【保存条件】 -20℃保存一年 【概述】 细胞培养基中有时加入适量浓度的抗生素，可以有效防止微生物的污染。本品青霉素的含量为10kU/ml，链霉素的含量为10mg/ml。该溶液用0.9%氯化钠配制，经0.22μm滤膜过滤除菌，使用时按照100倍稀释使用即可。 【使用建议（仅供参考）】 1. 在无菌的细胞培养液中直接添加：按照每500ml细胞培养液添加5ml的比例加入青链霉素混合液(100×)，混匀即可使用。 2. 配制非无菌细胞培养液时加入，然后再过滤除菌：配制细胞培养液时按照每配制1L细胞培养液加入10ml 的比例加入青链霉素混合液(100×)，配制完成后过滤除菌即可使用。 【注意事项】 1. 尽量减少反复冻融的次数。 2. 注意无菌操作，尽量避免污染。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20ºC保存2年 【概述】 √ Ecotop品牌高效转染试剂（GO3000 HiTrans Reagent），适用于真核哺乳动物细胞转染，有毒性低、转染效率高等特点。 √ 适用于：293T/293A/HEK293/CHO/Hela等哺乳动物细胞，转染效率可高达90%以上。通常293细胞转染效率可以高达90%以上。大多数常见的细胞例如Hela细胞、CHO细胞等也都适合用该试剂转染，但效率比293细胞要略低一些。 √ 应用：细胞瞬时转染、慢病毒包装、腺病毒包装、AAV病毒包装、逆转录病毒包装 √ 本试剂经过0.22μm过滤器除菌处理，可直接使用。 【操作方法】 1. 对于贴壁细胞（以下均以6孔板为例，其它培养皿或培养板请根据相应面积换算）： a. 将细胞培养于培养皿或培养板内，通常在铺板后1-2天内长到70-90%。 b. 在转染前1-2小时，吸去细胞培养液，更换为新鲜的不含抗生素的完全培养液2ml。 c. 取2-4μg待转染的质粒DNA (质粒总体积不宜超过20μl，若有多种质粒请混匀)，以质量体积比1：3加入转染试剂6~12μl（如2μg待转染的质粒DNA加入转染试剂6μl）。 d. 混匀后，室温孵育3-5分钟。 e. 把DNA-转染试剂混合物中加入500μl opti-MEM（若无opti-MEM可使用无血清无双抗的DMEM或1640，具体根据转染细胞使用的培养基）,充分混匀后静置10-15分钟。 f. 后均匀滴加到整个6孔板内（加入前吸出原培养板中500μl培养基），并置于含5%二氧化碳的37ºC细胞培养箱内培养。 g. 在转染后4-6小时左右换液，更换为2ml新鲜的完全培养液，继续培养。 h. 通常在转染约24-48小时后就可以检测到转染基因的表达。 2. 对于悬浮细胞： a. 离心收集悬浮细胞，用PBS洗涤一次。 b. 按照上面的步骤c)、d)、e）制备DNA-转染试剂-optiMEM混合物。 c. 每106个细胞的沉淀，用500微升DNA-转染试剂-optiMEM混合物重新悬浮，室温放置15-20分钟。 d. 在一个6孔板孔内加入1.5ml完全培养液，然后加入来自上一步的细胞-500微升DNA-转染试剂-optiMEM混合物，混匀。 e. 在含5%二氧化碳的37ºC细胞培养箱内培养。 f. 根据实验要求和转染试剂对于不同细胞的毒性不同，在4-6小时后离心收集细胞，用PBS洗一次，然后用2毫升完全培养 液重新悬浮细胞，继续培养。 g. 通常在转染约24-48小时后就可以检测到转染基因的表达。 【效果图】 【各种类细胞转染效率（仅供参考）】 细胞种类 中文名称 转染效率 HEK293 人胚肾细胞 90%-95% 293-T 人胚肾细胞 90%-95% CHO-K1 仓鼠卵巢细胞 80%-90% U251 人源神经胶质瘤细胞 80%-90% Hela 人源宫颈癌细胞 70%-80% COS7 猴SV40转化肾细胞 70%-80% HepG2 人源肝癌细胞 70%-80% NIH/3T3 小鼠胚胎成纤维细胞 60%-70% 胶质瘤干细胞 人源胶质瘤干细胞 60%-70% Patu8988 人源胰腺癌细胞 60%-70% U2OS 人源骨肉瘤细胞 60%-70%

【保存条件】 -20℃保存,有效期2年 【概述】 0.25%胰酶细胞消化液(含EDTA)含0.25%胰酶、EDTA和酚红，pH值为7.2-7.8。该消化液经过过滤除菌，可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的消化。 【使用建议（仅供参考）】 1. 贴壁细胞的消化：a.吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。b.加入少量0.25%胰酶细胞消化液(含EDTA)，略盖过细胞即可，室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。c.显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。d.如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。2. 组织的消化：a.不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。 【注意事项】 1. 胰酶消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。 2. 注意无菌操作，尽量避免污染。