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柠檬酸—柠檬酸钠粉剂(10mmol/L,pH6.0)(​枸橼酸抗原修复液)
ECOTOP货号:ES-8330-1p(货期:1天)售价:¥8.00
柠檬酸—柠檬酸钠粉剂(10mmol/L,pH6.0)(​枸橼酸抗原修复液)
【保存条件】 室温保存,有效期2年 【概述】 柠檬酸-柠檬酸钠抗原修复液是一种最常用的抗原修复液,可以用于多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的石蜡切片、冰冻切片的抗原修复。 细胞或组织多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联,遮蔽了样品的抗原位点,导致免疫染色时 染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果,这就需要对组织进行抗原修复。 通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色 效果,对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善,特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进 行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗 原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。 本产品特别适用于石蜡切片,也可以用于冰冻切片。 【使用建议】 实验前准备: 本产品为干粉,使用时用蒸馏水或去离子水溶解,定容至1L,如需必要,可使用盐酸调pH值至6.0。 抗原修复: 1. 高压蒸汽法 a. 抗原修复:压力锅中加入足以淹没切片的抗原修复液,加热至沸腾。 b. 将脱蜡至水的切片置染色架上,放入锅中,盖好锅盖,扣上压力阀加压,设置保压4 min。 c. 压力下降后打开锅盖,放置室温冷却,待溶液冷却至室温后取出切片。 d. PBS或TBS洗涤3次,每次5 min,随后即可进行后续的免疫染色步骤。 2. 蒸煮锅法 a. 将置于染色架上的切片放于抗原修复液中,95~100°C加热10~20 min。 b. 冷却至室温后取出,PBS或TBS洗涤3次,每次5 min,随后即可进行后续的免疫染色步骤。 3. 微波法 a. 向微波炉专用容器中加入抗原修复液,加热至沸腾。 b. 将脱蜡至水的切片置染色架上,放于容器中,煮沸10~20 min。 c. 冷却至室温后取出,PBS或TBS洗涤3次,每次5 min,随后即可进行后续的免疫染色步骤。 4. 对于其他切片 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片的步骤进行。 【注意事项】 1. 抗原修复的时间为建议时间,请根据不同的样品、抗体和抗原自行摸索。 2. 抗原修复后,待溶液冷却至室温后再取出切片,使抗原表位在经历高温后复原。 3. 抗原修复液的加入量要足以淹没切片几厘米,防止在煮沸过程中切片变干。 4. 抗原修复过程需使用耐热染色架进行操作。 5. 试剂有潮解性,若有潮解请放心使用。 6. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
EDTA抗原修复液(50×) pH8.0-100ml
ECOTOP货号:ES-8329-100ml(货期:现货)售价:¥90.00
EDTA抗原修复液(50×) pH8.0-100ml
【保存条件】 室温保存,有效期1年 【概述】 本抗原修复液采用了广泛使用的EDTA,可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。 【操作方法】 1. 对于石蜡切片: a. 脱蜡:二甲苯3次,每次3-5min→ 无水乙醇2次,每次3-5min→ 95%乙醇1次,3-5min→ 90%乙醇1次,3-5min→ 75%乙醇1次,3-5min→ 蒸馏水洗2次,每次3-5min。 b. 抗原修复: ① 用去离子水稀释EDTA抗原修复液(50×,pH8.0)至1×,例如1ml本抗原修复液(50×)加入49ml去离子水,混合均匀,即得50ml 1×抗原修复液; ② 将切片浸泡在抗原修复液(1×)中;95-100℃加热约 15 min (加热时间可以控制在10-20 min内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。 随后大约在20-30 min 内冷却至室温。 ③ 用免疫染色洗涤液洗涤 1-2次,每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 2. 对于冰冻切片: ① 用去离子水稀释EDTA抗原修复液(50×,pH8.0)至1×,例如1ml本抗原修复液(50×)加入49ml去离子水,混合均匀,即得50ml 1×抗原修复液; ② 用免疫染色洗涤液洗涤切片5min; ③ 将切片浸泡在抗原修复液 (1×)中,95-100℃加热约15 min (加热时间可以控制在10-20 min内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 min 内冷却至室温。 ④ 用免疫染色洗涤液洗涤1-2 次,每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 3. 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。 【注意事项】 1. 本品含Tween-20,可提高细胞通透性,95-100℃加热时出现气泡属于正常现象。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 用后请及时拧紧瓶盖,以防挥发。
柠檬酸钠抗原修复液(50×)-100ml
ECOTOP货号:ES-8327-100ml(货期:现货)售价:¥80.00
柠檬酸钠抗原修复液(50×)-100ml
【保存条件】 室温保存,有效期1年 【概述】 柠檬酸钠抗原修复液(Citrate Antigen Retrieval Solution)是一种最常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。 细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。本抗原修复液采用了广泛使用的柠檬酸钠缓冲液(pH6.0),可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。 【操作方法】 1. 对于石蜡切片: a. 脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡5分钟,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5分钟,两次。90%乙醇5分钟,两次,70%乙醇5分钟,一次。蒸馏水5分钟,两次。 b. 抗原修复:用重蒸水或Milli-Q水将本抗原修复液(50×)稀释50倍,配制成抗原修复液(1×),例如1ml本抗原修复液(50X)加入49ml重蒸水或Milli-Q水,混合均匀,即得50ml抗原修复液(1×)。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100℃加热约20分钟(加热时间可以控制在10-30分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 2. 对于冰冻切片: 用免疫染色洗涤液洗涤切片5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100℃加热约20分钟(加热时间可以控制在10-30分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 3. 对于其它样品的抗原修复:可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。 【注意事项】 1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

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