【保存条件】 4℃避光保存，有效期2年 【概述】 G418 Sulfate (G418硫酸盐)，也称作Geneticin (遗传霉素)、G418、G 418或者G-418，是一种结构类似于庆大霉素B1 (Gentamycin B1)的氨基糖苷类抗生素，来源于Micromonospora rhodorangea，常用于筛选表达neo基因的真核或原核多克隆或单克隆细胞。G418不仅用于稳定细胞株的筛选，也用于稳定细胞株的维持。本产品为50mg/ml G418水溶液，经0.22μm滤膜过滤除菌，可直接用于细胞培养。 【使用方法】 一般来说，刚开始筛选转化子需要高浓度的G418，并用一个较低浓度的G418维持培养。生长条件，细胞类型和其它的环境因素都可能影响G418的用量，因此第一次使用的实验体系建议通过剂量反应性曲线(dose-response curve or kill curve)，来确定最佳筛选浓度。通常情况，哺乳动物细胞筛选范围200-2000μg/ml；植物细胞：10-100μg/ml；酵母细胞：500-1000μg/ml。具体浓度可参考文献或进行预实验测试。 【注意事项】 1. G418不要和其它抗生素/抗真菌剂(如青霉素/链霉素)共同使用，因为它们是G418的竞争性抑制剂。其它的抗生素也会产生交叉活性。 2. G418加入培养体系中，未转染的细胞有可能不会被杀死，原因在于药物浓度过低，或者细胞密度过高。另外，快速分裂的细胞相对于缓慢增殖细胞，更容易被杀死。对照细胞(未转染)可能在添加抗生素5-7天后才能被杀死，转染细胞(抗性克隆子)的克隆需要10-14天形成。 3. 即使加入有效剂量的G418，细胞可能会继续分裂2-3次。G418的药效通常在2天后才变得明显。 4. 反复冻融易导致抗生素失效，如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。 5. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。 6. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 4℃避光保存，有效期2年 【概述】 G418 Sulfate (G418硫酸盐)，也称作Geneticin (遗传霉素)、G418、G 418或者G-418，是一种结构类似于庆大霉素B1 (Gentamycin B1)的氨基糖苷类抗生素，来源于Micromonospora rhodorangea，常用于筛选表达neo基因的真核或原核多克隆或单克隆细胞。G418不仅用于稳定细胞株的筛选，也用于稳定细胞株的维持。本产品为50mg/ml G418水溶液，经0.22μm滤膜过滤除菌，可直接用于细胞培养。 【使用方法】 一般来说，刚开始筛选转化子需要高浓度的G418，并用一个较低浓度的G418维持培养。生长条件，细胞类型和其它的环境因素都可能影响G418的用量，因此第一次使用的实验体系建议通过剂量反应性曲线(dose-response curve or kill curve)，来确定最佳筛选浓度。通常情况，哺乳动物细胞筛选范围200-2000μg/ml；植物细胞：10-100μg/ml；酵母细胞：500-1000μg/ml。具体浓度可参考文献或进行预实验测试。 【注意事项】 1. G418不要和其它抗生素/抗真菌剂(如青霉素/链霉素)共同使用，因为它们是G418的竞争性抑制剂。其它的抗生素也会产生交叉活性。 2. G418加入培养体系中，未转染的细胞有可能不会被杀死，原因在于药物浓度过低，或者细胞密度过高。另外，快速分裂的细胞相对于缓慢增殖细胞，更容易被杀死。对照细胞(未转染)可能在添加抗生素5-7天后才能被杀死，转染细胞(抗性克隆子)的克隆需要10-14天形成。 3. 即使加入有效剂量的G418，细胞可能会继续分裂2-3次。G418的药效通常在2天后才变得明显。 4. 反复冻融易导致抗生素失效，如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。 5. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。 6. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20℃储藏，有效期1年。 【概述】 嘌呤霉素（Puromycin）是由白黑链霉菌（Streptomyces alboniger）发酵代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌，各种动物和昆虫细胞。某种特殊情况下有效作用大肠杆菌。作用机制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3’末端的类似物，能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。嘌呤霉素同A位点结合后，不会参与随后的任何反应，从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。 该溶液经0.22um滤膜过滤除菌，可直接使用。 【使用建议】 1. 哺乳动物细胞建议使用浓度为1-10 μg/mL，最佳浓度需要杀灭曲线来确定。 