【保存条件】 -20℃保存一年有效；短期频繁使用可4℃保存1个月。 【概述】 细胞培养基中有时加入适量浓度的抗生素，可以有效防止微生物的污染。本品含有抗支原体药物，在细胞培养中不需额外添加青霉素-链霉素双抗，使用时按照100倍稀释使用即可。 【使用建议（仅供参考）】 1. 在无菌的细胞培养液中直接添加：按照每500ml细胞培养液添加5ml的比例加入双抗Plus(100×)，混匀即可使用。 2. 配制非无菌细胞培养液时加入，然后再过滤除菌：配制细胞培养液时按照每配制1L细胞培养液加入10ml 的比例加入双抗Plus(100×)，配制完成后过滤除菌即可使用。 【注意事项】 1. -20℃保存时产生沉淀属于正常现象，室温或37℃加热复溶摇匀即可，不影响实验结果。 2. 尽量避免反复冻融，建议分装使用。 3. 注意无菌操作，尽量避免污染。 4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 5. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。

【保存条件】 -20℃保存一年有效；短期频繁使用可4℃保存1个月。 【概述】 细胞培养基中有时加入适量浓度的抗生素，可以有效防止微生物的污染。本品含有抗支原体药物，在细胞培养中不需额外添加青霉素-链霉素双抗，使用时按照100倍稀释使用即可。 【使用建议（仅供参考）】 1. 在无菌的细胞培养液中直接添加：按照每500ml细胞培养液添加5ml的比例加入双抗Plus(100×)，混匀即可使用。 2. 配制非无菌细胞培养液时加入，然后再过滤除菌：配制细胞培养液时按照每配制1L细胞培养液加入10ml 的比例加入双抗Plus(100×)，配制完成后过滤除菌即可使用。 【注意事项】 1. -20℃保存时产生沉淀属于正常现象，室温或37℃加热复溶摇匀即可，不影响实验结果。 2. 尽量避免反复冻融，建议分装使用。 3. 注意无菌操作，尽量避免污染。 4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 5. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。

【保存条件】 -20℃保存一年有效；短期频繁使用可4℃保存1个月。 【概述】 细胞培养基中有时加入适量浓度的抗生素，可以有效防止微生物的污染。本品含有抗支原体药物，在细胞培养中不需额外添加青霉素-链霉素双抗，使用时按照100倍稀释使用即可。 【使用建议（仅供参考）】 1. 在无菌的细胞培养液中直接添加：按照每500ml细胞培养液添加5ml的比例加入双抗Plus(100×)，混匀即可使用。 2. 配制非无菌细胞培养液时加入，然后再过滤除菌：配制细胞培养液时按照每配制1L细胞培养液加入10ml 的比例加入双抗Plus(100×)，配制完成后过滤除菌即可使用。 【注意事项】 1. -20℃保存时产生沉淀属于正常现象，室温或37℃加热复溶摇匀即可，不影响实验结果。 2. 尽量避免反复冻融，建议分装使用。 3. 注意无菌操作，尽量避免污染。 4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 5. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。

