【保存条件】 4℃避光保存一年有效，-20℃避光保存两年有效。 【概述】 Cell Counting Kit-8试剂盒简称CCK-8试剂盒，可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。该试剂主要用途有：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验。 【使用方法（仅供参考）】 1. 用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量。通常细胞增殖实验每孔加入100μl 2×103个细胞，细胞毒性实验每孔加入100μl 5×103个细胞(具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小、细胞增殖速度的快慢等因素决定，推荐进行预实验选择合适的细胞数量)。按照实验需要，进行培养并给予0-10μl特定的药物刺激。 2. 每孔加入10μl CCK-8溶液（如果起始的培养体积为200μl，则需加入20μl CCK-8溶液，其它情况以此类推）。可以用加了相应体积细胞培养液和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。如果担心所使用的药物会干扰检测，需设置加了相应量细胞培养液、药物和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。 3. 在细胞培养箱内（37°C）继续孵育0.5-4小时，对于大多数情况孵育1小时即可。时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，初次实验时可以在0.5、1、2和4小时后分别用酶标仪检测，然后选取吸光度范围比较适宜的时间点用于后续实验。 4. 在450nm测定吸光度。可以使用吸光度在430-490nm之间的滤光片，但是450 nm滤光片的检测灵敏度最高。 5. 计算方法 细胞存活率 = [(As-Ab) / (Ac-Ab)]×100% 抑制率 = [(Ac-As) / (Ac-Ab)]×100% As：实验孔(含有细胞的培养基、CCK-8、待测物质) Ac：对照孔(含有细胞的培养基、CCK-8、没有待测物质) Ab：空白孔(不含细胞和待测物质的培养基、CCK-8) 【注意事项】 1. 初次实验可选择3-5个孔进行预实验选择合适的细胞数量。 2. 由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发问题。一方面，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加相同量的PBS、水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。 3. 当有还原性物质存在时会影响CCK- 8的测定，增加OD值；在有氧化性物质存在时会抑制测定反应的发生，减小OD值；在有酚红存在的情况下，会增加空白吸收，但不影响测定，扣除空白吸收即可。 4. 在做加药实验时，如果药物具有还原性，就会和CCK- 8试剂发生显色反应，增加吸光度。解决办法：首先要确认药物是否有吸收，在含有药物的培养基中加入CCK- 8，测定450 nm的吸光度，如果它的吸光度比不含药物的培养基 (只加CCK-8) 的吸光度高，则证明药物有影响，可在加CCK- 8之前更换培养基，去掉药物的影响。 5. 如果测定的OD值太低可适当增加细胞数量或延长加入CCK-8溶液后的染色时间。 6. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。 7. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。 8. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 4℃避光保存一年有效，-20℃避光保存两年有效。 【概述】 Cell Counting Kit-8试剂盒简称CCK-8试剂盒，可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。该试剂主要用途有：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验。 【使用方法（仅供参考）】 1. 用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量。通常细胞增殖实验每孔加入100μl 2×103个细胞，细胞毒性实验每孔加入100μl 5×103个细胞(具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小、细胞增殖速度的快慢等因素决定，推荐进行预实验选择合适的细胞数量)。按照实验需要，进行培养并给予0-10μl特定的药物刺激。 2. 每孔加入10μl CCK-8溶液（如果起始的培养体积为200μl，则需加入20μl CCK-8溶液，其它情况以此类推）。可以用加了相应体积细胞培养液和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。如果担心所使用的药物会干扰检测，需设置加了相应量细胞培养液、药物和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。 3. 在细胞培养箱内（37°C）继续孵育0.5-4小时，对于大多数情况孵育1小时即可。时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，初次实验时可以在0.5、1、2和4小时后分别用酶标仪检测，然后选取吸光度范围比较适宜的时间点用于后续实验。 4. 在450nm测定吸光度。可以使用吸光度在430-490nm之间的滤光片，但是450 nm滤光片的检测灵敏度最高。 5. 计算方法 细胞存活率 = [(As-Ab) / (Ac-Ab)]×100% 抑制率 = [(Ac-As) / (Ac-Ab)]×100% As：实验孔(含有细胞的培养基、CCK-8、待测物质) Ac：对照孔(含有细胞的培养基、CCK-8、没有待测物质) Ab：空白孔(不含细胞和待测物质的培养基、CCK-8) 【注意事项】 1. 初次实验可选择3-5个孔进行预实验选择合适的细胞数量。 2. 由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发问题。一方面，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加相同量的PBS、水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。 3. 当有还原性物质存在时会影响CCK- 8的测定，增加OD值；在有氧化性物质存在时会抑制测定反应的发生，减小OD值；在有酚红存在的情况下，会增加空白吸收，但不影响测定，扣除空白吸收即可。 4. 在做加药实验时，如果药物具有还原性，就会和CCK- 8试剂发生显色反应，增加吸光度。解决办法：首先要确认药物是否有吸收，在含有药物的培养基中加入CCK- 8，测定450 nm的吸光度，如果它的吸光度比不含药物的培养基 (只加CCK-8) 的吸光度高，则证明药物有影响，可在加CCK- 8之前更换培养基，去掉药物的影响。 5. 如果测定的OD值太低可适当增加细胞数量或延长加入CCK-8溶液后的染色时间。 6. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。 7. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。 8. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 2-8℃保存，有效期1年 【概述】 台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒(Trypan Blue Staining Cell Viability Assay Kit），是利用正常的健康细胞能够排斥台盼蓝，而丧失细胞膜完整性的细胞可以被台盼蓝染色研制而成。严格来说，台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性，通常认为细胞膜丧失完整性，即可认为细胞已死亡。 台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。 台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成，并且操作非常简单。 本试剂盒足够检测100个细胞样品。 【使用建议（仅供参考）】 1. 收集细胞：对于贴壁细胞先用胰酶和/或EDTA消化下细胞。对于悬浮细胞，则可以直接收集细胞。把收集的细胞在1000-2000g离心1分钟，弃上清，用1毫升或根据细胞的量用适当细胞重悬液重新悬起细胞。 2.台盼蓝染色：吸取100微升重悬的细胞到一塑料离心管内，加入100微升台盼蓝染色液(2X)，轻轻混匀，染色3分钟(染色3分钟时间已经足够，染色时间可以更长一些，但不宜超过10分钟)。注：对于重悬于细胞培养液中的细胞，也可以直接加入等体积的台盼蓝染色液(2X)进行染色。 3.计数：吸取少量经过染色的细胞，用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量，每个细胞样品至少数500个细胞，数出蓝色细胞和细胞总数。细胞存活率＝(细胞总数－蓝色细胞数)/细胞总数×100% 【注意事项】 1. 本试剂盒提供的两种溶液都是无菌的，使用时最好在超净台内进行，避免细菌污染。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 本产品长时间存放可能会出现少量颗粒状沉淀，可在37ºC水浴约10分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。 4. 台盼蓝对人体有毒，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。 5. 该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

