【保存条件】 常温运输，4℃保存12个月 【产品特点】 快速高效：无需重新制胶及电泳，抗体去除效果好； 温和配方：对转印膜上结合的靶蛋白损伤极小； 安全环保：无巯基乙醇等刺激性有毒试剂。 【概述】 本品适用于从少量样品多次检测不同蛋白质。即使样品量并不匮乏，采用这一策略多次检测同一张膜上的蛋白，能省去给药处理、蛋白电泳和膜转移等耗费性步骤。而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。可对同一张膜进行5-10次的 Western Blot 检测。 【使用建议】 1. 完成Western Blot发光检测后，用TBS/T或PBS/T漂洗膜5 min； 2. 加入10~20 ml剥离液覆盖膜。在摇床上漂洗10~20 min。剥离时间视膜上抗体结合量的多少而定（可根据抗体特异性调整时长，部分抗体可延长至60分钟）; 3. 倒掉剥离液，加入TBS/T或PBS/T漂洗膜5 min。此时可在膜上滴上显色发光液以快速检验抗体剥离效果； 4. 用合适的封闭液重新封闭膜，即可再次杂交其它抗体。 【注意事项】 1. 本品仅用于科研用途，不得用于临床或诊断相关研究； 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 SuperBlot免冰浴快速转膜液是一种改良的Towbin经典缓冲液，这种专有的配方大大提高了转移速度，而不会产生过多的热量而影响蛋白质。SuperBlot免冰浴快速转膜液一般不需要额外添加甲醇/乙醇或SDS，但它与这些添加剂兼容（可添加甲醇/乙醇0-20%），当分子量大于130KD时建议添加10-20%甲醇或乙醇。 【操作方法】 1. 使用前用去离子水将20×SuperBlot免冰浴快速转膜液稀释至1×工作液，例如将50ml 20×SuperBlot免冰浴快速转膜液加入950ml去离子水中混匀。（如分子量大于130KD，可以添加100ml-200ml乙醇，如取100ml 10×SuperBlot蛋白电泳快速转膜液加入700ml-800ml去离子水与100ml-200ml 乙醇混匀备用） 2. 做好转印三明治结构，然后转移至电泳槽中，设定恒流 400 mA，大约时间15-30分钟完成蛋白转膜。 胶浓度 6% 8% 10% 12% 推荐转膜时长 15分钟 20分钟 30分钟 35分钟 【注意事项】 1. PVDF膜需提前使用甲醇浸泡30秒以上。 2. 转印电流建议设定恒流400mA, 一般25-30分钟可以将150kD以下蛋白完全转印;小于100kD蛋白20分钟即可完全转印;对于大于150kD蛋白，建议延长5-10分钟。 3. 凝胶的浓度影响转印的效率，对于胶浓度8%,20分钟即可完成转印;对于胶浓度10%,25-30分钟即可完成转印;对于胶浓度大于 10%,建议延长5-10分钟 4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 25×蛋白电泳转移缓冲液是用于蛋白印迹实验（Western blotting）中湿法以及半干法电泳转膜的缓冲试剂。本产品按常规方法配制而成，为25×浓缩液，不含SDS和甲醇，便于储存、操作简便。 【使用建议】 本产品为25×浓缩液，临用前按下述步骤稀释： 1. 取40ml的25×电泳转移缓冲液，加入200ml无水乙醇混匀。 2. 加入蒸馏水或去离子水，定容至1L，混匀后即可使用。 3. 新配制的1×电泳转移缓冲液工作液室温可保存两周左右。 4. 本产品不含SDS，蛋白分子量较大或者疏水性较强时，为增加转膜效果，可适当添加少量SDS（参考工作浓度为0.025-0.1%）。. 【注意事项】 1. 本产品为高倍浓缩液，环境温度较低时可能会有结晶析出，可加热助溶，待溶解完全后再进行稀释使用；密封保存，防止污染。