2. LB琼脂培养基筛选稳定转化pac基因的大肠杆菌，建议使用浓度为125μg/mL。注：使用嘌呤霉素筛选大肠杆菌稳转株需要精确的pH值调节，而且受宿主细胞本身的影响。 【注意事项】 1. 嘌呤霉素为有毒化合物，操作时请小心拿放。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温避光保存12个月, 2–8°C或-20°C保存24个月 【概述】 TripleSelect与胰蛋白酶一样，可裂解赖氨酸和精氨酸C-末端上的肽键。但是，TripleSelect无与伦比的纯度提高了特异性，其原因在于只有一种酶发挥作用。这减少了胰蛋白酶和其他提取物中存在的多种酶的裂解作用造成的损害。 【产品特点】 对细胞作用温和：纯度提高了特异性，其原因在于只有一种酶发挥作用。这减少了胰蛋白酶和其他提取物中由于多种酶切割造成的损害。 在室温下保持稳定：在室温或4°C下可保持稳定12-24个月，因此易于储存和处理、方便快捷。 无动物来源蛋白：与常用猪胰蛋白酶不同，本试剂不含动物来源成分。 无需终止，易于使用：无需使用胰蛋白酶抑制剂（如 FBS）终止消化，PBS或DMEM等稀释后自动失活。 【使用建议】 1. 使用前将TripleSelect 和完整的生长培养基恢复至室温。 2. 将待消化细胞培养器皿中培养去除。 3. 使用DPBS（无钙镁）清洗细胞，清洗完去除DPBS液体。 4. 加入相应体积的TripleSelect消化液（如25cm2瓶中加入1-2ml TripleSelect消化液，75cm2瓶中加入5ml TripleSelect消化液） 5. 37°C孵育至细胞变圆脱落（镜下观察），可轻拍培养瓶/皿。 6. 加入5ml 完全培养基至培养瓶/皿（体积根据不同面积培养瓶/皿），可轻轻吹打使细胞更好分离。 7. 将含细胞的液体移入15ml无菌离心管中。以200-500g转速离心5-10分钟使细胞沉淀。 8. 去除上清后，加入含血清的完全培养液使细胞沉淀重新悬浮，即可用于后续实验。 【注意事项】 1. 注意无菌操作，尽量避免污染。 2. 夏天若室内温度较高建议4°C保存，运输增加适量冰袋。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20℃保存，有效期2年 【概述】 0.5%胰酶细胞消化液(含EDTA)含0.5%胰酶、EDTA和酚红，pH值为7.2-7.8。该消化液经过过滤除菌，可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的消化。 【使用建议（仅供参考）】 1. 贴壁细胞的消化：a.吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。b.加入少量0.5%胰酶细胞消化液(含EDTA)，略盖过细胞即可，室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。c.显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。d.如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。2. 组织的消化：a.不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。 【注意事项】 1. 胰酶消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。 2. 注意无菌操作，尽量避免污染。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20℃保存，有效期2年 【概述】 0.05%胰酶细胞消化液(含EDTA)含0.05%胰酶、EDTA和酚红，pH值为7.2-7.8。该消化液经过过滤除菌，可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的消化。 【使用建议（仅供参考）】 1. 贴壁细胞的消化：a.吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。b.加入少量0.05%胰酶细胞消化液(含EDTA)，略盖过细胞即可，室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。c.显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。d.如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。2. 组织的消化：a.不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。 【注意事项】 1. 胰酶消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。 2. 注意无菌操作，尽量避免污染。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 4℃保存，有效期1年 【概述】 Sodium Pyruvate，中文名为丙酮酸钠。