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 PBS（phosphate buffered solution）即磷酸盐缓冲液，能够提供相对稳定的离子环境和pH缓冲能力，是生物学中经常使用的缓冲盐溶液,用于分子克隆及细胞培养等，pH为7.2-7.4，与人体血液等渗，主要成分为磷酸二氢钾、氯化钾、磷酸氢二钠以及氯化钠. 本产品为1×工作液，经过除菌处理，可直接使用。 4℃保存可延长产品保质期，长期不用建议低温保存。 【注意事项】 1.PBS溶液在低温情况下可能会产生沉淀。如果发现有沉淀产生，请置于37℃水浴至完全溶解后再使用。 2.PBS溶液在使用过程中应该避免微生物污染。 3.为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 4-8℃保存，有效期1年 【概述】 SBF模拟体液是一种离子浓度接近人体血浆的亚稳定溶液。该产品经过过滤除菌处理，在36.5℃下pH为7.4 。 表一.人类血浆和SBF模拟体液的离子浓度 离子浓度 SBF模拟体液 人类血浆 Na+ 142.0 142.0 K+ 5.0 5.0 Mg2+ 1.5 1.5 Ca2+ 2.5 2.5 Cl- 148.8 103.0 HCO3- 4.2 27.0 HPO42- 1.0 1.0 SO42- 0.5 0.5 【注意事项】 1. SBF模拟体液（无菌）为无菌溶液，如有无菌要求请注意无菌操作。 2. 如果该产品在低温储存过程中出现沉淀，请勿再次使用。 3. 该产品仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 4. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 4℃避光保存，有效期1年 【概述】 HEPES 即羟乙基呱嗪乙硫磺酸（N’-a-hydroxythylpiperazine-N’-ethanesulfanic acid ）是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的 pH范围。有效缓冲范围为pH6.8-8.2。常用于配制蛋白提取缓冲液、细胞培养用缓冲液等。 HEPES 用于细胞培养时使用终浓度为 10-25mM， 在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的 pH 值。ECOTOP生产的 HEPES 缓冲液均经过无菌处理，可直接用于细胞培养。4℃保存可延长产品保质期，长期不用建议低温保存。 【注意事项】 1. HEPES溶液在使用过程中应该避免微生物污染。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 无菌去离子水用途广泛，可用于溶液的配制和分子生物学实验中的普通PCR体系构建等方面。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用，不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 D-PBS（Dulbecco’s phosphate buffered solution）即杜氏磷酸盐缓冲液，能够提供相对稳定的离子环境和pH缓冲能力，是生物学中经常使用的缓冲盐溶液,用于分子克隆及细胞培养等，pH为7.2-7.4，与人体血液等渗，主要成分为磷酸二氢钾、氯化钾、磷酸氢二钠以及氯化钠. 本产品为1×工作液，经过除菌处理，可直接使用。 4℃保存可延长产品保质期，长期不用建议低温保存。 【注意事项】 1.D-PBS溶液在低温情况下可能会产生沉淀。如果发现有沉淀产生，请置于37℃水浴至完全溶解后再使用。 2.D-PBS溶液在使用过程中应该避免微生物污染。 3.为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期1年【概述】 PBS（phosphate buffered solution）即磷酸盐缓冲液，能够提供相对稳定的子环境和pH缓冲能力，是生物学中经常使用的缓冲盐溶液，pH为7.2-7.4，与人体血液等渗，主要成分为磷酸二氢钾、氯化钾、磷酸氢二钠以及氯化钠。 本产品为20×母液，未经过除菌处理。 4℃保存可延长产品保质期，长期不用建议低温保存。 【使用建议】 请将20×PBS溶液稀释成1×使用，如50ml 10×PBS溶液加入950ml ddH2O稀释。 【注意事项】 1.PBS溶液在低温情况下可能会产生沉淀。如果发现有沉淀产生，请置于37℃水浴至完全溶解后再使用。 2.为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温保存，有效期1年 【概述】 PBS（phosphate buffered solution）即磷酸盐缓冲液，能够提供相对稳定的离子环境和pH缓冲能力，是生物学中经常使用的缓冲盐溶液,用于分子克隆及细胞培养等，pH为7.2-7.4，与人体血液等渗，主要成分为磷酸二氢钾、氯化钾、磷酸氢二钠以及氯化钠. 本产品为20×母液，经过除菌处理。 4℃保存可延长产品保质期，长期不用建议低温保存。 【使用建议】 请在无菌环境中将20×PBS溶液稀释成1×使用，如50ml 20×PBS溶液加入950ml 无菌ddH2O稀释。 【注意事项】 1.PBS溶液在低温情况下可能会产生沉淀。如果发现有沉淀产生，请置于37℃水浴至完全溶解后再使用。 2.用于存放PBS溶液的容器应经过灭菌处理。 3.PBS溶液在使用过程中应该避免微生物污染。 4.为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。