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 4ºC避光保存，有效期2年。 【概述】 TEMED即N,N,N',N'-Tetramethylethylenediamine，中文名为N,N,N',N'-四甲基二乙胺。分子式为(CH3)2NCH2CH2N(CH3)2，CAS号为110-18-9，分子量为116.20。 TEMED用于配制PAGE胶等，可催化过硫酸铵产生自由基，从而加速丙烯酰胺凝胶的聚合。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 仅限于科研使用，不可用于各种食品药品或临床治疗中。 3. 易燃，有腐蚀性，请注意防护。 4. 易挥发，使用后请盖紧瓶盖。

【保存条件】 2-8℃密封避光储藏，有效期12个月。 【概述】 β-巯基乙醇（β-Mercaptoethanol）又名2-巯基乙醇、硫基乙醇、硫代乙二醇等，英文通用缩写为ME、2-Me或β-ME。β-巯基乙醇兼具乙二醇HOCH2CH2OH）和乙二硫醇（HSCH2CH2SH）的官能团，对细胞生长有很重要的作用，它可以使血清中含硫化合物还原成谷胱甘肽，能诱导细胞增殖和延缓细胞衰老，为非特异性的激活作用；同时避免过氧化物对细胞的损害。另一个重要作用是促进分裂原的反应和DNA 合成，增加植物凝集素(PHA)对淋巴细胞的转化作用，已广泛应用于杂交瘤技术，另外，也开始用于一些难以培养的细胞。 该溶液经0.22um滤膜过滤除菌，可直接用于细胞培养。 【注意事项】 1. β-巯基乙醇在溶液中并不稳定。因此，大多数方案都需要每日补充。 2. 使用本产品时应注意无菌操作，避免污染。 3. 本产品为 55mM 浓缩液，请根据需要稀释后使用。 4. β-巯基乙醇对人体有毒，使用时请做好防护措施； 5. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 常温运输，4°C保存，有效期1年 【产品特点】 快速高效：5~10 min快速完成封闭;只结合封闭转印膜而不结合蛋白，因此不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点，与传统的脱脂奶粉和BSA封闭相比信噪比更高; 性能可靠：无蛋白配方，与抗体无交叉反应; 应用范围广：无磷酸化蛋白，无生物素，尤其适合磷酸化特异抗体及生物素检测系统，包括Western Blot及Elisa检测; 增强抗体效果：使用本封闭液后，所需的最适抗体浓度低于常规使用浓度，可大大节省抗体使用量。 【概述】 本品专为快速高效封闭Western Blot转印膜及Elisa检测而设计，采用无蛋白配方，避免抗体与封闭剂的非特异结合，可最大程度地降低背景。同时，本封闭剂无内源的磷酸化蛋白及生物素，对磷酸化特异抗体及生物素检测也不会产生干扰。本封闭剂不与蛋白产生非特异性结合，因而只封闭膜而不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点，大大提高了抗体检测灵敏度。 实验表明本封闭剂对许多抗体都有不同程度的信号增强作用。然而这种信号增强作用因抗体而异，对某一特定抗体，并不一定具有确定的信号增强作用。 【使用建议】 1. 完成转膜后，将转印膜放入到杂交孵育盒中，加入10~20 mL TBS/T 或PBS/T; 2. 往TBS/T或PBS/T中加入1/4体积的无蛋白快速封闭液，置于摇床轻轻摇动，室温封闭约10min(即 配即用); 注意:使用本品通常封闭5~15min均可;经多种抗体的测试封闭10min的效果显著优于常规的BSA 封闭1 h。对于一些背景非常高的抗体，可以尝试将封闭时间延长为30~60 min。如有特殊需要也可4°C封闭过夜。 3. 封闭后的膜即可用于一抗孵育等后续实验。 【注意事项】 1. 注意: 没有任何一种封闭剂能适合所有抗原和抗体检测系统。