【保存条件】 4°C保存，有效期1年 【概述】 如果材料必须从多个来源、不同时间点收集，或者如果不能直接处理，则可能需要储存器官或组织样本。在此储存期间必须避免坏死和细胞凋亡，并且必须保持细胞的活化和多能性状态。Tissue Store新鲜细胞组织保存液的开发旨在优化新鲜器官和组织样本的储存最少48小时而不会出现细胞活化或细胞凋亡诱导等背景效应，96小时后亦可保存50%相对活力（相对新鲜对照）。可适用多种人体和小鼠组织，包括肿瘤、毛囊、皮肤、心脏、脾脏、大脑和骨骼肌。 本产品配方不含抗生素或抗真菌成分。如果需要，在使用前以标准细胞培养浓度补充这些成分。 【产品特点】 l 组织在低温条件(2-8℃)下可保持形态结构和功能活性至少48小时，最长可达96小时 l 操作简单，组织或细胞样本浸没到溶液中即可 l 无血清及其它蛋白质成份 【应用】 l 运输新鲜器官和组织样本 l 新鲜器官和组织样本的储存 【使用建议】 1. 将组织尽可以剪碎（不大于0.5cm宽×0.5cm厚为最佳，细胞常规消化离心收集）并尽快转移至预冷的Tissue Store新鲜细胞组织保存液（2-8°C）中，保证组织被保存液完全覆盖（运输空间要考虑组织贴壁可以增加保存液体积）。 2. （可选）出于运输目的，将样品转移到可封闭管中Tissue Store新鲜细胞组织保存液中。避免气泡以防止长时间接触空气。 3. 在 2–8 °C下储存或运输样品 4. 在运输/存储结束时，取出样本并直接与下游处理应用，例如解离成单细胞悬浮液使用等。 【注意事项】 1. 本品仅用于科研用途，不得用于临床或诊断相关研究 2. 请注意运输及冻存过程中的无菌操作。

【保存条件】 4℃避光保存，有效期2年 【概述】 G418 Sulfate (G418硫酸盐)，也称作Geneticin (遗传霉素)、G418、G 418或者G-418，是一种结构类似于庆大霉素B1 (Gentamycin B1)的氨基糖苷类抗生素，来源于Micromonospora rhodorangea，常用于筛选表达neo基因的真核或原核多克隆或单克隆细胞。G418不仅用于稳定细胞株的筛选，也用于稳定细胞株的维持。本产品为50mg/ml G418水溶液，经0.22μm滤膜过滤除菌，可直接用于细胞培养。 【使用方法】 一般来说，刚开始筛选转化子需要高浓度的G418，并用一个较低浓度的G418维持培养。生长条件，细胞类型和其它的环境因素都可能影响G418的用量，因此第一次使用的实验体系建议通过剂量反应性曲线(dose-response curve or kill curve)，来确定最佳筛选浓度。通常情况，哺乳动物细胞筛选范围200-2000μg/ml；植物细胞：10-100μg/ml；酵母细胞：500-1000μg/ml。具体浓度可参考文献或进行预实验测试。 【注意事项】 1. G418不要和其它抗生素/抗真菌剂(如青霉素/链霉素)共同使用，因为它们是G418的竞争性抑制剂。其它的抗生素也会产生交叉活性。 2. G418加入培养体系中，未转染的细胞有可能不会被杀死，原因在于药物浓度过低，或者细胞密度过高。另外，快速分裂的细胞相对于缓慢增殖细胞，更容易被杀死。对照细胞(未转染)可能在添加抗生素5-7天后才能被杀死，转染细胞(抗性克隆子)的克隆需要10-14天形成。 3. 即使加入有效剂量的G418，细胞可能会继续分裂2-3次。G418的药效通常在2天后才变得明显。 4. 反复冻融易导致抗生素失效，如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。 5. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。 6. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 4℃避光保存，有效期2年 【概述】 G418 Sulfate (G418硫酸盐)，也称作Geneticin (遗传霉素)、G418、G 418或者G-418，是一种结构类似于庆大霉素B1 (Gentamycin B1)的氨基糖苷类抗生素，来源于Micromonospora rhodorangea，常用于筛选表达neo基因的真核或原核多克隆或单克隆细胞。G418不仅用于稳定细胞株的筛选，也用于稳定细胞株的维持。本产品为50mg/ml G418水溶液，经0.22μm滤膜过滤除菌，可直接用于细胞培养。 【使用方法】 一般来说，刚开始筛选转化子需要高浓度的G418，并用一个较低浓度的G418维持培养。生长条件，细胞类型和其它的环境因素都可能影响G418的用量，因此第一次使用的实验体系建议通过剂量反应性曲线(dose-response curve or kill curve)，来确定最佳筛选浓度。通常情况，哺乳动物细胞筛选范围200-2000μg/ml；植物细胞：10-100μg/ml；酵母细胞：500-1000μg/ml。具体浓度可参考文献或进行预实验测试。 【注意事项】 1. G418不要和其它抗生素/抗真菌剂(如青霉素/链霉素)共同使用，因为它们是G418的竞争性抑制剂。