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SDT裂解液-100ml
ECOTOP常用生化试剂货号:ED-8452-100ml(货期:1-2天)售价:¥180.00
SDT裂解液-100ml
【保存条件】 4℃保存,有效期6个月。-20℃保存,有效期1年。 【概述】 SDT裂解缓冲液用于裂解哺乳动物细胞和组织。其含有SDS、Tris-HCl、DTT,对样本全蛋白有很好的提取效果。 但其中所含的SDS会使蛋白质变性失活,因此不适合后续活性相关实验。试剂请于避光保存,以确保其稳定性。 【使用建议】 1. 取100mg动物组织或细胞(组织提前剪成小块)加入500μl PBS溶液中初步匀浆(60 Hz,45s),再加入500μl SDT裂解液。 2. 将上一步加有SDT裂解液的动物组织或细胞于4℃进行匀浆(60 Hz,20s)。 3. 低速短暂离心将管壁液体离下,后置于沸水浴(或100℃)3min。 4. 再次使用探头超声:40-50W超声5s,间隔5s,一共6个循环。 5. 将溶液置于沸水浴(或100℃)2min,10000g离心10min。 6. 收集上清进行后续实验。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 该试剂仅用于科研领域,不得用于临床诊断或其他用途。 3. SDT裂解液不适用于后续做与活性相关的实验,如免疫共沉淀。在进行蛋白质浓度测定时由于SDT裂解液中含有SDS和DTT,因此 Bradford法和BCA方法不适用,而应选择去垢剂和还原剂均兼容的荧光法测定蛋白质浓度。各种裂解液中含有的去垢剂均会影响胰蛋白酶活性,并且对质谱分析产生很大影响,因此均需要在蛋白质样品酶解前除去。 4. SDT裂解液中含有较高浓度的SDS,在低温下可能析出为正常现象,使用前只需将溶液置于37℃加热5-10min或至溶解即可。

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