如出现本试剂不适合的抗体，请替换使用其它种类的封闭剂如BSA或脱脂奶粉等； 2. 本品仅用于科研用途，不得用于临床或诊断相关研究； 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 常温运输，4°C保存，有效期1年 【产品特点】 快速高效：5~10 min快速完成封闭;只结合封闭转印膜而不结合蛋白，因此不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点，与传统的脱脂奶粉和BSA封闭相比信噪比更高; 性能可靠：无蛋白配方，与抗体无交叉反应; 应用范围广：无磷酸化蛋白，无生物素，尤其适合磷酸化特异抗体及生物素检测系统，包括Western Blot及Elisa检测; 增强抗体效果：使用本封闭液后，所需的最适抗体浓度低于常规使用浓度，可大大节省抗体使用量。 【概述】 本品专为快速高效封闭Western Blot转印膜及Elisa检测而设计，采用无蛋白配方，避免抗体与封闭剂的非特异结合，可最大程度地降低背景。同时，本封闭剂无内源的磷酸化蛋白及生物素，对磷酸化特异抗体及生物素检测也不会产生干扰。本封闭剂不与蛋白产生非特异性结合，因而只封闭膜而不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点，大大提高了抗体检测灵敏度。 实验表明本封闭剂对许多抗体都有不同程度的信号增强作用。然而这种信号增强作用因抗体而异，对某一特定抗体，并不一定具有确定的信号增强作用。 【使用建议】 1. 完成转膜后，将转印膜放入到杂交孵育盒中，加入10~20 mL TBS/T 或PBS/T; 2. 往TBS/T或PBS/T中加入1/4体积的无蛋白快速封闭液，置于摇床轻轻摇动，室温封闭约10min(即 配即用); 注意:使用本品通常封闭5~15min均可;经多种抗体的测试封闭10min的效果显著优于常规的BSA 封闭1 h。对于一些背景非常高的抗体，可以尝试将封闭时间延长为30~60 min。如有特殊需要也可4°C封闭过夜。 3. 封闭后的膜即可用于一抗孵育等后续实验。 【注意事项】 1. 注意: 没有任何一种封闭剂能适合所有抗原和抗体检测系统。如出现本试剂不适合的抗体，请替换使用其它种类的封闭剂如BSA或脱脂奶粉等； 2. 本品仅用于科研用途，不得用于临床或诊断相关研究； 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20ºC保存，有效期2年 【概述】 适用于包括细胞瞬时转染、慢病毒包装、腺病毒包装、AAV病毒包装、逆转录病毒等病毒包装时的转染，转染效率可高达90%以上，包装效果与其它进口转染试剂无异。 本试剂经过0.22μm过滤器除菌处理，可直接使用。 【操作方法】 对于贴壁细胞（以下均以6孔板为例，其它培养皿或培养板请根据相应面积换算）： 1. 将细胞培养于培养皿或培养板内，通常在铺板后1-2天内长到70-90%。 2. 在转染前1-2小时，吸去细胞培养液，更换为新鲜的不含抗生素的完全培养液2ml。 3. 取2-4μg待转染的质粒DNA (质粒总体积不宜超过20μl，若有多种质粒请混匀)，以质量体积比1：3加入转染试剂6~12μl（如2μg待转染的质粒DNA加入转染试剂6μl）。 4. 混匀后，室温孵育3-5分钟。 5. 把DNA-转染试剂混合物中加入500μl opti-MEM（若无opti-MEM可使用无血清无双抗的DMEM或1640，具体根据转染细胞使用的培养基）,充分混匀后静置10-15分钟。 6. 后均匀滴加到整个6孔板内（加入前吸出原培养板中500μl培养基），并置于含5%二氧化碳的37ºC细胞培养箱内培养。 7. 在转染后4-6小时左右换液（毒性较小，亦可不换），更换为2ml新鲜的完全培养液，继续培养。 8. 