其它的抗生素也会产生交叉活性。 2. G418加入培养体系中，未转染的细胞有可能不会被杀死，原因在于药物浓度过低，或者细胞密度过高。另外，快速分裂的细胞相对于缓慢增殖细胞，更容易被杀死。对照细胞(未转染)可能在添加抗生素5-7天后才能被杀死，转染细胞(抗性克隆子)的克隆需要10-14天形成。 3. 即使加入有效剂量的G418，细胞可能会继续分裂2-3次。G418的药效通常在2天后才变得明显。 4. 反复冻融易导致抗生素失效，如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。 5. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。 6. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20℃储藏，有效期1年。 【概述】 嘌呤霉素（Puromycin）是由白黑链霉菌（Streptomyces alboniger）发酵代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌，各种动物和昆虫细胞。某种特殊情况下有效作用大肠杆菌。作用机制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3’末端的类似物，能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。嘌呤霉素同A位点结合后，不会参与随后的任何反应，从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。 该溶液经0.22um滤膜过滤除菌，可直接使用。 【使用建议】 1. 哺乳动物细胞建议使用浓度为1-10 μg/mL，最佳浓度需要杀灭曲线来确定。 2. LB琼脂培养基筛选稳定转化pac基因的大肠杆菌，建议使用浓度为125μg/mL。注：使用嘌呤霉素筛选大肠杆菌稳转株需要精确的pH值调节，而且受宿主细胞本身的影响。 【注意事项】 1. 嘌呤霉素为有毒化合物，操作时请小心拿放。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 室温避光保存12个月, 2–8°C或-20°C保存24个月 【概述】 TripleSelect与胰蛋白酶一样，可裂解赖氨酸和精氨酸C-末端上的肽键。但是，TripleSelect无与伦比的纯度提高了特异性，其原因在于只有一种酶发挥作用。这减少了胰蛋白酶和其他提取物中存在的多种酶的裂解作用造成的损害。 【产品特点】 对细胞作用温和：纯度提高了特异性，其原因在于只有一种酶发挥作用。这减少了胰蛋白酶和其他提取物中由于多种酶切割造成的损害。 在室温下保持稳定：在室温或4°C下可保持稳定12-24个月，因此易于储存和处理、方便快捷。 无动物来源蛋白：与常用猪胰蛋白酶不同，本试剂不含动物来源成分。 无需终止，易于使用：无需使用胰蛋白酶抑制剂（如 FBS）终止消化，PBS或DMEM等稀释后自动失活。 【使用建议】 1. 使用前将TripleSelect 和完整的生长培养基恢复至室温。 2. 将待消化细胞培养器皿中培养去除。 3. 使用DPBS（无钙镁）清洗细胞，清洗完去除DPBS液体。 4. 加入相应体积的TripleSelect消化液（如25cm2瓶中加入1-2ml TripleSelect消化液，75cm2瓶中加入5ml TripleSelect消化液） 5. 37°C孵育至细胞变圆脱落（镜下观察），可轻拍培养瓶/皿。 6. 加入5ml 完全培养基至培养瓶/皿（体积根据不同面积培养瓶/皿），可轻轻吹打使细胞更好分离。 7. 将含细胞的液体移入15ml无菌离心管中。以200-500g转速离心5-10分钟使细胞沉淀。 8. 去除上清后，加入含血清的完全培养液使细胞沉淀重新悬浮，即可用于后续实验。 【注意事项】 1. 注意无菌操作，尽量避免污染。 2. 夏天若室内温度较高建议4°C保存，运输增加适量冰袋。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20℃保存，有效期2年 【概述】 0.5%胰酶细胞消化液(含EDTA)含0.5%胰酶、EDTA和酚红，pH值为7.2-7.8。该消化液经过过滤除菌，可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的消化。 【使用建议（仅供参考）】 1. 贴壁细胞的消化：a.吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。b.加入少量0.5%胰酶细胞消化液(含EDTA)，略盖过细胞即可，室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。c.显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。d.如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。