亿涛生物(QQ:304215136)         电话:15622108587         邮箱:info@ecotopbio.com ON OFF
助感染试剂Polybrene 溶液(10mg/ml)-1ml
ECOTOP货号:ES-8425-1ml(货期:现货)售价:¥130.00
助感染试剂Polybrene 溶液(10mg/ml)-1ml
【保存条件】 2-8℃保存,有效期1年;-20℃保存,至少2年有效 【概述】 Polybrene (聚凝胺),也称Hexadimethrine Bromide (海美溴铵),是一种聚溴化季铵阳离子,可显著提高慢病毒、腺病毒等病毒对某些细胞的感染效率,其原理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥从而促进吸附作用。另外,Polybrene也可用于哺乳动物细胞的转染、增强脂质体的转染效率。 带正电荷的Polybrene也是一种抗肝素剂(肝素拮抗剂),可中和红细胞表面负电荷而常用于制备非特异性凝集的红细胞;其抗凝特性也为体外测定肝素活性提供了一种准确、快速、简单的方法。 Polybrene在蛋白测序中有一定的作用:少量的Polybrene在自动测序分析中可明显改善多肽的降解;加入Polybrene能提高PVDF膜的亲水性,降低测序过程中多肽的机械损伤。 Polybrene也可降低某些酶原的自发激活而用于酶动力学测定。 该产品为超纯水配制并经0.22μm滤膜过滤除菌处理,可直接使用。 【使用建议】 1.推荐工作浓度:Polybrene最佳终浓度因不同细胞株而异,通常范围在2~10μg/ml,最常用的浓度为5~8μg/ml。可以通过查阅相关文献或者预实验来摸索。2.使用方法:a.Day1:按实验需要将细胞铺板(比如12孔板)。细胞数以第2天密度约50%为宜。37℃培养过夜。b.Day2:病毒感染前,从-80℃冰箱取出病毒后冰浴融化,参考相关文献或者根据预实验得到的MOI值用新鲜完全培养基将病毒稀释成所需浓度,并加入适量Polybrene,轻轻混匀。c.吸除细胞原有培养基,将病毒液+培养基+Polybrene加入细胞中,轻轻摇匀。37℃继续培养。d.Day4:吸除含病毒的培养基,换为新鲜的培养基。此时可以加入相应抗生素进行筛选。e.Day5-6:根据需要收集细胞检测目的蛋白的表达。 【注意事项】 1. 为避免反复冻融,收到本产品或本产品配制成溶液后建议适当分装后-20℃保存。 2. 因为Polybrene对某些细胞可能有一定的毒性,而且Polybrene长时间作用(大于12小时)也可能对某些细胞产生毒性,所以初次使用Polybrene处理细胞,建议先做毒性测试。 3. 本产品仅可用于科研实验,不可用作药品、食品等方面。 4. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
结晶紫染色液(0.4%)-500ml
ECOTOP货号:ES-8107-500ml(货期:现货)售价:¥390.00
结晶紫染色液(0.4%)-500ml
【保存条件】 4℃避光储存,有效期1年 【概述】 结晶紫染色液是革兰氏染色法中的一种成分。革兰阳性菌染色中,细胞经结晶紫染色后再经Gram碘液处理,形成不溶性复合物,该复合物不能通过细胞壁,不易被脱色,所以保持紫色。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。 【使用建议】 按实验具体要求操作或参考下列革兰氏染色的方法。 涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与水混合均匀,涂成薄层。 干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。 固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动3~5次,每次1s,温度不宜过高,防止菌体蛋白变性,放置待凉后染色。也可以用甲醇或乙醇固定。 初染:滴加结晶紫染色液染色1-2min,清水冲洗去染色液。 媒染:滴加Gram碘液,并覆盖载玻片室温放置1-2min,水洗。 脱色:滴加脱色液摇动,摇动10~30s,直至流下的脱色液不出现紫色为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。 复染:滴加沙黄染色液染色,30~60s,水洗,干燥。 镜检:置油镜观察。 染色结果:革兰氏阳性菌为蓝色至紫色;革兰氏阴性菌为红色。 【注意事项】 1. 涂片之前,应事先在背面做好圆圈标记,以便判断后续试验的位置。 2. 待检细菌培养时间会影响染色,阳性菌培养时间过长或已死亡或细菌溶解,常呈阴性。 3. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 4. 结晶紫对人体有害,请注意适当防护。
20×SuperBlot 免冰浴快速蛋白电泳转膜液
ECOTOP货号:ES-8704-500ml(货期:现货)售价:¥299.00
20×SuperBlot 免冰浴快速蛋白电泳转膜液
【保存条件】 室温保存,有效期1年 【概述】 SuperBlot免冰浴快速转膜液是一种改良的Towbin经典缓冲液,这种专有的配方大大提高了转移速度,而不会产生过多的热量而影响蛋白质。SuperBlot免冰浴快速转膜液一般不需要额外添加甲醇/乙醇或SDS,但它与这些添加剂兼容(可添加甲醇/乙醇0-20%),当分子量大于130KD时建议添加10-20%甲醇或乙醇。 【操作方法】 1. 使用前用去离子水将20×SuperBlot免冰浴快速转膜液稀释至1×工作液,例如将50ml 20×SuperBlot免冰浴快速转膜液加入950ml去离子水中混匀。(如分子量大于130KD,可以添加100ml-200ml乙醇,如取100ml 10×SuperBlot蛋白电泳快速转膜液加入700ml-800ml去离子水与100ml-200ml 乙醇混匀备用) 2. 做好转印三明治结构,然后转移至电泳槽中,设定恒流 400 mA,大约时间15-30分钟完成蛋白转膜。 胶浓度 6% 8% 10% 12% 推荐转膜时长 15分钟 20分钟 30分钟 35分钟 【注意事项】 1. PVDF膜需提前使用甲醇浸泡30秒以上。 2. 转印电流建议设定恒流400mA, 一般25-30分钟可以将150kD以下蛋白完全转印;小于100kD蛋白20分钟即可完全转印;对于大于150kD蛋白,建议延长5-10分钟。 3. 凝胶的浓度影响转印的效率,对于胶浓度8%,20分钟即可完成转印;对于胶浓度10%,25-30分钟即可完成转印;对于胶浓度大于 10%,建议延长5-10分钟 4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

高质量生物试剂供应商

销售热线:15622108587

地址:广东省广州市广州国际企业孵化器D座512室 销售热线:15622108587

©2016  亿涛生物 版权所有  粤ICP备20058672号 网站建设服务商 学智