FFPE Tissue Total Protein Extraction Kit (Western Blot & RPA)

FFPE Tissue Total Protein Extraction Kit (Western Blot & RPA)

FFPE Tissue Total Protein Extraction Kit (Western Blot & RPA)

产品介绍 SDS-PAGE蛋白电泳制胶试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶)。本试剂盒约可配制30-50块胶。 存储条件 4ºC保存，有效期1年。30% Acr-Bis(29:1)和TEMED 4℃避光保存。凝胶聚合催化剂加水配制成10%溶液后，分装成小管-20℃保存，通常半年内有效(建议分次称量配制)。

【保存条件】 4℃保存，有效期1年 【概述】 考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置（Imax），由465nm变为595nm，在一定的浓度范围内，测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，样品中巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM，但受略高浓度的去垢剂影响，需确保SDS的浓度低于0.1%，Triton X-100低于0.1%，Tween 20, 60, 80低于0.06%。 【使用方法】 1. 蛋白标准液的准备 a. 蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，如果蛋白样品所在溶液不含有干扰本试剂盒检测的物质，也可以用0.9%NaCl、PBS或水稀释标准品。蛋白标准液(5mg/ml BSA)如果冻存，请完全融化并混匀后使用。 b. 按照下表配制0、0.125、0.25、0.5、0.75、1、1.5mg/ml蛋白标准。每次稀释时注意充分混匀。如果有必要可以增加设置 0.0625mg/ml的蛋白标准。 编号 稀释液体积 标准品体积 最终浓度 A 70µl 5mg/ml BSA 30µl 1.5mg/ml B 30µl 从A管取60µl 1mg/ml C 20µl 从B管取60µl 0.75mg/ml D 30µl 从C管取60µl 0.5mg/ml E 60µl 从D管取60µl 0.25mg/ml F 60µl 从E管取60µl 0.125mg/ml G 60µl 0µl 0mg/ml 2. 蛋白浓度测定 a. 取5µl不同浓度蛋白标准加到96孔板的蛋白标准孔中。 b. 取5µl样品到96孔板的样品孔中。如果样品不足5µl，需加标准品稀释液补足到5µl。请注意记录样品体积。 c. 各孔加入250µl G250染色液。 d. 用酶标仪测定A595，或560-610nm之间的其它波长的吸光度。可以立即测定吸光度，也可以在2小时内测定，2小时内检测数据无显著变化。 e. 根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品中的蛋白浓度。 【注意事项】 1. 本品BSA因每次使用量较小，推荐分装使用。 2. 不同96板的吸收值会有不同，得到OD有区别为正常现象（保证数据呈线性关系） 3. 请使用96孔底部透明板（如普通细胞培养板）检测，最佳波长为595nm。 4. 将G250染色液回复至室温后使用，有利于提高检测灵敏度。 5. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 4℃保存，有效期1年 【概述】 考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置（Imax），由465nm变为595nm，在一定的浓度范围内，测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，样品中巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM，但受略高浓度的去垢剂影响，需确保SDS的浓度低于0.1%，Triton X-100低于0.1%，Tween 20, 60, 80低于0.06%。 【使用方法】 1. 蛋白标准液的准备 a. 蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，如果蛋白样品所在溶液不含有干扰本试剂盒检测的物质，也可以用0.9%NaCl、PBS或水稀释标准品。蛋白标准液(5mg/ml BSA)如果冻存，请完全融化并混匀后使用。 b. 按照下表配制0、0.125、0.25、0.5、0.75、1、1.5mg/ml蛋白标准。每次稀释时注意充分混匀。如果有必要可以增加设置 0.0625mg/ml的蛋白标准。 