2. 组织的消化：a.不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。 【注意事项】 1. 胰酶消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。 2. 注意无菌操作，尽量避免污染。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 -20℃保存，有效期2年 【概述】 0.05%胰酶细胞消化液(含EDTA)含0.05%胰酶、EDTA和酚红，pH值为7.2-7.8。该消化液经过过滤除菌，可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的消化。 【使用建议（仅供参考）】 1. 贴壁细胞的消化：a.吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。b.加入少量0.05%胰酶细胞消化液(含EDTA)，略盖过细胞即可，室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。c.显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。d.如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。2. 组织的消化：a.不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。 【注意事项】 1. 胰酶消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。 2. 注意无菌操作，尽量避免污染。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 4℃保存，有效期1年 【概述】 Sodium Pyruvate，中文名为丙酮酸钠。Sodium Pyruvate的分子式为C3H3NaO3，CAS号为113-24-6，分子量为110.0。 丙酮酸钠是细胞培养的常用添加剂，通常在添加葡萄糖后，丙酮酸钠还可作为能量来源而补充到细胞培养基中，因此常作为替代性碳源，并且可避免葡萄糖作为唯一碳源时代谢产物乳酸的堆积。丙酮酸(Pyruvate)作为丙酮酸钠的阴离子，是糖酵解途径(glycolysis pathway)的代谢产物，因此并不是必须的细胞培养添加剂。通常在低葡萄糖配方(如1.0g/L葡萄糖)的培养基中加入丙酮酸钠，有时也在高糖细胞培养基中添加丙酮酸钠。如果细胞已在添加丙酮酸钠的培养基中生长，细胞会对丙酮酸钠表现出一定的依赖性，一旦从培养基中突然撤走丙酮酸钠，细胞的生长可能会出现一个短暂的延迟，因此通常宜维持添加丙酮酸钠。 该产品经0.22μm滤膜过滤除菌，可直接用于细胞培养。 【使用建议（仅供参考）】 100mM丙酮酸钠溶液常以1:100加入细胞培养液中，不同用途的工作浓度有所不同。具体的最佳工作浓度请参考相关文献，或根据实验目的，以及所培养的特定细胞和组织，通过实验进行摸索和优化。 【注意事项】 1. 该产品为无菌产品，应尽量避免微生物污染。 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【保存条件】 4℃避光保存12月 【概述】 超敏发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶 HRP 的抗体及其关联的抗原。 用于 HRP 标记抗体的 Western Blot 和 HRP 标记探针的核酸杂交。由于采用了独特的发光底物系统，SuperStar ECL超敏发光液是目前最灵敏的商业化荧光 ECL 检测试剂（具有极高灵敏度和高信噪比）；可在日光灯下进行发光操作；发光迅速，荧光可使 X 光胶片感光达 12 小时以上，特别适用于痕量蛋白或核酸检测；可使用更高的抗体稀释倍数(1:2000～1:10000)， 极其节省抗体。 【特点】 n 飞克级灵敏度 - 在硝酸纤维素或PVDF膜上检测低至飞克量的目标蛋白量 n 高信号稳定性 - 孵育印迹在关键的4小时时间内提供稳定的信号持续时间，在最佳条件下可产生长达24小时的光输出 n 稳定的试剂 - 在4℃下1年的试剂盒稳定性 n 更经济的抗体用量： 0.2至1.0μg/ mL一抗（从1 mg / mL原液中1：1000至1：5000稀释） 10至50 ng / mL二级抗体（从1 mg / mL原液中1：20,000至1：100,000稀释） 【操作方法】 1. 执行常规 SDS-PAGE、转膜和 Western Blot 步骤。注意用 HRP 标记 lgG 或用一抗-链亲和素-生物素-HRP夹法。 2. Western Blot 最后一次洗膜的同时新鲜配制发光工作液：分别取A:B=1:1混合（如需要1ml发光液则取500ul ECL A液和500ul ECL B液混合），放入干净容器中混合。