通常在转染约24-48小时后就可以检测到转染基因的表达。 【注意事项】 1. 注意无菌操作，防止污染。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 15-25℃保存12个月有效，4℃保存可延期效期至24个月 【操作方法】 I. 样本处理 1. 组织样本处理：用匀浆器或其他类似设备匀化组织样本机械破坏装置，每500μL最多使用50 mg组织NewZOL LS。 对于DNA含量高的组织（例如脾脏），建议使用25 mg组织/ 500μL试剂。 2. 贴壁细胞样本处理：除去细胞培养基，通过向培养皿（直径3.5 cm，10 cm2）中加入至少1 mL NewZOL LS并通过反复吸移来确保完全裂解。（根据培养皿面积而不是细胞数计算试剂量。试剂量不足将导致分离的RNA受到DNA污染。残留的匀浆可以在-20至-80°C下保存至少一年，以备后用。） 3. 悬浮细胞样本处理：沉淀细胞，并通过添加NewZOL LS直接裂解。 每5×106个细胞至少加入500μL NewZOL LS，移液器吹打数次裂解细胞。（添加NewZOL LS之前请勿洗涤细胞，细胞洗涤可能会导致RNA降解。） 4. 液体样本处理：每200μL液体样品中加入500μL NewZOL LS进行均质化和裂解。对于小于200μL的样品体积，请添加500μLNewZOL LS并加水至最终体积为700μL。 5. 富含脂质样本处理：如上所述均质化富含脂质的样品。将样品以12,000×g离心5分钟。 离心后，样品顶部会出现一层脂肪。用移液器吸头尖端刺穿上层，然后将上清液转移到新管中。 II. RNA提取 1. 每使用500μL NewZOL LS的裂解液中加入200μL无RNase的水至裂解液中。剧烈摇动样品15秒钟。在室温下孵育5分钟。（对于包含50 mg组织/ 500μL NewZOL LS的样品，建议在室温下孵育15分钟。） 2. 在室温下以12,000×g离心样品15分钟。含有DNA，蛋白质和多糖的半固体沉淀物形成在试管底部。 RNA仍溶解在上清液中。 3. 将500μL上清液转移至新管中。 勿吸太干净防止污染，在DNA /蛋白质沉淀上方保留一小部分上清液。（含有DNA，蛋白质和多糖的沉淀物占匀浆-水混合物总量的约10％。） 4. 加入等体积异丙醇，上下颠倒混匀以沉淀RNA，在室温下孵育样品10分钟。 5. 将样品以12,000×g离心10分钟，除去并丢弃上清液。 通常，在管的底部以白色沉淀的形式获得RNA。对于脾脏样品，RNA在试管底部形成凝胶状膜。用乙醇洗涤后，膜变得更可见。 6. 加入500μL 75％ 乙醇（无RNase水配制）洗涤，轻弹管底使沉淀悬浮，上下颠倒混匀。对于较大的试管，按比例添加75% 乙醇溶液。 7. 将沉淀以8,000×g的速度离心3分钟。移液去除沉淀中的乙醇，重复乙醇洗涤步骤一次。静置5-10分钟待乙醇挥发，无需过份干燥成固体，干燥成固体的RNA沉淀不易溶解 8. 将RNA沉淀溶于无RNase的水中，在室温下涡旋3分钟，以实现有效溶解。将得到的RNA进行检测或-65℃长期保存（若需更长时间保存请添加适量RNA Chill（ES-8520））。 【注意事项】 1. 4℃保存时会有沉淀产生为正常现象，使用时需恢复常温至彻底溶解后使用。 2. RNA 酶污染注意事项： a. 提取过程用品均经过去RNA酶处理：玻璃制品可以150 °C烘烤4小时 ，塑料制品可浸泡于0.5M NaOH溶液后用清水冲洗并高压灭菌，吸头及离心管类尽量使用一次性无酶吸头及离心管 b. 佩戴手套及口罩及护目镜：皮肤上常含有细菌和霉菌，可污染RNA制备，且同时是RNA酶来源，同时New ZOL LS对皮肤有一定毒性，建议佩戴手套及口罩及护目镜。 c. 尽量于通风橱内提取：避免吸入提取过程中有毒物质。 3. 安全性问题： a. 本品在与皮肤接触及吞咽有毒性，可导致烧伤。与皮肤接触后，应立即用洗涤剂和大量水冲洗。如感到身体不适，应立即就医