Sodium Pyruvate的分子式为C3H3NaO3，CAS号为113-24-6，分子量为110.0。 丙酮酸钠是细胞培养的常用添加剂，通常在添加葡萄糖后，丙酮酸钠还可作为能量来源而补充到细胞培养基中，因此常作为替代性碳源，并且可避免葡萄糖作为唯一碳源时代谢产物乳酸的堆积。丙酮酸(Pyruvate)作为丙酮酸钠的阴离子，是糖酵解途径(glycolysis pathway)的代谢产物，因此并不是必须的细胞培养添加剂。通常在低葡萄糖配方(如1.0g/L葡萄糖)的培养基中加入丙酮酸钠，有时也在高糖细胞培养基中添加丙酮酸钠。如果细胞已在添加丙酮酸钠的培养基中生长，细胞会对丙酮酸钠表现出一定的依赖性，一旦从培养基中突然撤走丙酮酸钠，细胞的生长可能会出现一个短暂的延迟，因此通常宜维持添加丙酮酸钠。 该产品经0.22μm滤膜过滤除菌，可直接用于细胞培养。 【使用建议（仅供参考）】 100mM丙酮酸钠溶液常以1:100加入细胞培养液中，不同用途的工作浓度有所不同。具体的最佳工作浓度请参考相关文献，或根据实验目的，以及所培养的特定细胞和组织，通过实验进行摸索和优化。 【注意事项】 1. 该产品为无菌产品，应尽量避免微生物污染。 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20℃保存一年 【概述】 细胞培养基中有时加入适量浓度的抗生素，可以有效防止微生物的污染。青霉素-链霉素-两性霉素B混合液（100×）中青霉素含量10kU/ml，链霉素含量10mg/ml，两性霉素B含量25μg/ml。该溶液用0.9%NaCl或PBS配制，在细胞培养液中推荐的青霉素工作浓度为 100U/ml，链霉素工作浓度为0.1mg/ml，两性霉素B工作浓度为0.25μg/ml即按照100倍稀释使用即可。 【使用建议（仅供参考）】 1. 在无菌的细胞培养液中直接添加：按照每500ml细胞培养液添加5ml的比例加入青霉素-链霉素-两性霉素B混合液（100×），混匀即可使用。 2. 配制非无菌细胞培养液时加入，然后再过滤除菌：配制细胞培养液时按照每配制1L细胞培养液加入10ml 的比例加入青霉素-链霉素-两性霉素B混合液（100×），配制完成后过滤除菌即可使用。 【注意事项】 1. 尽量减少反复冻融的次数，以免效率下降。 2. 本产品为无菌溶液，注意无菌操作，尽量避免污染。 3. 本产品为黄色微浑浊溶液，为正常现象，不影响使用，使用前请摇匀。 4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作

【保存条件】 -20℃储藏，有效期1年。 【概述】 嘌呤霉素（Puromycin）是由白黑链霉菌（Streptomyces alboniger）发酵代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌，各种动物和昆虫细胞。某种特殊情况下有效作用大肠杆菌。作用机制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3’末端的类似物，能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。嘌呤霉素同A位点结合后，不会参与随后的任何反应，从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。 该溶液经0.22um滤膜过滤除菌，可直接使用。 【使用建议】 1. 哺乳动物细胞建议使用浓度为1-10 μg/mL，最佳浓度需要杀灭曲线来确定。 2. LB琼脂培养基筛选稳定转化pac基因的大肠杆菌，建议使用浓度为125μg/mL。注：使用嘌呤霉素筛选大肠杆菌稳转株需要精确的pH值调节，而且受宿主细胞本身的影响。 【注意事项】 1. 嘌呤霉素为有毒化合物，操作时请小心拿放。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20℃储藏，有效期1年。 【概述】 嘌呤霉素（Puromycin）是由白黑链霉菌（Streptomyces alboniger）发酵代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌，各种动物和昆虫细胞。某种特殊情况下有效作用大肠杆菌。作用机制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3’末端的类似物，能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。嘌呤霉素同A位点结合后，不会参与随后的任何反应，从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。 该溶液经0.22um滤膜过滤除菌，可直接使用。 【使用建议】 1. 哺乳动物细胞建议使用浓度为1-10 μg/mL，最佳浓度需要杀灭曲线来确定。 2. LB琼脂培养基筛选稳定转化pac基因的大肠杆菌，建议使用浓度为125μg/mL。注：使用嘌呤霉素筛选大肠杆菌稳转株需要精确的pH值调节，而且受宿主细胞本身的影响。 【注意事项】 1. 嘌呤霉素为有毒化合物，操作时请小心拿放。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。