建议立即使用工作液，室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。 3. 用镊子取出膜，搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜完全干燥。将膜完全浸入发光工作液(0.125ml发光工作液/cm2 膜)中，与发光工作液充分接触。室温孵育2分钟，准备立即压片曝光。孵育时间过长不会增加灵敏度，有时还会导致曝光条带异常。发光过程的本质是酶促反应，使用过少的发光工作液不利反应进行，也会导致膜上条带曝光不均和明显降低灵敏度。为达节约目的可将 膜剪小但勿降低发光液用量。 4. 用镊子夹起膜，搭在滤纸上沥干发光工作液。但勿洗去发光液。 5. 打开X光胶片暗盒，在暗盒内表面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将Western Blot膜贴在保鲜膜上，将保鲜膜折起来完全包裹Western Blot膜，去除气泡和皱褶，可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖Western Blot膜的保鲜膜固定在暗盒内，蛋白带面向上。 6. 暗房内压X光胶片，分别曝光不同的时间如数秒到数分钟。显影冲洗。 【注意事项】 1. 步骤 1～5 可在日光灯下操作;但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低，移到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。 2. 长时间曝光或蛋白过量，将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。曝光不足则条带模糊。 3. 发光工作液孵育约2分钟后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见，低丰度蛋白条带发光较弱甚至肉眼不可见但可使 X 光胶片曝光。不能简单以肉眼观察判断条带发光时间。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使X光胶片感光，因而弱带可曝光1-10 小时。如果曝光后条带不佳，可用洗膜缓冲液洗膜，重新孵育二抗，然后配制新的ECL工作液重新发光和曝光。 4. 由于超敏发光液极其灵敏，强烈推荐大多数进口抗体起始浓度为一抗 1:1000～1:4000，二抗 1:2000～1:5000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带，导致失败。 5. 某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光，应选择高质量保鲜膜。 6. 使用肉眼可见的预染色蛋白Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。 7. NaN3能抑制HRP活性，回收第二抗体应避免使用NaN3，如必需使用勿超过0.01%。

【保存条件】 常温保存,至少稳定 12 个月 【概述】 FastBlot 快速蛋白电泳转膜液是一种改良的 Towbin 经典缓冲液，这种专有的配方大大提高了转移速度，而不会产生过多的热量而影响蛋白质。可用于半干转膜仪将 5-300kDa 蛋白从聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）快速半干转移至硝酸纤维素膜或 PVDF 膜。 【操作方法】 1. 使用前用去离子水将 5×溶液稀释至 1×工作液：例如将 200ml 5×FastBlot 快速蛋白电泳转膜液加入 600ml 去离子水中混匀，再加入 200ml 甲醇或乙醇充分混匀。（使用前预冷更优） 2. 将 PVDF 膜使用甲醇提前浸泡 3-5 分钟至透明状态，（NC 膜无需提前浸泡) 3. 按操作正确安装您的转膜设备并准备转膜。 4. 转膜条件（参考） 转膜类型 分子量 2 块mini 胶或 1 块midi 胶 1 块 mini 胶 转膜时间 1.5mm 凝胶 任意 2.5A,up to 25V 1.3A,up to 25V 10 分钟 高分子量蛋白 >150KD 2.5A,up to 25V 1.3A,up to 25V 10 分钟 低分子量蛋白 <30KD 2.5A,up to 25V 1.3A,up to 25V 5 分钟 其它分子量蛋白 5-150KD 2.5A,up to 25V 1.3A,up to 25V 7 分钟 注：若使用使用Biorad Trans-blot Turbo Transfer System(Cat: 1704150)设备，可直接替代其中转膜液。 【注意事项】 1. 本品需添加甲醇或乙醇后使用，使用过程中注意相应毒性的防护。 2. 转膜条件为参考条件，具体以实际实验操作优化标准为准。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。