的PCR样品中，然后混匀。 例如，将500µl Buffer PB添加到100µl PCR样品（不包括油的体积），无需去除石蜡油或矿物油。2. 溶液完全溶解后，检查颜色是否为黄色。 如果混合物的颜色为红色，则加入10µl 3 M 醋酸钠(pH 5.0)并混合，混合物的颜色会变成黄色。DNA吸附到膜上仅在pH ≤ 7.5时有效。Buffer PB含有一种pH指示剂，在pH ≤7.5时为黄色，在较高pH时为红色，可通过颜色轻松确定DNA结合的最佳pH。3. 将吸附柱套在2ml收集管中，并将上一步得到的溶液加入到吸附柱中，≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 4. 向吸附柱中加入500µl Buffer PW（已加入无水乙醇），≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 注意：如果回收的DNA是用于盐敏感的实验，例如平末端连接实验或直接测序，建议加入Buffer PW后静置2-5min后再离心。5. 重复操作步骤4一次。 6. 倒掉收集管中的废液后将吸附柱再次套入收集管中，最大转速 (~13,400×g)离心2min以干燥吸附柱膜，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。将吸附柱套入新的1.5ml离心管中并于室温开盖放置5-10min彻底晾干。 7. 向吸附柱膜中央位置悬空滴加30-50µl Buffer EB，盖上盖子室温静置2min后，最大转速 (~13,400×g)离心2min收集DNA溶液并置于-20℃保存。

产品组成 FastPure Gel Extraction Kit 产品编号 EK-1104-50T EK-1104-100T 纯化次数 50次 100次 Buffer QG 30ml 60ml Buffer PB 30ml 60ml Buffer PW 12ml 24ml Buffer EB 10ml 20ml Gel Spin Columns 50 100 2ml Collection Tubes 50 100 使用手册 1 1 产品介绍 本试剂盒采用可高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统，可从各种浓度的TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收70bp-10kbp大小的DNA片段，也可以用于各种PCR体系中DNA回收，同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质，回收率可达80%以上。每个离心吸附柱每次可吸附的DNA量为20μg。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。 存储条件 该试剂盒置于室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月。Buffer QG/PB可能产生沉淀，若有沉淀使用前可在55℃水浴中预热10 min以溶解。 需要额外准备的材料 □ 无水乙醇（96%-100%） □ 无菌1.5ml离心管 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 □ 电泳时最好使用新的电泳缓冲液，以免影响电泳和回收效果。 □ 如下一步实验要求较高，核酸电泳时则应尽量使用TAE电泳缓冲液。 □ 切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对DNA造成损伤。 □ 如果回收率较低，可在胶充分溶解后检测pH值，如pH值大于7.5，可向含有DNA的胶溶液中加10-30µl 3M醋酸钠（pH5.2）将pH值调到5-7之间。 □ 回收<70bp或>10kbp的DNA片段时，应加大Buffer QG的体积，延长吸附和洗脱时间。 □ 回收率与初始DNA量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越少，回收率越低。 □ 高温及潮湿等不利环境因素对吸附柱产生影响，请将吸附柱储存于阴凉干燥的环境中。 开始前试剂准备 □ 按瓶子标签所示，加入4倍体积的无水乙醇稀释Buffer PW，于室温密封保存。 □ 确认Buffer QG溶液显示为黄色。DNA浓度及纯度检测 l 回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。 l DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40μg/ml单链DNA。 l OD260/OD280比值应为1.7-2.0，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用ddH2O比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。 操作步骤： 一、琼脂糖回收DNA 1. 配制所需浓度的琼脂糖凝胶，电泳分离DNA片段。当DNA片段分离后，将凝胶置于紫外灯下，用干净锋利的手术刀快速切下含目的片段大小的DNA凝胶。 为避免DNA片段受到损伤，应尽量减少凝胶的紫外照射时间，切胶时应尽量切去多余凝胶。 2. 放入1.5ml离心管中并称取凝胶块的重量，加入3倍体积的Buffer QG（如凝胶称重结果为100mg，则其体积约等于100µl，应加入300µl Buffer QG）。 对于>2%的琼脂糖凝胶，添加6倍体积的Buffer QG。 3. 50℃水浴10min（或直至凝胶完全溶解即可），水浴期间可颠倒混匀加速溶胶。 注意：若回收<300bp的DNA片段可在完全溶胶后加入一倍凝胶体积的异丙醇以提高回收率；胶块完全溶解后最好将溶液温度降至室温再上柱，因为吸附柱在室温时结合DNA能力较强。 4. 凝胶完全溶解后，检查颜色是否为黄色（类似于没有溶解琼脂糖的Buffer QG）。 如果混合物的颜色为橙色或紫色，则加入10µl 3 M 醋酸钠(pH 5.0)并混合，混合物的颜色会变成黄色。DNA吸附到膜上仅在pH ≤ 7.5时有效。Buffer QG含有一种pH指示剂，在pH ≤7.5时为黄色，在较高pH时为橙色或紫色，可通过颜色轻松确定DNA结合的最佳pH。 5. 将吸附柱套在2ml收集管中，并将上一步得到的溶液加入到吸附柱中，≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 6. 