编号 稀释液体积 标准品体积 最终浓度 A 70µl 5mg/ml BSA 30µl 1.5mg/ml B 30µl 从A管取60µl 1mg/ml C 20µl 从B管取60µl 0.75mg/ml D 30µl 从C管取60µl 0.5mg/ml E 60µl 从D管取60µl 0.25mg/ml F 60µl 从E管取60µl 0.125mg/ml G 60µl 0µl 0mg/ml 2. 蛋白浓度测定 a. 取5µl不同浓度蛋白标准加到96孔板的蛋白标准孔中。 b. 取5µl样品到96孔板的样品孔中。如果样品不足5µl，需加标准品稀释液补足到5µl。请注意记录样品体积。 c. 各孔加入250µl G250染色液。 d. 用酶标仪测定A595，或560-610nm之间的其它波长的吸光度。可以立即测定吸光度，也可以在2小时内测定，2小时内检测数据无显著变化。 e. 根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品中的蛋白浓度。 【注意事项】 1. 本品BSA因每次使用量较小，推荐分装使用。 2. 不同96板的吸收值会有不同，得到OD有区别为正常现象（保证数据呈线性关系） 3. 请使用96孔底部透明板（如普通细胞培养板）检测，最佳波长为595nm。 4. 将G250染色液回复至室温后使用，有利于提高检测灵敏度。 5. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温避光保存，有效期1年 【概述】 BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成， 实现了蛋白浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和高兼容性。灵敏度高，检测浓度下限达到25µg/ml，最小检测蛋白量达到0.5µg，待测样品体积为1-20µl。在50-2000µg/ml浓度范围内有较好的线性关系。 BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的 Tween20、60、80。但本试剂盒受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇(DTT) 低于1mM，β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于0.01%。不适用BCA法时建议试用本司生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒。 【操作方法】 1.配制BCA工作液： 依据样品数量，将试剂A和试剂B按体积比50:1配制适量BCA工作液，并充分混匀。 注：配制BCA工作液前请将试剂A摇晃混匀，观察是否析出结晶，如若析出结晶，可37℃水浴促溶。 2.稀释蛋白标准品： 蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，如果蛋白样品所在溶液不含有干扰本试剂盒检测的物质，也可以用0.9%NaCl、PBS或水稀释标准品。蛋白标准液(5mg/ml BSA)如果冻存，请完全融化并混匀后使用。具体如下表： 编号 稀释液体积 蛋白标准液体积 最终浓度 A 70µl 5mg/ml BSA 30µl 1.5mg/ml B 30µl 从A管取60µl 1mg/ml C 20µl 从B管取60µl 0.75mg/ml D 30µl 从C管取60µl 0.5mg/ml E 60µl 从D管取60µl 0.25mg/ml F 60µl 从E管取60µl 0.125mg/ml G 60µl 0µl 0mg/ml 3.蛋白浓度的检测 a. 取5µl不同浓度蛋白标准加到96孔板的蛋白标准孔中。 b. 取5µl样品到96孔板的样品孔中。如果样品不足5µl，需加标准品稀释液补足到5µl。请注意记录样品体积。 c. 各孔加入195µl BCA工作液。 37℃放置30分钟。 注:也可以室温放置2小时，或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时，颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温 度升高而加快。如果浓度较低，适合在较高温度孵育，或适当延长孵育时间。 d. 用酶标仪测定A595，或560-610nm之间的其它波长的吸光度。可以立即测定吸光度，也可以在2小时内测定，2小时内检测数据无显著变化。 4.数据计算 a. 以不同浓度的蛋白标准液为横坐标 b. 以不同浓度的蛋白标准测得OD值（多孔则为平均OD）为纵坐标 c. 建立线性关系，获得公式（如右图中所示(本产品实际检测)，若测得 样品OD=0.6则0.6=0.4995x+0.4151，计算得浓度x=0.37mg/ml） 【注意事项】 1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 不同96板的吸收值会有不同，得到OD有区别为正常现象（保证数据呈线性关系）。 3. 蛋白标准液（5mg/ml）收到后尽快分装，避免反复冻融。 4. BCA 试剂A在低温环境下会析出结晶，可适当37℃水浴促溶后使用。 5. 请使用96孔底部透明板（如普通细胞培养板）检测，最佳波长为595nm。