ECOTOP货号:ES-8329-100ml(货期:现货)售价:¥90.00
EDTA抗原修复液(50×) pH8.0-100ml
【保存条件】 室温保存,有效期1年 【概述】 本抗原修复液采用了广泛使用的EDTA,可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。 【操作方法】 1. 对于石蜡切片: a. 脱蜡:二甲苯3次,每次3-5min→ 无水乙醇2次,每次3-5min→ 95%乙醇1次,3-5min→ 90%乙醇1次,3-5min→ 75%乙醇1次,3-5min→ 蒸馏水洗2次,每次3-5min。 b. 抗原修复: ① 用去离子水稀释EDTA抗原修复液(50×,pH8.0)至1×,例如1ml本抗原修复液(50×)加入49ml去离子水,混合均匀,即得50ml 1×抗原修复液; ② 将切片浸泡在抗原修复液(1×)中;95-100℃加热约 15 min (加热时间可以控制在10-20 min内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。 随后大约在20-30 min 内冷却至室温。 ③ 用免疫染色洗涤液洗涤 1-2次,每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 2. 对于冰冻切片: ① 用去离子水稀释EDTA抗原修复液(50×,pH8.0)至1×,例如1ml本抗原修复液(50×)加入49ml去离子水,混合均匀,即得50ml 1×抗原修复液; ② 用免疫染色洗涤液洗涤切片5min; ③ 将切片浸泡在抗原修复液 (1×)中,95-100℃加热约15 min (加热时间可以控制在10-20 min内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 min 内冷却至室温。 ④ 用免疫染色洗涤液洗涤1-2 次,每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 3. 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。 【注意事项】 1. 本品含Tween-20,可提高细胞通透性,95-100℃加热时出现气泡属于正常现象。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 用后请及时拧紧瓶盖,以防挥发。