【保存条件】 15-25℃保存12个月有效，4℃保存可延期效期至24个月 【操作方法】 I. 样本处理 1. 组织样本处理：用匀浆器或其他类似设备匀化组织样本机械破坏装置，每500μL最多使用50 mg组织NewZOL LS。 对于DNA含量高的组织（例如脾脏），建议使用25 mg组织/ 500μL试剂。 2. 贴壁细胞样本处理：除去细胞培养基，通过向培养皿（直径3.5 cm，10 cm2）中加入至少1 mL NewZOL LS并通过反复吸移来确保完全裂解。（根据培养皿面积而不是细胞数计算试剂量。试剂量不足将导致分离的RNA受到DNA污染。残留的匀浆可以在-20至-80°C下保存至少一年，以备后用。） 3. 悬浮细胞样本处理：沉淀细胞，并通过添加NewZOL LS直接裂解。 每5×106个细胞至少加入500μL NewZOL LS，移液器吹打数次裂解细胞。（添加NewZOL LS之前请勿洗涤细胞，细胞洗涤可能会导致RNA降解。） 4. 液体样本处理：每200μL液体样品中加入500μL NewZOL LS进行均质化和裂解。对于小于200μL的样品体积，请添加500μLNewZOL LS并加水至最终体积为700μL。 5. 富含脂质样本处理：如上所述均质化富含脂质的样品。将样品以12,000×g离心5分钟。 离心后，样品顶部会出现一层脂肪。用移液器吸头尖端刺穿上层，然后将上清液转移到新管中。 II. RNA提取 1. 每使用500μL NewZOL LS的裂解液中加入200μL无RNase的水至裂解液中。剧烈摇动样品15秒钟。在室温下孵育5分钟。（对于包含50 mg组织/ 500μL NewZOL LS的样品，建议在室温下孵育15分钟。） 2. 在室温下以12,000×g离心样品15分钟。含有DNA，蛋白质和多糖的半固体沉淀物形成在试管底部。 RNA仍溶解在上清液中。 3. 将500μL上清液转移至新管中。 勿吸太干净防止污染，在DNA /蛋白质沉淀上方保留一小部分上清液。（含有DNA，蛋白质和多糖的沉淀物占匀浆-水混合物总量的约10％。） 4. 加入等体积异丙醇，上下颠倒混匀以沉淀RNA，在室温下孵育样品10分钟。 5. 将样品以12,000×g离心10分钟，除去并丢弃上清液。 通常，在管的底部以白色沉淀的形式获得RNA。对于脾脏样品，RNA在试管底部形成凝胶状膜。用乙醇洗涤后，膜变得更可见。 6. 加入500μL 75％ 乙醇（无RNase水配制）洗涤，轻弹管底使沉淀悬浮，上下颠倒混匀。对于较大的试管，按比例添加75% 乙醇溶液。 7. 将沉淀以8,000×g的速度离心3分钟。移液去除沉淀中的乙醇，重复乙醇洗涤步骤一次。静置5-10分钟待乙醇挥发，无需过份干燥成固体，干燥成固体的RNA沉淀不易溶解 8. 将RNA沉淀溶于无RNase的水中，在室温下涡旋3分钟，以实现有效溶解。将得到的RNA进行检测或-65℃长期保存（若需更长时间保存请添加适量RNA Chill（ES-8520））。 【注意事项】 1. 4℃保存时会有沉淀产生为正常现象，使用时需恢复常温至彻底溶解后使用。 2. RNA 酶污染注意事项： a. 提取过程用品均经过去RNA酶处理：玻璃制品可以150 °C烘烤4小时 ，塑料制品可浸泡于0.5M NaOH溶液后用清水冲洗并高压灭菌，吸头及离心管类尽量使用一次性无酶吸头及离心管 b. 佩戴手套及口罩及护目镜：皮肤上常含有细菌和霉菌，可污染RNA制备，且同时是RNA酶来源，同时New ZOL LS对皮肤有一定毒性，建议佩戴手套及口罩及护目镜。 c. 尽量于通风橱内提取：避免吸入提取过程中有毒物质。 3. 安全性问题： a. 本品在与皮肤接触及吞咽有毒性，可导致烧伤。与皮肤接触后，应立即用洗涤剂和大量水冲洗。如感到身体不适，应立即就医