【保存条件】 4℃避光保存，有效期1年 【概述】 HEPES 即羟乙基呱嗪乙硫磺酸（N’-a-hydroxythylpiperazine-N’-ethanesulfanic acid ）是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的 pH范围。有效缓冲范围为pH6.8-8.2。常用于配制蛋白提取缓冲液、细胞培养用缓冲液等。 HEPES 用于细胞培养时使用终浓度为 10-25mM， 在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的 pH 值。ECOTOP生产的 HEPES 缓冲液均经过无菌处理，可直接用于细胞培养。4℃保存可延长产品保质期，长期不用建议低温保存。 【注意事项】 1. HEPES溶液在使用过程中应该避免微生物污染。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 无菌去离子水用途广泛，可用于溶液的配制和分子生物学实验中的普通PCR体系构建等方面。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用，不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 Hank's液是生物学实验中最常用的平衡盐溶液（Hank’s Balanced Salt Solution,HBSS），主要用于细胞培养取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、以及配制其他试剂等。 D-Hank's与Hank's的一个主要区别在于前者不含有钙和镁离子，因此D-Hank's可用于配制胰蛋白酶消化液(钙镁离子可抑制胰蛋白酶活性)。缓冲液中酚红起pH指示作用。 该HBSS缓冲液为即用型，经过滤除菌，可以直接用于细胞培养过程中细胞的洗涤等常规用途，使用前不必再进行稀释或过滤除菌等任何处理。 【注意事项】 1. HBSS溶液在使用过程中应该避免微生物污染。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 Hank's液是生物学实验中最常用的平衡盐溶液（Hank’s Balanced Salt Solution,HBSS），主要用于细胞培养取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、以及配制其他试剂等。 D-Hank's与Hank's的一个主要区别在于前者不含有钙和镁离子，因此D-Hank's可用于配制胰蛋白酶消化液(钙镁离子可抑制胰蛋白酶活性)。缓冲液中酚红起pH指示作用。 该HBSS缓冲液为即用型，经过滤除菌，可以直接用于细胞培养过程中细胞的洗涤等常规用途，使用前不必再进行稀释或过滤除菌等任何处理。 【注意事项】 1. HBSS溶液在使用过程中应该避免微生物污染。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 Hank's液是生物学实验中最常用的平衡盐溶液（Hank’s Balanced Salt Solution,HBSS），主要用于细胞培养取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、以及配制其他试剂等。 D-Hank's与Hank's的一个主要区别在于前者不含有钙和镁离子，因此D-Hank's可用于配制胰蛋白酶消化液(钙镁离子可抑制胰蛋白酶活性)。缓冲液中酚红起pH指示作用。 该HBSS缓冲液为即用型，经过滤除菌，可以直接用于细胞培养过程中细胞的洗涤等常规用途，使用前不必再进行稀释或过滤除菌等任何处理。 【注意事项】 1. HBSS溶液在使用过程中应该避免微生物污染。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 Hank's液是生物学实验中最常用的平衡盐溶液（Hank’s Balanced Salt Solution,HBSS），主要用于细胞培养取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、以及配制其他试剂等。 D-Hank's与Hank's的一个主要区别在于前者不含有钙和镁离子，因此D-Hank's可用于配制胰蛋白酶消化液(钙镁离子可抑制胰蛋白酶活性)。缓冲液中酚红起pH指示作用。 该HBSS缓冲液为即用型，经过滤除菌，可以直接用于细胞培养过程中细胞的洗涤等常规用途，使用前不必再进行稀释或过滤除菌等任何处理。 【注意事项】 1. HBSS溶液在使用过程中应该避免微生物污染。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 4℃保存，一年有效 【概述】 潮霉素B是一种氨基糖苷类抗生素，可通过抑制蛋白质合成来对抗细菌，真菌和高级真核生物。潮霉素B最初是作为抗蠕虫药开发的，在研究实验室中主要用于选择和维持带有潮霉素抗性基因的细胞。 【操作方法】 1. 常用筛选浓度 注意：潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。 一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。 2. 杀灭曲线的建立 注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素最低浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。 1）第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。 2）根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。 终浓度（μg/mL） 培养基体积（ml） 5mg/ml潮霉素B加入体积（ml） 50 9.9 0.1 100 9.8 0.2 250 9.5 0.5 500 9.0 1.0 750 8.5 1.5 1000 8.0 2.0 3）第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。 4）接下来每3-4天更换新的含药物培养基。 5）按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。 3. 稳定转染细胞的筛选 1）转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。 注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%。 2）每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。 3）筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。 4）挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。 5）之后更换正常培养基培养即可。 【注意事项】 1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 本品为有毒化合物，避免与皮肤和眼睛接触，请小心操作。