ECOTOP货号:ES-8325-100ml(货期:现货)售价:¥110.00
改良柠檬酸钠抗原修复液(50×)-100ml
【保存条件】 室温保存,有效期1年 【概述】 柠檬酸钠抗原修复液(Citrate Antigen Retrieval Solution)是一种最常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。 细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。本抗原修复液对柠檬酸钠缓冲液(pH6.0)经过改进,可以更有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。 【操作方法】 1. 对于石蜡切片: a. 脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡5分钟,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5分钟,两次。90%乙醇5分钟,两次,70%乙醇5分钟,一次。蒸馏水5分钟,两次。 b. 抗原修复:用重蒸水或Milli-Q水将本抗原修复液(50×)稀释50倍,配制成抗原修复液(1×),例如1ml本抗原修复液(50X)加入49ml重蒸水或Milli-Q水,混合均匀,即得50ml抗原修复液(1×)。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100℃加热约20分钟(加热时间可以控制在10-30分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 2. 对于冰冻切片: 用免疫染色洗涤液洗涤切片5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100℃加热约20分钟(加热时间可以控制在10-30分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 3. 对于其它样品的抗原修复:可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。 【注意事项】 1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 3. 本产品含有少量的特殊去垢剂,抗原修复过程中加热时会产生非常细密的气泡而呈现均匀的浑浊状,属于正常现象,请放心使用。