向吸附柱中加入500µl Buffer PW（已加入无水乙醇），≥8000×g(≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 注意：如果回收的DNA是用于盐敏感的实验，例如平末端连接实验或直接测序，建议加入Buffer PW后静置2-5min后再离心。 7. 重复操作步骤7一次。 8. 倒掉收集管中的废液后将吸附柱再次套入收集管中，最大转速 (~13,400×g)离心2min以干燥吸附柱膜，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。将吸附柱套入新的1.5ml 离心管中并于室温开盖放置5-10min彻底晾干。 注意：Buffer PW中的乙醇残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。 9. 向吸附柱膜中央位置悬空滴加30-50µl Buffer EB，盖上盖子室温静置2min后，最大转速 (~13,400×g)离心2min收集DNA溶液并置于-20℃保存。 注意：洗脱体积不应小于30μl，体积过少影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若后续做测序，需使用ddH2O做洗脱液，并保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率。为了提高DNA的回收量，可重复操作步骤10一次。 二、从PCR反应液或者酶切反应中回收DNA 1. 将5倍体积的Buffer PB添加到1倍体积的PCR样品中，然后混匀。 例如，将500µl Buffer PB添加到100µl PCR样品（不包括油的体积），无需去除石蜡油或矿物油。 2. 溶液完全溶解后，检查颜色是否为黄色。 如果混合物的颜色为红色，则加入10µl 3 M 醋酸钠(pH 5.0)并混合，混合物的颜色会变成黄色。DNA吸附到膜上仅在pH ≤ 7.5时有效。Buffer PB含有一种pH指示剂，在pH ≤7.5时为黄色，在较高pH时为红色，可通过颜色轻松确定DNA结合的最佳pH。 3. 将吸附柱套在2ml收集管中，并将上一步得到的溶液加入到吸附柱中，≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 4. 向吸附柱中加入500µl Buffer PW（已加入无水乙醇），≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 注意：如果回收的DNA是用于盐敏感的实验，例如平末端连接实验或直接测序，建议加入Buffer PW后静置2-5min后再离心。 5. 重复操作步骤4一次。 6. 倒掉收集管中的废液后将吸附柱再次套入收集管中，最大转速 (~13,400×g)离心2min以干燥吸附柱膜，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。将吸附柱套入新的1.5ml离心管中并于室温开盖放置5-10min彻底晾干。 7. 向吸附柱膜中央位置悬空滴加30-50µl Buffer EB，盖上盖子室温静置2min后，最大转速 (~13,400×g)离心2min收集DNA溶液并置于-20℃保存。

【保存条件】 室温储存，有效期1年。 【概述】 本产品用于HE染色或苏木素染色后的返蓝。苏木素在酸性条件下为离子状态，呈红色；在碱性条件下呈蓝色。组织切片经苏木素染色后，先酸性分化液分化去除过多结合的苏木素，此时苏木素呈红色或粉红色。水洗终止分化，再用弱碱性溶液处理使苏木素呈现蓝色，这个过程就是返蓝作用。HE染色中苏木素染色后的返蓝很重要，使苏木素呈现应有的蓝色。 该返蓝液为弱碱性平衡盐溶液，多用于苏木素染色后蓝化。 【使用建议】 根据实验需求，一般蓝化3-30s。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用，不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 一些组织内含有骨质或钙化灶时，含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同，较难切除完整的切片。对含钙组织最好固定之后，再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游的实验，如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸（EDTA）以及电解法脱钙。 EDTA是一种相对较好的螯合脱钙剂，对组织结构影响最小，可以较好的保存组织的某些酶类，经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢，一般脱需要数周至数月。 【使用建议】 1. 骨组织脱钙时，取材不易过厚，一般大约5mm。 2. 组织固定后，用PBS清洗3次，每次20min。 3. 组织用蒸馏水洗清洗3次，每次20min。 4. 组织转移至20～30倍体积的EDTA脱钙液中，脱钙10～30天或更长时间。如果想加快脱钙速度，可以置于37℃进行脱钙。如果必要，更换新的EDTA脱钙液继续脱钙，多数组织脱钙2周～3个月即可，每周更换一次，直至终点。亦可采用微波快速脱钙法：微波炉设在200W左右的档位，每次加热5min，依据组织厚度和密度重复3～5min，中间间隔3～5min。 5. 用蒸馏水冲洗数次。6. 常规脱水、包埋。【注意事项】 1. 厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙10~30天即可。 2. 适当加温能加快脱钙的速度，一般不应超过37～40℃，温度过高容易使骨组织造成松散解体，尤其不可大于60℃。3. 脱钙应彻底，防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间，以免脱钙过长引起组织损害。4. 脱钙用具避免使用金属容器，尽量使用玻璃容器。5. 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行，不应先脱钙后固定，以便减少组织的损伤程度。6. 每隔一段时间检测一次脱钙程度，避免脱钙过度，脱钙过度会增加组织的损伤程度，影响染色结果。7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。8. 脱钙终点的测定（物理法）：采用针刺、手掐、钳夹等方法，当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害，尽量避免用力过大或反复检测。